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针刺真、假穴位不同脑区激活效应的功能性磁共振成像评估
背景:人们从大脑的不同功能区着手,试着用功能性磁共振来阐释其与经络穴位的相关性.目的:运用功能性磁共振观察针刺真、假穴位与大脑功能区的关系,以及针刺真、假穴位不同脑区激活效应的差异.设计:随机对照的验证性观察.单位:成都中医药大学附属医院,弗莱堡大学医学院环境和自然医学系针灸科以及放射医疗中心.对象:本实验于2000-10在弗莱堡大学医学院放射医疗中心完成.以视力正常的健康志愿者(弗莱堡大学医学院医学生)18人作为受试对象,随机分为2组:针刺假穴+有治疗作用穴位组和针刺假穴+无治疗作用穴位组,每组9人.均签定知情同意书.方法:两组先接受浅刺(假穴)后观测出针.然后针刺假穴+有治疗作用穴位组针刺双侧光明穴和太冲穴,针刺假穴+无治疗作用穴位组针刺双侧丰隆穴和陷谷穴.为得到强烈的针感(酸麻胀重的感觉),每30 s进行捻转(每穴先左后右),每次持续10 s,持续4 min后静息2 min为1个周期,共持续4个周期25 min后出针.采用1.5 T磁共振扫描仪(西门子Erlangen)进行功能成像检测.并对所有的受试者及单个受试者交叉关系分析.主要观察指标:①针刺假穴以及针刺有治疗作用穴位组对象视皮质的反应.②针刺对两组对象不同脑区的激活情况.结果:因刺激程序的错误运用,2例受试者(两组各1例)在进一步的数据分析时被剔除.①针刺与视觉有关的穴位对视皮质无确切影响,但在实验过程中,而在其他皮质区(如脑岛、外侧沟、顶颢皮质等与疼痛及躯体感觉刺激有关的皮质)有轻微血氧合水平依赖性成像法信号转换,即在这些皮质区针刺真穴及假穴均有激活反应.②针刺具有治疗视力障碍作用与不具有治疗视力障碍作用的穴位,其激活类型无明显差异.③单个受试者交叉关系分析(CC＞0.3)发现,针刺假穴过程中仅2/8的受试者出现了丘脑的激活.两组均出现了丘脑、红核、大脑外侧沟的激活.针刺假穴+有治疗作用穴位组3/8和针刺假穴+无治疗作用穴位组4/8的受试者出现可观察到后外侧中脑导水管周围灰质的激活反应,两组还出现了顶颢皮质的激活.说明针刺真穴与假穴在激活类型上有显著差异.结论:①通过针刺与视觉有关的穴位发现针刺对于视皮质无确切影响,但对其他皮质区,如脑岛、外侧沟、顶颞皮质等与疼痛及躯体感觉刺激有关的皮质有激活作用.②针刺真穴与假穴在激活类型上有显著差异,但针刺具有治疗视力障碍作用与不具有治疗视力障碍作用的穴位激活类型差异则不明显.
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人参皂苷Rg1经线粒体通路抗Aβ25-35致原代大鼠皮层神经元凋亡
目的:通过人参皂苷Rg1与原代培养大鼠皮层神经元预培养,评价抗β淀粉样肽(β-amy1oid peptide,Aβ)所致神经元损伤,并探讨Rg1的神经保护作用及相关分子机制.方法:原代神经元培养7d成熟后,分别以1、10、20 μmol/L Rg1处理24 h,加入Aβ毒性片段Aβ25.35 10 μmoL/L模拟阿尔茨海默病( Alzheimer's Disease,AD)脑组织局部微环境.孵育72 h后,光镜观察细胞形态学改变,评价Rg1是否具有神经保护作用及相关量效关系.采用JC-1染色,考察神经元线粒体膜电位(△Ψm)变化,并运用Western blot技术,检测凋亡相关蛋白的表达变化.结果:Aβ25-35作用72 h严重损伤原代皮层神经元,引起神经元碎裂和死亡.Rg1预处理能对抗Aβ25.35的细胞损伤作用,显著提高神经元存活率,并呈现剂量依赖性,其中Rg1(20 μmol/L)活性强.Aβ25.35处理24 h能降低神经元的线粒体△Ψ,m,下调Bcl-2/Bax的比值,引起细胞色素c从线粒体释放入胞浆,活化caspse3和caspase9,从而引起神经元凋亡.而Rg1预培养能保护原代神经元,减轻或避免上述损伤作用,且其抗凋亡效应可被雌激素受体(ER)拮抗剂ICI182,780和糖皮质激素受体(GR)拮抗剂RU486部分拮抗.结论:Rg1在1μmol/L至20 μmol/L浓度具有抗Aβ25-35损伤原代培养大鼠皮层神经元作用,该活性与抑制线粒体凋亡通路相关联.
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Balb/c小鼠静脉注射刀豆蛋白A致大脑皮层内MAPEG基因表达变化及环孢素影响
目的:探索刀豆蛋白 A(Con A)致小鼠免疫性炎症时,脑内花生四烯酸和谷胱甘肽代谢膜关联蛋白(MAPEG)家族蛋白的mRNA表达谱,及免疫抑制剂环孢素A(Cs A)对其表达的调控.方法:雄性Balb/c小鼠尾静脉注射Con A,20 mg/kg,制备免疫性炎症模型.另设尾静脉注射Cs A 150 mg/kg预给药.采用RT-PCR检测小鼠大脑皮层内MAPEG家族蛋白在mRNA水平的基因表达情况.结果:采用RT-PCR测得未经Con A处理小鼠大脑皮层内,mGST1、mGST3、LTC4S、FLAP和mPGES-1 mRNA均有不同程度表达,但未见mGST2 mRNA表达.给Con A后8 h,无论是否以Cs A预处理,脑内mGST1 mRNA表达显著增加,达到未处理组的1.2～1.5倍;而LTC4S、FLAP和mPGES-1 mRNA表达均未明显受Con A影响.结论:小鼠尾静脉注射Con A可诱导大脑皮层mGST1 mRNA表达上调,但未明显影响MAPEG其它5个成员;同时Cs A未能抑制该变化,提示Con A诱导的免疫性炎症对脑内花生四烯酸类炎症介质代谢影响不明显,但可能涉及氧化应激病理过程.
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淫羊藿素抗Aβ肽致大鼠原代培养神经细胞凋亡作用
目的:探索淫羊藿素(icaritin,ICT)对Aβ25-35肽致大鼠原代培养神经细胞的损伤保护作用及潜在机制.方法:制备d 17胎龄大鼠胚胎皮层神经细胞,支持培养7 d后,与ICT预孵育24 h并加入Aβ25-35肽,作用72 h后以细胞形态、MTT值、培养液乳酸脱氢酶(LDH)水平作为细胞的损伤指标;并以线粒体膜电位(△ψm)改变作为凋亡早期指标,AO/EB染色差异作为凋亡后期指标.结果:0.1μmol·L-1ICT预孵育24 h能显著改善10μmol·L-1Aβ25-35肽所致的原代培养神经细胞的损伤,MTT、LDH及形态学结果显示:ICT能提高Aβ25-35肽损伤神经细胞的存活率,JC-1染色结果显示:ICT能防止Aβ25-35肽诱导的细胞线粒体△ψm下降,AO/EB染色结果显示:ICT能够改善神经细胞凋亡.结论:ICT经抗凋亡机制对Aβ25-35肽损伤大鼠原代培养神经细胞发挥保护作用.该作用与ICT干预Aβ25-35肽诱导的细胞线粒体膜电位下降和核损伤有关.
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巨细胞病毒先天性感染对ICR鼠胚胎生长及脑组织发育的影响
目的探索人巨细胞病毒（HCMV ）先天性感染对胎鼠胚胎生长及脑组织发育的影响。方法 10周龄的ICR ♀♂鼠按1∶1配对，实验组于交配前及妊娠3天（E3）、7天（E7）、15天（E15）腹腔内接种HCMV悬液，对照组接种HF细胞上清液。于E0、E3、E6、E9、E12、E15、E19称取孕鼠体重。临产时剖腹取胚胎的大脑皮质，用常规组织切片及HE染色，检测组织的病理变化，同时取部分组织进行病毒分离。结果各实验组（除E15组）孕鼠自E15后体重较对照组明显降低。组织病理学检查发现，各实验组ICR胎鼠大脑皮质血管扩张、充血、出血，脑实质有单核细胞浸润，部分神经细胞变性坏死或凋亡及噬神经细胞现象，软化灶形成；受染的神经细胞核内出现HCMV特征性包涵体。E0、E3、E7、E15实验组大脑皮质病毒分离阳性率分别为60%、62%、67%、25%，组间差异显著（χ2=13.475，P＜0.05），E15组低于其他3组。结论不同孕期ICR胎鼠大脑皮质均可先天性实验感染HCMV且大脑皮质损伤明显，胚胎发育迟缓。
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人巨细胞病毒先天性感染胎鼠大脑皮质钙调素基因mRNA表达的研究
目的研究先天性人巨细胞病毒(HCMV)感染致脑损害后钙调素(calmodulin,CaM )基因mRNA表达的改变,以探讨先天性HCMV感染所致脑损害的机制.方法选用10周龄Balb/c小鼠,雌雄小鼠腹腔内分别注射1.0 ml、0.5 ml、0.25 ml HCMV后合笼交配以建立先天性HCMV中枢神经系统(CNS)感染小鼠模型,并以腹腔注射1.0 ml 1640液鼠为对照.剖腹取21天胎龄小鼠大脑皮质,以自行设计的CaM cDNA编码区的一对引物与一条Ca M特异性探针,分别用逆转录聚合酶链反应(RP-PCR)技术CaM mRNA相对含量,用原位杂交检测大脑皮质细胞内相应mRNA的表达及定位.结果母鼠腹腔内接种HCMV量为1 .0 ml与0.5 ml的临产胎鼠大脑皮质分离出相应病毒,病理学检查等确诊发现了侵袭性脑膜脑炎性病理改变,证实HCMV可以小鼠宫内传播至CNS.1.0 ml组与0.5 ml组胎鼠RT-PCR 产物浓度明显高于0.25 ml组及对照组,而1.0 ml组与0.5 ml组间亦有明显差异.电泳结果显示对照组与0.25 ml组胎鼠未见阳性条带,而1.0 ml组胎鼠特异性条带信号强于0.5 ml胎鼠,仅略低于同组母鼠.原位杂交显示CaM mRNA不但出现在1.0 ml组胎鼠大脑皮质大神经元胞核及胞浆内,在中小神经元及胶质细胞的胞核及胞浆亦有高密度表达,阳性细胞的突起中亦有弱信号存在.结论本研究结果揭示先天性感染HCMV胎鼠大脑皮质内CaM mRNA表达量明显增加,且神经元及胶质细胞均有表达,并与感染剂量有依赖关系. 提示CaM mRNA表达增高可直能直接参与了HCMV先天性感染脑损害的过程.
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VBM分析在颞叶癫痫患者脑结构MRI检测中的应用
【目的】基于像素的形态学测量（VBM ）法分析颞叶癫痫患者脑区灰质密度和体积的差异，探讨VBM对常规M RI未发现病灶的颞叶癫痫患者的检测准确性。【方法】选择本院收治的30例常规M RI未发现病灶的颞叶癫痫患者（颞叶癫痫组），其中男13例，女17例；选择同期本院体检健康者30例（对照组），其中男16例，女14例。采用磁化预备快速梯度回波序列进行高分辨率全脑结构像扫描两组研究对象脑部，通过VBM分析其全脑灰质体积及密度变化。【结果】①颞叶癫痫患者组的左侧枕叶、楔叶，右侧小脑山顶脑区的灰质密度较对照组降低，差异有显著性意义；双侧壳核、外侧苍白球、左侧颞下回、右侧额下回脑区的灰质密度较对照组升高，差异有显著性意义；②颞叶癫痫患者组双侧岛叶，右侧中央前回、颞上回、楔叶、楔前叶、枕中回、缘上回，左侧颞中回、角回、舌回、颞横回、中央后回、中央旁小叶、海马旁回、梭状回的脑灰质体积较正常对照组降低，差异有显著性；未发现灰质体积升高的脑区。【结论】颞叶癫痫患者不仅颞叶灰质存在异常，而且颞叶外脑区也存在广泛的灰质异常，对于常规M RI未发现病灶的颞叶癫痫患者，进行VBM 分析可发现广泛的脑结构异常。
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不同发病年龄段抑郁症患者的脑灰质MRI差异分析
[目的]探讨抑郁症不同发病年龄段成年患者的脑灰质的MRI差异.[方法]回顾性分析2016年10月至2017年10月本院收治的124例抑郁症患者(观察组)的临床资料,并选取同期于本院接受体检的132例健康志愿者作为对照组.根据患者发病不同发病年龄段分为早期组、中期组和晚期发病组.收集各组患者临床资料并分析比较各组MRI脑灰质图像的差异性.采用汉密尔顿抑郁量表17项(HAMD17)和汉密尔顿焦虑量表14项(HAMA14)评价两组精神症状.[结果]各组抑郁症患者中性别、受教育程度等资料对比无统计学差异(P>0.05),年龄、病程、家族遗传史等数据对比具有统计学意义(P<0.05).观察组HAMD17、HAMA14评分显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).早期发病组右侧小脑Ⅳ区、右侧舌回、左侧丘脑脑灰质减少明显;中期发病组右侧额中回脑灰质减少明显;晚期发病组右侧额中回、右侧舌回、左侧梭状回脑灰质减少明显(P<0.05).[结论]抑郁症患者不同发病年龄段脑灰质体积改变情况具有显著差异,可能是患者病理性变化导致大脑结构存在差异,临床医师可以根据患者脑灰质特点制定不同治疗方案.
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低级别胶质瘤患者外科治疗的癫痫缓解效果及其影响因素分析
[目的]探讨以癫痫为初发症状的低级别胶质瘤(LGG)患者行外科治疗的癫痫缓解效果及其影响因素.[方法]回顾性分析2009年1月至2015年12月本院收治的83例行手术治疗的以癫痫为初发症状的LGG患者的临床资料,根据其术后6个月内的Engel分级分为有效组(Ⅰ~Ⅱ级)和无效组(Ⅲ~Ⅳ级),比较两组的临床病理资料,采用多因素logistic回归分析筛选出患者手术疗效的独立影响因素.[结果]所有患者均完成外科手术,随访结果表明术后6个月内的Engel分级结果为Ⅰ级37例(44.6%)、Ⅱ级29例(34.9%)、Ⅲ级13例(15.7%)、Ⅳ级4例(4.8%).有效组的WHO分级为Ⅰ级、肿瘤位于额叶运动区、术中应用皮层脑电监测(ECoG)监测的比例显著高于无效组,术前发作频率≥1次/日的比例显著低于无效组,差异均有统计学意义(P<0.05).多因素logistic回归分析结果表明,术前发作频率≥1次/日是患者手术无效的独立危险因素,术中应用ECoG监测是其独立保护因素(P<0.05).[结论]对于以癫痫为初发症状的LGG患者而言,外科治疗的癫痫缓解效果较好,术前癫痫发作频率与术中是否应用ECoG监测这两个因素可影响手术疗效.
