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锰对HUVEC-304细胞生长及p53、p21WAF1/CIP1蛋白表达的影响
目的 探讨锰对人脐静脉内皮细胞系HUVEC-304细胞生长及p53、p21WAF1/CIP1蛋白表达的影响.方法 取指数生长期HUVEC-304细胞,以100、200、400、800 μmol/L MnCl2,分别作用24、48、72 h后,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色实验检测细胞的存活力,筛选锰对细胞的毒性剂量.流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡,Western blot方法检测p53、p21WAF1/CIP1蛋白的表达.结果 100、200、400、800 μmol/L MnCl2作用24、48、72 h均对HUVEC-304细胞有显著的抑制作用(P＜0.05),且呈剂量-时间效应关系.流式细胞仪检测结果表明锰能诱导HUVEC-304细胞凋亡(P＜0.01),Western blot结果显示,随锰浓度的增高,p53蛋白的表达下降(P＜0.05);而p21WAF1/CIP1蛋白表达上升,差异有统计学意义(P＜0.05),且呈剂量依赖性.结论 锰可抑制HUVEC-304细胞的增殖,诱导其发生凋亡,p53蛋白的表达减少及p21WAF1/CIP1蛋白的表达增加是其发生凋亡的机制之一.
关键词： 锰 HUVEC-304细胞 P53蛋白 p21WAF1/CIP1蛋白 -
Smad4及 P21WAF1／CIP1在卵巢上皮癌组织中的表达及意义
目的：探讨卵巢上皮良性肿瘤、卵巢上皮交界性肿瘤和卵巢上皮癌组织中Smad4蛋白及P21WAF1/CIP1蛋白的表达及两者的相关性。方法采用免疫组织化学EliVision方法，检测24例卵巢上皮良性肿瘤、22例卵巢上皮交界性肿瘤和43例卵巢上皮癌组织中Smad4蛋白及P21WAF1/CIP1蛋白表达情况。结果 Smad4蛋白在三组中阳性表达率比较无显著性差异（ P＞0．05），Smad4蛋白表达与卵巢上皮癌临床病理参数无关。 P21WAF1/CIP1蛋白阳性表达率卵巢上皮良性肿瘤与卵巢上皮交界性肿瘤组织比较无显著性差异（P＞0．05）；但卵巢上皮癌组织中其阳性表达率却显著低于卵巢上皮良性肿瘤及卵巢上皮交界性肿瘤组织，且P21WAF1/CIP1蛋白表达随着恶性肿瘤临床分期及病理分化的升高而下降，而与卵巢上皮癌组织学类型及有无淋巴结转移等病理特征无关；在卵巢上皮癌组织中，Smad4蛋白与P21WAF1/CIP1蛋白表达无明显相关性（γs ＝0．099，P＞0．05）。结论 Smad4蛋白表达或缺失与卵巢上皮肿瘤的发展无关，而P21WAF1/CIP1蛋白的缺失与卵巢上皮癌的发展关系密切；在卵巢上皮癌中P21WAF1/CIP1蛋白的表达或缺失不受Smad4蛋白的调控。
关键词： 卵巢上皮癌 Smad4蛋白 p21WAF1/CIP1蛋白 免疫组化 -
氯乙烯对大鼠肝细胞P21WAF1/CIP1和P53蛋白表达影响
目的 研究氯乙烯(VCM)对大鼠肝细胞P21WAF1/CIP1和P53蛋白表达的影响.方法 64只无特定病原体级SD大鼠(雌雄各半)随机分为低、中、高3个剂量组和1个对照组,采用腹腔注射染毒,低、中、高剂量组分别以5、25、125mg/kg剂量VCM气体腹腔注射染毒,对照组注射同中剂量组相同体积的清洁空气.每周3次,持续12周.染毒6、12周时每组分别随机处死8只大鼠(雌雄各半),光镜下观察染毒大鼠肝组织病理改变,免疫印迹法检测肝细胞中P21WAF1/CIP1和P53蛋白的表达.结果 VCM染毒6周时,各剂量组大鼠肝细胞P21WAF1/CIP1蛋白表达量均较对照组降低,高剂量组P53蛋白表达量较对照组增加,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.001).VCM染毒12周时,高剂量组大鼠肝细胞P21 WAF1/CIP1蛋白表达量高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).各剂量组染毒12周和6周比较,P21WAF1/CIP1蛋白表达量均增高,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.001).组织病理学检查发现VCM染毒12周时,肝细胞有气球样变,汇管区变大,纤维化等改变.结论 VCM可导致大鼠肝细胞P21WAF1/CIP1和P53蛋白表达改变.
关键词： 氯乙烯 P53蛋白 p21WAF1/CIP1蛋白 蛋白印迹 -
增殖细胞核抗原和细胞周期依赖性激酶抑制剂p21WAF1/CIP1蛋白在大鼠肾上腺细胞体外原代培养中的表达及其意义
目的:探讨增殖细胞核抗原(HHA)和细胞周期依赖性激酶抑制剂p21WAF1/CIP1蛋白在大鼠肾上腺细胞体外原代培养中的表达及其意义.方法:用SP免疫组化法检测大鼠肾上腺细胞培养第3、5、7、9、11 d的PCNA和p21蛋白表达强度.结果:在肾上腺细胞体外培养中.第3 d((18±3)%)、5 d((38±5)%)、7 d((70±65)%)PCNA蛋白表达逐渐增强.第9((50±3)%)、11 d((39±2)%)与第7 d比减弱(P<0.05).第3 d((43±5)%)、5d((35±2)%)、7d((21±3)%)p21WAF1/CIP1蛋白表达逐渐减弱,第9 d((39±3)%)、11 d((52±4)%)与第7 d比重新增强(P<0.05).结论:肾上腺细胞体外原代培养在第7 d PCNA蛋白表达强,p21WAF1/CIP1蛋白表达弱,肾上腺细胞增殖也旺盛.
关键词： 增殖细胞核抗原 p21WAF1/CIP1蛋白 肾上腺 细胞培养 Wistar大鼠 -
胃癌中P53蛋白转录调控活性的分析及其临床意义
目的 探讨P53蛋白转录调控活性在胃癌发生发展中的作用.方法 应用双荧光素酶报告基因测试(dual-luciferase reporter assay)检测人类胃癌细胞和正常细胞中p53转录调控活性,并通过逆转录-PCR对细胞中p53全长进行扩增,构建pMD18-T-p53重组质粒测序,检测p53突变对其活性的影响.应用免疫组织化学的方法 联合检测P21WAF1/Cip1,Gadd45α,Mdm2三种蛋白在76例胃癌及癌旁组织中表达水平,通过分析它们与肿瘤的临床病理特征及各个分子之间的相关性来间接反应P53在组织中的转录调控活性.结果 双荧光素酶报告基因显示p53转录调控活性在正常细胞中明显高于肿瘤细胞,在p53基因发生突变的细胞系MKN28中P53蛋白转录活性低.免疫组化结果显示P21WAF1/Cip1,Gadd45α,Mdm2在癌旁组织中的表达明显高于肿瘤组织(P<0.05),且随着肿瘤TNM分期的增高有表达降低的趋势(P<0.05).P21WAF1/Cip1,Gadd45α,Mdm2之间的相关性分析结果显示3个分子在胃癌组织和癌旁组织中的表达呈正相关(P<0.05).结论 P53蛋白转录调控活性的变化在胃癌的发生发展中起着重要的作用,p53突变可以影响其转录调控活性.P21WAF1/Cip1,Gadd45α,Mdm2联合检测可以作为间接反映P53蛋白转录调控活性的效应分子.
关键词： P53蛋白 p21WAF1/CIP1蛋白 MDM2蛋白 Gadd45α蛋白 胃癌 -
子宫内膜癌p21WAF1/CIP1蛋白的表达及其意义
背景与目的:探讨p21WAF1/CIP1蛋白在子宫内膜癌中的表达情况及其意义.材料与方法:应用免疫组织化学SP法检测30例正常子宫内膜,20例单纯性增生性宫内膜,22例不典型增生性宫内膜,57例子宫内膜癌(高分化32例,中分化12例,低分化13例)中p21WAF1/CIP1蛋白的表达. 结果:p21WAF1/CIP1蛋白表达于细胞核,子宫内膜癌中p21WAF1/CIP1蛋白的表达明显低于正常子宫内膜和单纯性增生性子宫内膜(P＜0.01),且p21WAF1/CIP1蛋白的表达与子宫内膜癌组织有无肌层浸润及临床分期明显相关(P均＜0.05).结论:p21WAF1/CIP1蛋白表达降低可能在子宫内膜癌的发生发展及判断预后方面具有重要作用.
关键词： 免疫组织化学 p21WAF1/CIP1蛋白 子宫内膜癌 -
P21WAF1/CIP1、P16蛋白表达与人脑神经胶质瘤的相关分析
背景与目的:探讨 P21WAF1/CIP1、P16两种抑癌基因与人脑神经胶质瘤恶性程度的关系.材料与方法:采用 SABC免疫组织化学方法对 98例人脑胶质瘤组织及 12例正常脑组织标本中 P21WAF1/CIP1和 P16的表达进行检测,并进行相关分析.结果:P21WAF1/CIP1和 P16阳性表达率在人脑胶质瘤中分别为 58.16%和 42.86%,与正常脑组织中的表达情况差异有统计学意义;P21WAF1/CIP1蛋白和 P16蛋白阳性表达率均随着胶质瘤的恶性程度的增高而降低;P21WAF1/CIP1蛋白和 P16蛋白可协同表达.结论:P21WAF1/CIP1与 P16蛋白的阳性表达率及协同表达率可在一定程度上反映胶质瘤细胞的恶性生物学行为,可以作为一项判断其恶性程度的有效指标.
关键词： 脑胶质瘤 p21WAF1/CIP1蛋白 p16蛋白 免疫组织化学
