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青蒿琥酯抗蜡螟烟曲霉感染自噬机制初步研究
目的 探究青蒿琥酯在蜡螟感染烟曲霉后,对蜡螟的自噬相关蛋白的表达影响.方法 用一定量的烟曲霉的活化孢子感染蜡螟,经过1h,用青蒿琥酯注射一组蜡螟,两性霉素B注射一组蜡螟,剩余的作为感染组.12h后,取各组蜡螟进行病理切片染色,观察各组的病理情况;取各组的蜡螟的淋巴液,收集各组的孢子,用真菌活性检测试剂盒检测孢子活性并将淋巴细胞分离、裂解,离心取上清,用Western-blot法检测上清液中的Dectin-1、ROS、LC3Ⅱ的表达水平.结果 青蒿琥酯注射组的蜡螟病理切片中的孢子比感染组数量少且聚集在一起,未长出菌丝,而体外分离的真菌孢子,青蒿琥酯组的活性明显受到抑制.经Western-blot显示青蒿琥酯能增强淋巴细胞Dectin-1、ROS、LC3Ⅱ的表达.结论 青蒿琥酯可通过抑制烟曲霉的活性和增强蜡螟淋巴细胞的自噬水平,对抗蜡螟烟曲霉感染.
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蜡螟抗白假丝酵母菌自噬机制的初步研究
目的 探究白假丝酵母菌感染蜡螟时蜡螟的自噬相关通路蛋白的表达情况.方法 用一定量的白假丝酵母菌的活化孢子感染蜡螟,经过12 h,解剖蜡螟收集蜡螟细胞并裂解细胞,用真菌活性检测试剂盒检测孢子活性;解剖蜡螟取肠道组织并用PI染死细胞.取不同感染时间段的淋巴细胞,用裂解液裂解,离心取上清,用Western blot法检测上清液中的Dectin-1、ROS、LC3 Ⅰ/Ⅱ的表达水平.结果 活化的孢子注射至蜡螟体内后,其活性受到抑制;蜡螟的肠道细胞被定位在上面的菌丝损伤并且孢子活性受到抑制.随着蜡螟感染白假丝酵母菌时间的递增,其自身的Dectin-1、ROS、LC3 Ⅰ/Ⅱ的表达水平在不断增高且在感染24 h高.结论 白假丝酵母菌感染蜡螟后,蜡螟的淋巴细胞和肠道细胞通过升高Dectin-1、ROS、LC3 Ⅰ/Ⅱ的表达水平发挥杀伤孢子的作用.
