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S型氯代甘油醇对大鼠精子运动和超活化抑制作用研究
目的 研究S型氯代甘油醇( SACH)对大鼠精子运动和超活化的影响和可能机制.方法 20只成熟雄性SD大鼠随机分为4组,分别给予0、2.5、5.0和10mg/kg BW SACH,连续灌胃染毒52天.取附睾尾精子,获能条件下培养5h,以计算机辅助精子分析系统检测精子运动和超活化运动,同时检测精子特异的3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDS)活性、三磷酸腺苷(ATP)和环磷酸腺苷(cAMP)水平,观察己酮可可碱(PTF)对SACH的拮抗作用.结果 SACH染毒组大鼠精子曲线运动速率(VCL)、平均路径速率(VAP)、直线运动速率(VSL)和精子头侧摆幅度(ALH)与对照组相比受到显著抑制(P＜0.01),运动直线性( LIN)显著增强(P＜0.01).SACH使VCL≥400μm/s或LIN≤20％的比例显著减少(P＜0.01和P＜0.05),表明精子超活化受抑制.SACH显著抑制GAPDS活性,ATP和cAMP水平也随染毒剂量增加呈下降趋势.PTF可改善精子cAMP水平,部分缓解精子运动和超活化的抑制程度.结论 SACH抑制大鼠精子GAPDS活性导致ATP和cAMP水平下降,可能是影响精子运动和超活化的重要机制.
关键词： S型氯代甘油醇 精子运动 超活化 3-磷酸甘油醛脱氢酶 环磷酸腺苷 -
精子运动能力评价方法研究进展
精子运动能力评价对男性不孕症临床检验与治疗、试管婴儿临床应用、濒危动物的生殖研究有重要意义.伴随电子技术与光学技术发展,评价方法经历了初的人眼显微镜观察方法、光散射测量到精子动态特性计算机自动分析方法,操作越来越简便、评价越来越准确和客观.本文对上述评价方法进行简单介绍.
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电针治疗大鼠弱精子症的实验研究
目的:研究不同电针参数对大鼠弱精子症的治疗作用.方法:将105只雄性SD大鼠随机分为2 Hz-每日电针组9只、假电针组10只、模型组10只,2 Hz-隔日电针5d组、假电针组、模型组各8只,2 Hz-隔日电针9d组、假电针组、模型组各10只,100 Hz-隔日电针组7只、假电针组8只、模型组7只.采用奥硝唑灌胃法建立弱精子症大鼠模型.各电针组电针双侧“足三里”“肾俞”穴,各假电针组予常规针刺.2 Hz-每日电针组,每日治疗1次,共3次;2 Hz-隔日电针5d组,隔天治疗1次,共3次;2 Hz-隔日电针9d组,隔天治疗1次,共5次;100 Hz-隔日电针组,隔天治疗1次,共5次.通过计算机辅助精子分析系统观察电针对精子密度、活率、活力、A级精子数以及A+B级精子数的影响.结果:2 Hz-每日电针组:与模型组及假电针组相比,2 Hz-每日电针治疗对弱精子症大鼠精子运动的各项指标均没有明显改善作用(P＞0.05).2 Hz-隔日电针5d组:与模型组相比,2 Hz-隔日电针5d治疗可以增加大鼠精子的活力、A级精子数以及A+B级精子数(P＜0.05);而与假电针组相比,2 Hz-隔日电针5d治疗只增加了A+B级精子数(P＜0.05).2 Hz-隔日电针9d组:与模型组及假电针组相比,电针后弱精子症大鼠精子的活率、活力、A级精子数、A+B级精子数均显著升高(P＜0.001).100 Hz-隔日电针组:与模型组及假电针组相比,100 Hz-隔日电针5次治疗可提高大鼠精子的活率(P＜0.001,P＜0.05)、活力(P＜0.001,P＜0.01)、A级精子数及A+B级精子数(P＜0.01).各电针参数对弱精子症大鼠的精子密度无明显影响(P＞0.05).结论:2 Hz-隔日电针9d或100 Hz-隔日电针9d都可以提高弱精子症大鼠的精子活率和活力,提升精子运动能力,对弱精子症有一定的治疗作用.
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补肾益精方含药血清对人精子离体质量的影响
目的研究补肾益精方含药血清体外对人精子运动能力和受精能力的影响.方法通过人精子与补肾益精方含药血清共培养,观察补肾益精方对人精子运动能力(精子运动CASA分析)、精子爬高试验的影响.结果含药血清加入共培养可显著提高人精子运动速度[精子运动路径速度(VAP)、精子轨迹速度(VCL)、精子前向运动速度(VSL)](P＜0.01)、精子头部侧置振幅(ALH)和鞭毛摆动频率(BCF)及前向运动精子密度(P＜0.05),提高精子爬高试验(P＜0.01).结论补肾益精方具有提高人精子离体质量的作用.
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野山楂根含药血清对弱精子症患者精子运动参数影响的体外研究
目的:研究野山楂根含药血清体外对弱精子症患者精子运动能力的影响.方法:将16例弱精子症患者精子与野山楂根含药血清共同孵育,在5,15,30,60,120min采用计算机辅助精子分析系统(CASA)检测精子活动率和精子运动参数.结果:含药血清在5,15min即能显著提高弱精子症患者精子前向运动百分率(P＜0.05),在60min和120min时使精子活动率和前向运动百分率有极显著的增加(P＜0.01),其刺激作用呈现出一定的时效关系.结论:野山楂根在体外能改善弱精子症患者精子运动功能,可能对弱精子症有一定的治疗功效.
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β高效氯氰菊酯对雄性小鼠精子运动的影响
目的：探讨高效氯氰菊酯对雄性小鼠精子运动的影响。方法：择体重为25~35g 健康清洁级小鼠60只,随机分为6组,每组10只,设高、中、低三个剂量组,溶剂组、空白对照组(生理盐水)和环磷酰胺阳性对照组。除环磷酰胺阳性对照组小鼠外,其余各组小鼠均按0.2ml/10g 灌胃给药5d,于染毒后7d、14d 分两批处死,用40倍光镜下计数精子快速直线运动、慢呆直线运动,非向前运动,不动精子数量,每只小鼠计数完整的精子1000条。结果：本次实验结果显示染毒14d 后各实验组小鼠间精子快速、慢呆直线运动、非向前运动,不动比率,差别有统计学意义。结论：高效氯氰菊酯对小鼠精子的运动能力有影响。
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一步熏蒸对麦管冻融人类精子运动能力的影响
目的 比较一步熏蒸法和程序降温法对人类精子冷冻复苏后运动能力的影响.方法 25份精液标本取自2011年5至7月上海市人类精子库25名精液捐赠者,应用麦管为冷冻载体,按照1∶1的比例添加改良甘油-卵黄-柠檬酸钠作为冷冻保护剂,将液化后的每份精液标本平均分为2份,分别进行一步熏蒸法和程序降温法冷冻.按照世界卫生组织推荐标准对冷冻前后的标本进行精液常规分析,利用IVOS精子分析仪进行精子密度、总活动率、前向运动精子百分率、运动参数(包括平均路径速度、平均直线速度、平均曲线速度、平均鞭打频率)的测定.精子形态学染色使用改良巴氏染色,采用人工分析办法,显微镜下计数200条精子,计算其形态正常率.同一种冷冻方法进行冷冻前、后上述各指标的比较,以及两种不同冷冻方法精子复苏后上述各指标的比较均采用配对t检验.结果 冷冻前,精子总活动率、前向运动精子百分率、平均路径速度、平均直线速度、平均曲线速度、平均鞭打频率分别为(91.36 ±4.96)％、(81.28 ±6.41)％、(59.29±9.30) μm/s、(49.80 ±8.40) μm/s、(83.39±15.70) μm/s、(16.68 ±3.36) Hz,采用一步熏蒸法冷冻复苏后,分别为(46.04 ±20.14)％、(40.22±18.42)％、(48.00±11.60)μm/s、(41.11±8.50) μm/s、(71.55±17.19)μm/s、(15.94±14.30) Hz,与冷冻前比较,除平均鞭打频率差异无统计学意义外(t=0.258,P＞0.05),其余指标差异均有统计学意义(t=11.324、11.958、4.266、3.964、3.620,P均＜0.05).采用程序降温法冷冻复苏后,上述各指标分别为(48.05±18.27)％、(42.47±15.62)％、(45.30 ±6.51) μm/s、(38.08 ±4.99) μm/s、(64.23 ±11.75) μm/s、(14.00 ±2.99) Hz,与冷冻前比较,差异均有统计学意义(t=10.337、10.874、7.154、5.510、6.494、3.244,P均＜0.05).一步熏蒸法和程序降温法冷冻复苏后,精子复苏率、总活动率、前向运动精子百分率、形态正常率在两种方法间差异均无统计学意义(t=0.425、0.364、0.622、0.676,P＞0.05)；而一步熏蒸法的平均路径速度、平均直线速度、平均曲线速度、平均鞭打频率均高于程序降温法,其中平均直线速度和平均曲线速度的差异有统计学意义(t=2.489、2.822,P均＜0.05).结论 麦管可作为精子冷冻的载体.与程序降温法相比,一步熏蒸法操作简便,冷冻复苏后精子具有较高的运动能力,是一种值得推荐的精子快速冷冻方法.
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亚甲蓝对精子运动及质膜完整性的影响
体外研究发现亚甲蓝( methylene blue,MB)会抑制人精子的活力[1].为进一步研究MB对精子的毒性作用,我们通过低剂量MB与人精子共孵育2h的体外实验以及高剂量MB连续灌服大鼠14 d的在体实验,观察MB对精子生成、精子活力以及精子质膜完整性的影响.
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异氟烷对人精子运动功能和顶体反应影响研究
目的:观察异氟烷对人精子运动功能、体外获能以及精子顶体反应的影响,对有生育要求的男性提供临床用药依据.方法:收集我院男科门诊就诊的男性精子标本,从中筛选出18份活力正常精子的精液作为标本,每例精液均分成3份,分别放置于3个试管中,分别给予1.1％异氟烷(ISO1组)、2.2％异氟烷(IS02组)和空气作为对照组,把所有的有机玻璃箱放置于孵箱培养5h,对精子的运动、获能、顶体反应进行评价.结果:1.1％和2.2％浓度的异氟烷作用于精子5h以后,与对照组相比,精子的运动活力、直线速度、曲线速度、平均速度均明显下降,P＜0.05,差异有统计学意义,IS01组和IS02组比较,IS02组的下降更为明显,呈现剂量依赖关系,即随着浓度的升高,精子的运动功能抑制越明显.对于精子获能的影响,与对照组比较,两种浓度的异氟烷均明显地抑制精子的体外获能,P均＜0.05,差异均有统计学意义,IS01组和ISO2组比较无明显差异,P＞0.05.两组精子发生顶体反应的百分率均较处理前明显增加,P＜0.05,差异有统计学意义.但是处理后两组间比较无明显差异.结论:异氟烷能够抑制精子的运动和获能,并且随着浓度的增加,抑制作用增强;异氟烷对精子顶体反应影响不明显.
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补肾益精方对实验性生精障碍大鼠精子质量及血清NO的影响
目的:研究补肾益精方对实验生精障碍大鼠精子运动能力及其血清NO的影响.方法:采用皮质酮(CORT)皮下注射造成肾阳虚睾丸生精功能障碍大鼠模型,并予补肾益精汤治疗,观察补肾益精方对实验性生精障碍大鼠精子运动能力及其血清NO的影响.结果:补肾益精方组大鼠的精子数量、精子运动能力及血清NO含量与模型组有显著性差异(P＜0.01).结论:补肾益精方对生精方对生精障碍大鼠有显著的促进生精作用,并可显著提高大鼠精子的质量.
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解脲脲原体、人型支原体快速、简便的耐药性监测
目前,泌尿生殖道Uu(解脲脲原体)、Mh(人型支原体)感染的常规治疗受到普遍重视,Uu可通过胎盘感染胎儿,引起自发性流产,并可吸附于精子表面,产生神经氨酸酶样物质,阻碍精子运动,干扰精子与卵子结合,引起不育症.对免疫缺陷个体的研究发现Uu与类风湿性关节炎、性传播性疾病的反应性关节炎和人类其他关节炎组织损伤的关系不容忽视.
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输卵管积水对胚胎发育和精子运动的影响
目前在输卵管积水是否影响胚胎发育、精子活性、试管婴儿成功率以及在进行试管婴儿治疗之前是否需要外科手术等问题上仍存在争议.根据近5年有关文献,从输卵管积水的病理生理变化、输卵管积水对胚胎发育和精子运动的影响、影响机制、评价胚胎发育和精子运动的临床意义以及研究方法等方面做一综述.
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应用计算机辅助精子分析系统检测镉对大鼠精子运动能力的影响
目的 为镉的雄性生殖毒性评价筛选出敏感指标,以便对其生殖毒性进行早期监测.方法应用氯化镉对成年雄性SD大鼠进行腹腔染毒(连续7 d),染毒剂量分别为0.2、0.4、0.8 m g/kg体重(以镉计).对大鼠进行睾丸精子头计数,并计算每日精子生成量.应用计算机辅助精子分析(CASA)系统对附睾尾精子运动能力进行检测. 结果 0.8 mg/kg染镉组大鼠睾丸精子头计数和每日精子生成量为(16.45±3.01)106/g和( 2.65±0.51)106·d-1·g-1,比对照组[(119.20±14.51)106/g和(19 . 51±2.37)106·d-1·g-1]明显降低,0.2 mg/kg染镉组大鼠附睾尾精子曲线运动速度(VCL)即明显降低,0.4 mg/kg染镉组大鼠精子运动能力的改变更为显著,差异均有显著性(P＜0.05或P＜0.01).0.8 mg/kg染镉组未见活动精子. 结论精子运动参数是镉雄性生殖毒性评价较敏感的观察指标,CASA系统是雄性生殖毒理学研究的有力工具.
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生精方对人精子运动能力影响的研究
目的研究生精方含药血清体对人精子运动能力和受精能力的影响.方法通过人精子与生精方含药血清共培养,观察生精方对人精子运动能力(精子运动CASA分析) 、精子爬高试验的影响.结果含药血清加入共培养可显著提高人精子运动速度(精子运动路径速度(VAP)、精子轨迹速度(VCL)、精子前向运动速度(VSL,P均<0.01)、精子头部侧置振幅(ALH)和鞭毛摆动频率(BCF)及前向运动精子密度(P均<0.05)),提高精子爬高试验(P<0.01).结论生精方具有提高人精子离体质量的作用.
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首乌还精胶囊含药血清对人类精子运动能力和受精能力的影响
目的探讨首乌还精胶囊对人精子功能的影响,阐明其治疗男性不育症的作用机制. 方法通过人精子与首乌还精胶囊含药血清共培养,分析首乌还精胶囊对人精子运动速度、活力指数、毛细管穿透试验、精子低渗肿胀试验和穿透去透明带仓鼠卵能力的影响. 结果首乌还精胶囊含药血清对精子的运动能力和膜功能有促进作用. 含药血清加入培养可显著提高卵子受精率、受精指数. 结论首乌还精胶囊具有提高人精子运动能力和受精能力的作用.
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计算机辅助精液分析检测精子动态参数的临床应用
精液分析是评价男性生育能力的常规检查方法。既往评价男性生育力的实验室参数主要依据精液常规检查（包括精子存活率、精子活力、精子密度等），然而常规精液检查对精子运动的评估只是采用主观目测，无法测定精子的微细运动特点，在临床衡量男性生育力方面提供的信息有限。计算机辅助精液分析（CASA）系统不仅能够准确地测定精液常规指标，还可快速分析多项精子动态参数，为精子的微细运动提供了量化结果[1]，弥补了以往手工操作的不足。为探讨这些动态参数在评价男性生育能力方面的意义，本研究采用回顾性方法分析这些参数与常规检查结果的关系。
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黄芪拮抗镉诱导的大鼠脂质过氧化作用
目的研究黄芪注射液拮抗氯化镉诱导的大鼠精子运动毒性及对脂质过氧化作用的影响.方法将48只Sprague Dawley雄性大鼠随机分成低浓度黄芪组(A1)、高浓度黄芪组(A2)、氯化镉组(Cd)和对照组(C).连续7 d分别给A1组和A2组大鼠腹腔注射黄芪注射液5和10 g/(kg·d),Cd组大鼠腹腔注射等量蒸馏水作对照,然后再连续7 d给A1组、A2组和Cd组大鼠分别同时腹腔注射氯化镉溶液0.4mg/(kg.d).染镉后第8 d处死大鼠,用计算机辅助精子分析系统(CASA)分析附睾精子运动参数,检测血清和睾丸组织总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力和丙二醛(MDA)含量.结果A2组精子活率(Mot)、前向运动精子百分率、曲线速度(VCL)、平均路径速度(VAP)和精子头摆幅度(ALH)等参数明显高于Cd组(P＜0.05或P＜0.01).A2组血清及睾丸组织MDA含量和T-SOD活力与Cd组比较均有显著性差异(P＜0.01).结论黄芪注射液对镉诱导的大鼠精子运动毒性有明显的拮抗作用,其机制可能与黄芪清除自由基作用有关.
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生精散对人精子运动能力和受精能力的影响
目的:研究含生精散血清对人精子运动能力和受精能力的影响.方法:通过人精子与生精散血清共培养,观察生精散对人精子运动能力(精子运动CASA分析)、精子与卵透明带结合能力的影响.结果:含药血清加入共培养可明显提高人精子运动速度[精子运动平均路径速度(VAP)、精子曲线速度(VCL)、精子直线运动速度(VSL)](P<0.05)精子头部侧摆幅度(ALH)和鞭毛摆动频率(BCF) (P<0.05),可增强精子与卵透明带结合能力(P<0.05).结论:生精散与精子共培养具有提高人精子运动能力和精卵结合能力的作用.
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男性生殖道解脲脲原体感染对精液常规参数的影响
目的:通过研究男性生殖道解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)阳性患者的精液参数水平,比较治疗前后其精液常规参数变化,分析Uu对精液参数可能存在的影响.方法:经排除影响因素后,入组Uu生殖道感染男性患者96例,按Uu治疗结果(转阴或未转阴)分为2组,采用计算机辅助分析精液常规参数,比较2组患者的精子浓度和前向运动率.结果:96例Uu生殖道感染男性患者中,治疗后Uu转阴者86例,未转阴者10例.Uu转阴者治疗前与转阴后的精子浓度及精子前向运动率差异均无统计学意义(P=0.44,P=0.35)；未转阴者治疗前与治疗后的精子浓度及精子前向运动率差异亦无统计学意义(P=0.65,P=0.78).治疗后,Uu未转阴患者的精液参数变化程度与治愈者相比,差异无统计学意义(P=0.39,P=0.44).结论:男性精液Uu培养阳性对常规精液参数无明显影响,Uu阳性对生育力是否存在影响还需要进一步深入探讨.
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速冻和缓慢冷冻法对精子运动特征的影响
目的了解冷冻方法对人精子运动特征的影响.方法精液标本进行速冻和缓慢冷冻保存,应用计算机精液分析仪进行精子运动特征分析.结果冷冻复温后精子运动能力与冷冻前精子运动能力比较明显下降(P<0.001,P<0.05);速冻与缓慢冷冻方法保存的精子运动参数相比较差异均无显著性(P＞0.05).结论冷冻保存易导致精子运动能力下降,速冻与缓慢冷冻方法对精子运动参数影响无明显差异.
