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  • miR-2135对P19细胞增殖及向心肌细胞分化的作用

    作者:李辉

    背景:既往研究发现,向心肌分化P19细胞中的miR-2135表达水平显著高于未分化P19细胞,但miR-2135对P19细胞增殖、向心肌细胞分化和心脏发育的影响尚不明确。
      目的:探索miR-2135对P19细胞增殖及向心肌细胞分化的影响。
      方法:分别以miR-2135沉默及空载质粒转染P19细胞,培养0-4 d,MTT法检测细胞增殖;培养0,24,48 h,流式细胞仪检测细胞周期。诱导两组转染的P19细胞向心肌细胞分化,诱导第0,10天,采用qRT-PCR检测P19细胞中miR-2135的表达;诱导第10天,采用蛋白免疫印迹检测心肌分化相关标志物心肌肌钙蛋白T、心房钠尿肽和心肌转录因子的表达。
      结果与结论:①转染结果:转染miR-2135沉默质粒的P19细胞低表达miR-2135;②细胞增殖与周期:miR-2135沉默质粒转染P19细胞的增殖速度快于空载质粒转染P19细胞(P<0.05),培养24,48 h的S期细胞比例明显高于空载质粒转染P19细胞(P<0.05);③qRT-PCR检测结果:miR-2135沉默质粒转染P19细胞诱导10 d的miR-2135表达明显高于诱导0 d水平(P<0.01);④蛋白免疫印迹检测结果:诱导10 d,miR-2135沉默质粒转染P19细胞心肌肌钙蛋白T、心房钠尿肽和心肌转录因子的表达明显低于空载质粒转染P19细胞;⑤结果表明:miR-2135抑制P19细胞的增殖,可促进其向心肌细胞分化。

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