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蠲痹胶囊对膝骨关节炎豚鼠关节软骨组织形态及滑膜中Toll样受体4、NF－κBp65及肿瘤坏死因子－α表达的影响
目的：观察蠲痹胶囊对膝骨关节炎（knee osteoarthritis，KOA）豚鼠关节软骨组织形态及滑膜中Toll样受体4（Toll－like re-ceptor 4，TLR4）、NF－κB p65及肿瘤坏死因子－α（tumor necrosis factor－α，TNF－α）表达的影响，探讨其治疗KOA的可能作用机制。方法：将40只1月龄豚鼠随机分为正常组、3月龄组、5月龄组、氨基葡萄糖组和蠲痹胶囊组，每组8只。分组后正常组豚鼠直接进行标本采集，其余4组饲养至3月龄建立自发性KOA模型。造模结束后，3月龄组豚鼠进行标本采集；5月龄组、氨基葡萄糖组和蠲痹胶囊组分别以纯水、盐酸氨基葡萄糖胶囊和蠲痹胶囊灌胃，每天1次，连续干预2个月后进行标本采集。采集标本为豚鼠左后下肢膝关节髌下韧带表面的滑膜和胫骨内侧平台软骨，制成石蜡切片。软骨组织切片以番红固绿染色后光镜下观察软骨组织形态，采用Mankin’s病理评分标准进行评分；滑膜组织切片进行免疫组织化学染色（SP法），用Image－pro Plus 6．0图像分析软件对阳性染色的平均光密度值进行半定量分析，测定指标包括TLR4、NF－κB p65及TNF－α的表达水平。结果：5组豚鼠关节软骨Mankin’s评分比较，差异有统计学意义[（0．132±0．125）分，（5．011±0．180）分，（7．324±0．293）分，（4．250±0．250）分，（2．500±0．327）分，F＝108．400，P＝0．000]；3月龄组评分高于正常组（P＝0．000），5月龄组评分高于3月龄组（P＝0．000），氨基葡萄糖组评分低于5月龄组（P＝0．000），蠲痹胶囊组评分低于氨基葡萄糖组（P＝0．000）。5组豚鼠关节滑膜中TLR4、NF－κB p65及TNF－α表达量比较，组间差异均有统计学意义（0．000±0．000，0．268±0．021，0．454±0．043，1．879±0．013，0．116±0．015，F＝97．000，P＝0．000；0．023±0．019，0．251±0．142，0．525±0．103，0．217±0．087，0．211±0．019，F＝40．293，P＝0．000；0．047±0．023，0．386±0．142，0．812±0．174，0．289±0．151，0．204±0．108，F＝78．242，P＝0．000）；3月龄组TLR4、NF－κB p65及TNF－α表达量均高于正常组（P＝0．000，P＝0．000，P＝0．000），5月龄组TLR4、NF－κB p65及TNF－α表达量均高于3月龄组（P＝0．000，P＝0．000，P＝0．000），氨基葡萄糖组TLR4、NF－κB p65及TNF－α表达量均低于5月龄组（P＝0．000，P＝0．000， P＝0．000），蠲痹胶囊组TLR4、NF－κB p65及TNF－α表达量均低于氨基葡萄糖组（P＝0．011，P＝0．019，P＝0．008）。结论：蠲痹胶囊和盐酸氨基葡萄糖均可延缓KOA豚鼠关节软骨退变，蠲痹胶囊的作用更加明显；其作用机制可能是通过激活TLR4／NF－κB信号转导通路来抑制炎性因子TNF－α表达，从而减轻组织炎症反应。
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OPA柱前衍生-高效液相色谱法测定氨基葡萄糖
目的:建立氨基葡萄糖含量测定的高效液相色谱-紫外检测器分析法.方法:样品经OPA柱前衍生处理,使用ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇+乙腈+水=15+15+70,流量1.0 ml/min,检测波长330 nm.结果:方法检出限为20 ng,回收率为98.3%～102.5%,线性范围0.02 mg/ml～1 mg/ml,相关系数为0.9993,标准偏差(RSD)为0.27%～2.98%.结论:本方法检测灵敏度高,线性范围宽,适用于氨基葡萄糖盐酸盐或硫酸盐的测定.
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高效离子色谱法测定氨基葡萄糖类化合物
目的:建立快捷、灵敏检测N-乙酰-D-氨基葡萄糖和D-氨基葡萄糖盐酸盐的离子色谱法.方法:采用离子色谱-积分脉冲安培检测法检测N-乙酰-D-氨基葡萄糖和D-氨基葡萄糖盐酸盐的含量,以NaOH淋洗液梯度淋洗,在CarboPae PAIO高效阴离子交换柱(HPAEC)上实现分离,用Au工作电极、Ag/AgCl参比电极的脉冲安培检测器测定N-乙酰-D-氨基葡萄糖和D-氨基葡萄糖盐酸盐.结果:N-乙酰-D-氨基葡萄糖和D-氨基葡萄糖盐酸盐在0.02～20 mg/L范围内线性相关良好,相关系数r2分别为0.9999和0.9995.进样25μl、S/N=3时,方法检出限分别为0.005 mg/L和0.01 mg/L.精密性实验相对标准偏差为0.35%和0.76%;两种糖的加标回收率均在95.3%～101.6%之间.结论:建立的离子色谱-脉冲安培检测法检测N-乙酰-D-氨基葡萄糖和D-氨基葡萄糖盐酸盐,方法可靠、无需衍生、简便快捷、分离效果好、灵敏度高,可以在15 min内完成定量分析.
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HPLC-ELSD测定氨基葡萄糖含量
目的:建立固相萃取高效液相色谱法测定水中二苯胺残留量的方法.方法:样品经固相萃取后进行高效液相色谱测定.色谱柱为SUPELCO Discovery C185 μm 250回收率为96.0%～97.7%.结论:此法简便、快速、准确,无需衍生反应,是测定氨基葡萄糖含量的有效方法,并可用于硫酸氨基葡萄糖含量的测定.
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氨基葡萄糖液相色谱-质谱联用含量测定方法研究
目的:建立了氨基葡萄糖液相色谱-质谱联用含量测定方法.方法:优化液相色谱条件选择了CAPCELLPAK CR l:4色谱柱,流动相:乙腈-20 mmol/L乙酸铵溶液(含0.1％醋酸)=1:1；流速:0.3 ml/min分离保留氨基葡萄糖,采用正离子检测,选择反应监测(SRM)进行定性定量.结果:方法的线性范围0.05μg/ml～500 μg/ml,低定量浓度为5μg/g,结论:方法简便,灵敏度高,具有创新性,适用于药品及保健品中氨基葡萄糖含量的准确测定.
关键词： 氨基葡萄糖 定量分析 高效液相色谱串联质谱电喷雾检测法 -
氨糖软骨素胶囊对小鼠免疫增强作用的研究
目的:研究氨糖软骨素胶囊对小鼠免疫功能的影响.方法:采用清洁级KM小鼠,每剂量组12只,分别经口给予0.27、0.53和1.60 g/kg·bw 3个剂量的氨糖软骨素胶囊,以蒸馏水为对照组,通过淋巴细胞转化试验、小鼠迟发型变态反应试验、血清溶血素测定、抗体生成细胞检测、小鼠碳廓清试验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验及NK细胞活性测定来评价其对小鼠的免疫增强作用.结果:各剂量组对淋巴器官脏体指数没有影响;3个剂量组均能增强小鼠迟发型变态反应强度,提高溶血空斑数,中、高剂量组能提高小鼠血清溶血素及NK细胞活性,高剂量组能促进淋巴细胞增殖,低、高剂量组能加速小鼠单核-巨噬细胞碳粒廓清速率,低、中剂量组能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬指数.结论:氨糖软骨素胶囊能增强小鼠的免疫功能.
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亲水作用色谱法同时测定保健品中的硫酸软骨素和氨基葡萄糖
目的 建立亲水作用色谱结合PDA检测器同时测定保健品中硫酸软骨素和氨基葡萄糖的高效液相色谱法.方法 采用Waters Xbridge HILIC色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm),以乙腈-10 mmol/L乙酸铵(95∶5,V/V)为流动相,流速为1.0 ml/min,柱温为35℃,检测波长为192 nm,进样体积为5μl.结果 在上述色谱条件下,硫酸软骨素和氨基葡萄糖在10 μg/ml～ 200 μg/ml内线性关系良好,硫酸软骨素和氨基葡萄糖的检出限均为3.0 μg/ml,回收率分别为94.18％、93.45％.混合溶液在48 h内稳定.结论 本方法经方法学检验,灵敏度和专属性高,稳定可靠,适用于同时测定保健品中的硫酸软骨素和氨基葡萄糖.
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联合玻璃酸钠与氨基葡萄糖治疗膝骨关节炎
目的 观察关节腔注射玻璃酸钠与口服氨基葡萄糖治疗膝骨性关节炎的效果.方法 对58例膝骨性关节炎患者,关节腔注射玻璃酸钠针,1次/周,连续5次为一疗程.同时口服氨基葡萄糖片,1片,次,2次/d.在治疗后6周及6个月,对患者随访,进行体检,评价治疗前后的基础临床症状和日常活动能力的改善情况.结果 采用该疗法治疗前后,关节疼痛或压痛、关节积液、骨擦(感)音、日常关节活动能力的评分,经Wilcoxon配对序和试验,P<0.01.结论 该疗法对改善膝骨性关节炎在基础临床症状和日常活动能力效果显著,是目前治疗膝骨关节炎的一种较理想方法.
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氨基葡萄糖对CCl4所致小鼠肝损伤的改善作用
目的:研究氨基葡萄糖(GlcNH2)的抗氧化能力和对CCl4诱导的小鼠肝损伤的改善作用.方法:雄性昆明种小鼠24只随机均分为3组.GlcNH2组每d GIcNH2(1.5 g/kg)灌胃;CCl4损伤组和空白对照组每d给予相应体积的生理盐水.前2组于第12天末次给药3 h后腹腔注射CCl4(20 mg/kg),24 h后眼球取血,分别测定各组小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)的活性,处死动物后取肝组织,测定肝匀浆中总抗氧化能力(T-AOC).总巯基(T-SH)、非蛋白结合巯基(NP-SH)、金属硫蛋白(MT)、丙二醛(MDA)含量和DNA损伤情况.结果:小鼠腹腔注射CCl424 h后,血清AST和ALT活性明显提高,引起肝脏脂质过氧化反应,巯基含量降低,T-*辽宁省教育厅高校科研计划基金资助项目 20060153,2008117;大连民族学院博士科研启动基金资助项目 20056106AOC减弱,诱发基因毒性.提前连续12 d灌胃给予GlcNH2能够显著诱导MT的表达,体内的抗氧化防御系统随之增强以抵抗CCl4诱导的氧化损伤.GlcNH2组与CCl4损伤组相比,AST、ALT活性和MDA含量均明显下降,T-AOC和T-SH、NP-SH、MT含量与CCl4组相比均明显提高.DNA电泳结果显示,GlcNH2组与CCl4组的DNA链都形成一系列1000 bp大小左右的DNA片段.结论:GlcNH2具有抗氧化能力,其对CCl4诱导的小鼠肝损伤有较为明显的改善作用,但是不能减轻DNA的氧化性损伤.
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几种新型Schiff碱衍生物抗菌活性的测定
目的:对6种Schiff碱衍生物抗菌活性进行测定.方法:利用氨基葡萄糖与苯甲醛及其衍生物在甲醇溶剂中回流,合成了6种新的Schiff 碱衍生物;通过悬菌定量法测定其抗菌活性.结果:6种Schiff衍生物a、b、c、d、e、f对大肠杆菌15 min杀灭率分别达到(69.91±8.36)%、(99.16±3.46)%、(99.29±1.35)%,(98.67±5.34)%、(78.50±7.85%)、(62.63±7.12)%.结论:该6种化合物的抗菌效果不同.
关键词： 氨基葡萄糖 Schiff碱衍生物 抗菌活性 -
玻璃酸钠联合氨基葡萄糖对膝骨关节炎的治疗效果观察
目的 观察玻璃酸钠联合氨基葡萄糖对膝骨关节炎(KOA)的治疗效果.方法 选取开封市第二人民医院2015年1月至2016年5月收治的96例KOA患者,采用随机数表法分为两组,各48例.对照组患者接受氨基葡萄糖治疗,观察组在对照组基础上接受玻璃酸钠治疗,分别采用Lysholm膝关节评分量表、视觉模拟评分法(VAS)评价两组患者治疗前后膝关节功能及膝关节疼痛程度,并比较两组患者治疗效果.结果 观察组患者治疗后Lysholm评分高于对照组[(92.64±7.25)分比(84.60±6.96)分];VAS评分低于对照组[(3.14±1.07)分比(4.58±1.26)分],治疗总有效率高于对照组(93.75％比79.17％),差异有统计学意义(P<0.05).结论 玻璃酸钠联合氨基葡萄糖治疗KOA效果显著,可改善患者膝关节功能,缓解膝关节疼痛,可在临床推广.
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离子色谱法测定氨基葡萄糖药物中的成盐离子
目的 建立离子色谱法测定氨基葡萄糖药物中成盐离子的含量.方法 采用TOSOH IC-2010离子色谱仪,TSKgel SuperC-AZ 阴离子色谱分析柱;碳酸钠缓冲液作为淋洗液,采用电导检测器对氨基葡萄糖中成盐离子SO42-进行分离测定.结果 氨基葡萄糖药物中SO42-在0.005-0.1mg·mL-1范围内线性关系良好,相关系数为0.9977.结论 本方法快速、准确,可同时检测氨基葡萄糖药物中的SO42-和Cl-.
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氨基葡萄糖与铜钴镍三种金属离子的配位性能研究
目的 研究氨基葡萄糖的质子化和与Cu2+,Co2+,Ni2+的配位性能.方法 用pH电位滴定法测定(298±0.1)K,I=0.10 mol/LKNO3条件下氨基葡萄糖的质子化常数及与Cu2+,Co2+,Ni2+的二元配合物的生成常数.结果 氨基葡萄糖pKa为7.78,配合物生成常数的对数分别为:Cu2+,5.22(110),9.38(120);Co2+,3.19(110),5.99(120);Ni2+,3.40(110),6.31(120).结论 氨基葡萄糖与Cu2+,Co2+,Ni2+配位时不解离出醇羟基质子,不同金属离子配合物生成常数的大小符合Irving-William序列.
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钴(Ⅱ)-氨基葡萄糖-α-氨基酸三元配合物的稳定性研究
目的 研究钴(Ⅱ)-氨基葡萄糖-α-氨基酸三元配合物的稳定性.方法 pH电位滴定法测定(298±0.1)K,I=0.10mol/L KNO3条件下钴(Ⅱ)-氨基葡萄糖-α-氨基酸三元配合物的稳定常数.结果 钴(Ⅱ)与氨基葡萄糖和甘氨酸(Gly)、脯氨酸(Pro)、丝氨酸(Ser)、缬氨酸(Val)、异亮氨酸(ILE)、苯丙氨酸(Phe)、蛋氨酸(Met)形成的三元配合物的稳定常数分别为8.64,8.49,7.65,8.61,8.72,8.32,8.45.结论 在钴(Ⅱ)-氨基葡萄糖-α-氨基酸三元体系中,生物配体氨基葡萄糖和α-氨基酸具有良好的相容性,三元配合物的稳定性随α-氨基酸的碱性及二元配合物稳定性的增大而增大.
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猴头菌丝体中氨基葡萄糖的测定
目的 明确猴头菌丝体中氨基葡萄糖含量与培养材料及培养时间的关系.方法 将不同培养方式的猴头菌丝体消解,中和、显色后用分光光度法测定氨基葡萄糖含量.结果 不同培养材料培养的猴头菌丝体中氨基葡萄糖含量不同,以马铃薯培养液培养的猴头菌丝体中氨基葡萄糖含量高,小麦和玉米培养液培养的猴头菌丝体中氨基葡萄糖含量相近,玉米培养液的稍高;不同培养时间的猴头菌丝体中氨基葡萄糖的含量有差异,但在25～35 d期间内差异不大.结论 测定固体培养猴头的菌丝量时,要选用与固体培养基相似条件培养的纯菌丝体作为参照物,培养时间宜在25～35 d之间.
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氨基葡萄糖治疗骨关节炎的临床近况
骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是一种发病率很高的关节肿痛和不同程度功能障碍的退行性疾病,多发于中年以后,严重者可致功能丧失[1].根据国际风湿病协会( International League Against Rheumatism,ILAR)和世界卫生组织(WHO)的倡议,目前治疗OA的药物分为非特异性和特异性药物两大类.非特异性药物主要包括口服非阿片类止痛药(对乙酰氨基酚、中枢镇痛药)、非甾体抗炎药和关节腔内注射糖皮质激素等.这类药物主要是抗炎、止痛,即症状改善药,但不能缓解病情,若使用不当,甚至加重病情.特异性药物是近10年左右开发用于治疗OA的氨基葡萄糖(glucosamine,GlcN)药物,也称慢作用药.
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正骨伸筋胶囊联合血小板裂解液对兔膝骨关节炎软骨组织形态及血清IL-1和TNF-α含量的影响
目的:观察正骨伸筋胶囊联合血小板裂解液对兔膝骨关节炎软骨组织形态及血清IL-1和TNF-α含量的影响,初步明确正骨伸筋胶囊联合血小板裂解液治疗膝骨关节炎(KOA)的作用机制.方法:将6月龄30只新西兰大白兔随机分为对照组、氨基葡萄糖组和正骨伸筋胶囊联合血小板裂解液组,每组10只.分组后建立自发性KOA模型,取耳缘静脉血.造模结束后,正常组、氨基葡萄糖组和正骨伸筋胶囊联合血小板裂解液组分别以纯水、盐酸氨基葡萄糖注射液、正骨伸筋胶囊注射液灌胃及血小板裂解液关节腔注射,1次/d,连续干预2个月后进行标本及血液采集.采集标本为新西兰大白兔右后下肢膝关节髌下韧带表面的滑膜和胫骨内侧平台软骨,制成石蜡切片;血液取血为耳缘静脉血.软骨组织切片染色后光镜下观察软骨组织形态,采用Mankin's病理评分标准进行评分;对大白兔治疗前后血清IL-1及TNF-α含量进行分析比较.结果:3组大白兔关节软骨Mankin's评分比较,差异有统计学意义[(0.284±0.128)分,(3.790±0.480)分,(2.930±0.287)分,F=113.900,P＜0.001];3组治疗前后血清IL-1及TNF-α含量比较差异有统计学意义(P＜0.05),治疗组治疗后血清IL-1及TNF-α含量优于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:正骨伸筋胶囊联合血小板裂解液和盐酸氨基葡萄糖均可延缓KOA兔膝关节软骨退变,但正骨伸筋胶囊联合血小板裂解液的作用更加明显;正骨伸筋胶囊能有效降低膝骨关节炎患者血清IL-1及TNF-α含量,血小板裂解液可修复关节软骨,为其减少炎症刺激等作用机制提供了一定的分子细胞生物学及生物组织工程学方面的依据.
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氨基葡萄糖治疗骨关节炎的现状
骨关节炎(Osteoartllritis,OA)是一种十分常见的疾病,根据1990年的统计,在美国25岁以上人群中,有症状的OA患病率高达12.1%(近2100万人)[1].而在30岁以上人群中,膝关节OA病人近6%,髋关节OA病人约占3%[2].这些病人往往有明显的功能障碍,对生活质量造成了很大的影响,尤其是老年人.1994年美国在骨关节炎方面的医疗支出高达155亿美元.我国OA患者至少在5千万以上.在45～55岁的人群中,男女发病频率相当,而55岁以上以女性患者明显居多.因此OA的治疗正越来越受到广泛地关注.
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氨基葡萄糖对膝骨关节炎白细胞介素-6、血管内皮细胞生长因子影响的临床研究
目的 观察膝骨关节炎患者关节液中白细胞介素-6(IL-6)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平的变化,以及盐酸氨基葡萄糖对IL-6、VEGF水平的影响.方法 76例膝骨关节炎患者随机分A组(常规治疗组)和B组(盐酸氨基葡萄糖治疗组),A组予以常规治疗,B组在常规治疗基础上,予口服氨基葡萄糖胶囊,连续治疗8周.A、B两组患者均停用非甾体类抗炎药2周后,行患膝关节腔穿刺、抽吸滑液.于治疗前、治疗后检测其关节液中IL-6、VEGF的含量,进行疗效评价.结果 A、B两组患者治疗前,关节滑液IL-6、VEGF水平比较无差异,治疗后,两组IL-6、VEGF均明显降低,治疗组下降更明显,组间比较,差异有统计学意义.结论 关节滑液中IL-6、VEGF与骨关节炎的发生、发展关系密切,其含量的高低与临床症状呈正相关.盐酸氨基葡萄糖能够减少骨关节炎关节滑液中IL-6、VEGF含量,减轻炎症反应,从而改善临床症状,这可能是盐酸氨基葡萄糖治疗骨关节炎的作用机制之一.
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氨基葡萄糖联合透明质酸钠治疗颞下颌关节骨关节病的临床观察
目的:探讨氨基葡萄糖联合透明质酸钠治疗颞下颌关节骨关节病的临床效果.方法:54例颞下颌关节骨关节病患者随机分为治疗组和对照组,各27例,治疗组采用关节上腔注射透明质酸钠,并同时开始口服氨基葡萄糖,对照组则仅行关节上腔注射透明质酸钠.所有患者治疗前及3个月后进行Fricton颞下颌关节紊乱指数和疼痛指数评分,评价患者颞下颌关节功能的变化.结果:经治疗后54名患者的颞下颌关节紊乱指数和疼痛指数明显改善,治疗组疗效优于对照组.结论:口服氨基葡萄糖联合关节上腔注射透明质酸钠治疗颞下颌关节骨关节病有协同作用,临床效果显著.
