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牛膝提取物对成骨样细胞增殖的作用
考察了牛膝(Achyranthes bidentata Bl.)的不同提取部位对成骨样细胞UMR106的作用.通过牛膝的醇提液及醇提液的不同提取部位和UMR106成骨样细胞共同体外培养,用MTT方法检测了各部位对细胞增殖的作用;同时考察了MTT法的实验条件.结果表明:牛膝的醇提液及其石油醚和乙酸乙酯萃取的混和物对细胞具有较强的促进增殖作用,而正丁醇层和水层对细胞增殖无影响;在MTT法中,铺板细胞浓度、检测波长和加入MTT后的孵育时间均影响吸光度值的测定.牛膝中低极性部位可能含有直接作用于成骨细胞的活性成分.
关键词： 牛膝 促细胞增殖作用 成骨样细胞UMR106 MTT法 -
尾加压素II介导卵圆细胞增殖的机制探讨
目的：探讨尾加压素II（ UII）对肝脏干细胞即卵圆细胞内活性氧（ ROS）的影响及其参与UII促细胞增殖的机制探讨。方法：通过流式细胞术，应用DCFH－DA探针检测UII孵育卵圆细胞WB－F344后，胞内ROS水平变化。通过Western blot方法检测胞内NADPH氧化酶亚基、细胞周期蛋白E、细胞周期蛋白依赖性激酶2及信号通路蛋白ERK表达水平。采用流式细胞术方式分析UII对于细胞周期的影响。应用BrdU掺入法检测细胞增殖情况。结果：UII刺激卵圆细胞可引起胞内ROS水平增加，同时NADPH氧化酶亚基表达上调。给予NADPH氧化酶抑制剂apocynin预处理后，明显改善UII介导的ERK磷酸化水平升高。此外，UII孵育组细胞周期比例S期明显高于G1期，而apocynin预处理组S期比例较UII刺激组有所降低，且细胞增殖检测结果显示apocynin预处理可使UII介导的促细胞增殖效应受到明显抑制。结论：UII可通过上调细胞内NADPH氧化酶介导ROS增加，继而促进ERK激活以及加速细胞从G1期进入S期，参与UII促细胞增殖作用。
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杜仲对成骨样细胞增殖的作用
杜仲的水提液及水提液的不同萃取物和UMR106成骨样细胞体外共同培养，用MTT法检测细胞增殖，结果水提液在0.4mg/ml培养48小时具有强的促进细胞增殖作用，其乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物对细胞增殖有一定促进作用，但无显著性差异，而乙酸乙酯和正丁醇萃取后的剩余水层仍保留与原水提液相似的促进细胞增殖作用。表明杜仲中极性大部位可能含有直接作用于成骨细胞的活性成分。
关键词： 杜仲 促细胞增殖作用 成骨样细胞UMR106 MTT法 -
过期血液中血小板生长因子促细胞增殖作用的初步研究
目的 探讨过期血液中血小板生长因子含量及促细胞增殖作用.方法 选取全血和浓缩血小板样品为研究对象,分别采用冻融法和CaCl2法处理保存d1、5、10的血小板,应用ELISA试剂盒测定样品中PDGF-AB、TGF-β1的含量,应用CCK-8试剂盒测定样品的促细胞增殖作用;在全血保存d1、10、21、35、40时取样,离心收集血浆,测定其血小板生长因子含量和促细胞增殖作用.结果 CaCl2法处理的d1、5、10血小板样品中PDGF-AB含量分别为86.56±19.66、76.15±18.55、70.65±24.13 ng/ml,TGF-β1的含量分别为86.40±19.92、79.80±16.54、92.45±17.59 ng/ml;冻融法处理的d1、5、10血小板样品中PDGF-AB含量分别为48.24±3.73、60.91±18.39、69.35±22.29 ng/ml,TGF-β1的含量分别为107.57 +46.48 149.33±24.78 154.26±38.99 ng/ml,同一处理方法d1、5、10血小板样品中生长因子含量无明显差别(P＞0.05);同一处理方法不同时间点血小板样品对细胞增殖作用无明显差别(P＞0.05);冻融法处理后样品在浓度20％时促细胞增殖率明显下降;不同时间点全血血浆促细胞增殖作用趋势线相近,在样品浓度达到20％时促细胞增殖率均明显下降.结论 过期血小板中血小板生长因子含量及促细胞增殖作用与新鲜血小板无显著差异,过期全血血浆中的血小板生长因子与新鲜全血相比也得到了相似的初步结果.
