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人脐带来源间充质干细胞分离培养方法的优化
背景:关于人脐带间充质干细胞的分离培养方法不一,如何提高人脐带来源间充质干细胞获得效率的问题尚未解决.目的:优选人脐带来源间充质干细胞制备的消化酶组分.方法:无菌条件下取正常足月剖腹产的脐带近胎儿段,按不同混合酶浓度比值划分为3组,混合酶Ⅰ组成分为0.4%Ⅱ型胶原酶、0.1%胰酶、0.02%EDTA和0.1%透明质酸酶;混合酶Ⅱ组成分为0.1%Ⅱ型胶原酶、0.4%胰酶、0.02%EDTA和0.1%透明质酸酶;混合酶Ⅲ组成分为0.3%Ⅱ型胶原酶、0.1%胰酶、0.02%EDTA、0.1%透明质酸酶和0.1%DNA酶.每组再按消化时间分为1,2,3 h 3个亚组.后重悬细胞终体积均定位4 mL并计数,采用含血清的DMEM培养液体外培养细胞.结果与结论:采用3种不同混合酶浓度进行消化,发现相同消化时间内,混合酶Ⅲ组消化细胞多(P<0.05).在作用3 h时,混合酶Ⅲ组获取的细胞中活细胞比值显著低于混合酶Ⅰ组和混合酶Ⅱ组(P<0.01).提示0.3%Ⅱ型胶原酶、0.1%胰酶、0.02%EDTA、0.1%透明质酸酶和0.1%DNA酶混合液消化脐带组织块2 h为获取脐带间充质干细胞的佳条件.
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DNA酶Ⅰ缺陷与SLE相关性的研究进展
系统性红斑狼疮的病因复杂,发病机理尚未完全阐明,研究表明DNA核蛋白在系统性红斑狼疮发病中起重要作用,而DNA酶Ⅰ是其代谢的主要核酸酶.综述了关于DNA酶Ⅰ缺陷在系统性红斑狼疮发病中可能的致病机理,为进一步研究系统性红斑狼疮的病因提供一个思路.
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DNA酶Ⅰ的研究进展
1905年人类首次在牛胰腺中发现DNA酶Ⅰ.目前已发现DNA酶Ⅰ存在6种编码蛋白的基因多态性、单核苷酸多态性和内含子4的可变串联重复序列.DNA酶Ⅰ不仅水解双链DNA,参与外源DNA的代谢、而且与细胞凋亡、坏死细胞染色质降解及系统性红斑狼疮、胃肠道肿瘤和心肌梗死发生密切相关.DNA酶Ⅰ是亲子鉴定及犯罪学鉴定良好的生化标志物,血清DNA酶Ⅰ活性升高可以作为一种新的高敏感性的急性心肌缺血标志物、酶表型分析可用于预测疾病易感性.
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老年鼠六种组织细胞的细胞核与染色质DNaseⅠ的消化敏感性研究
为探讨衰老的机理,作者研究了老年鼠和断奶乳鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等6种组织细胞的细胞核和染色质对DNA酶Ⅰ(DnaseⅠ)的消化敏感性.结果显示:①老年鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等6种组织细胞的细胞核和染色质对DnaseⅠ的消化敏感性均较断奶乳鼠相应的组织低;②老年鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等6种组织的消化敏感性各不相同,脑组织的消化敏感性低(P<0.01);③断奶乳鼠脑组织的消化敏感性也较其它5种组织低,但乳鼠中其它5种组织细胞核及染色质的消化敏感性差异不明显.作者认为,老年鼠各组织细胞核和染色质转录活性降低,可能与活性基因减少有关.
