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含油食品过氧化值快速测定
过氧化值是油脂酸败敏感的指标之一,而样品的前处理,即油脂的抽提直接影响着该指标测定的准确性.为适合基层实验室的需要,本文设置了不同的实验条件,探讨分析油脂抽提过程中可能影响的因素,提出了一个不用减压抽提设备,又能达到既快速简便,又准确可靠的方法,以满足基层检验室日常监测的需要.现报告如下.
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改良的石蜡包埋组织中提取高质量基因组DNA
从石蜡包埋组织中提取基因组DNA,采用聚合酶链反应(PCR)进行基因检测,在临床常用于疾病的回顾性调查和研究.目前国内外从石蜡包埋组织中提取基因组DNA,多采用经二甲苯脱蜡,该方法可以获得所需要的DNA,但整个抽提过程过长、所得的DNA量很较少,并且易出现DNA链的降解(小片段的DNA)[1],同时在提取过程中所使用的有机溶剂二甲苯试剂易造成环境的污染和对操作者身体的伤害.为了改进从石蜡包埋组织中提取基因组DNA的方法,在简化步骤的同时获得高质量的DNA,我们在查阅了近几年的相关文献资料[2-5]及已有的经验和基础上,对3种石蜡包埋组织中提取基因组DNA的方法进行了比较,建立了一种相对简便有效、安全可行的从石蜡包埋组织中提取高质量基因组DNA的改良方法,经实验证明已获得较为满意的结果.
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聚合酶链反应快速检测念珠菌属
病原真菌因具有特殊的细胞壁结构,故聚合酶链反应 (PCR)检测方法自建立以来一直需要经过反复的真菌破壁和 DNA抽提过程才能获取提纯的 DNA,以进行下一步的 PCR检测 [1- 3]。近来有学者已使用基因释放剂、 CTAB及异硫氰酸胍等 [4- 6]对真菌菌株或临床标本进行前期处理,然后进行 PCR检测,但这仍需要配制复杂的原生质体形成缓冲液、原生质体裂解缓冲液 [6]等,或者高额购买商品化的基因释放剂 [4,5],这不仅需要较高的技术要求、较大的实验成本、经过一定训练的技术人员,还要历经较长的实验时间,严重限制了真菌病 PCR检测方法在临床的应用和普及。因此我们以念珠菌属作为突破口,对其破壁—破膜—释放 DNA系列程序的条件及相应的 PCR扩增体系作了反复研究,终获得了一种简便、快速的 PCR检测方法,现介绍如下。