首页 > 文献资料
-
人Fcα/μR和Poly Immunoglobulin Receptor多克隆抗体的制备及鉴定
目的:制备抗人Fcα/μR和Poly Immunoglobulin Receptor(pIgR)的多克隆抗体.方法:在Escherchia coli中分别表达人Fcα/μR的ECl2和pIgR的DI结构域,均以包含体形式存在.从SDS-PAGE中切胶纯化,免疫新西兰兔,制备多克隆抗体.ELISA法检测抗体效价,Western blot法检测抗体的特异性,抗原柱吸收交叉和纯化多抗.结果:抗体滴度分别是1:6 4000和1:25 6000,经Western blot检测特异性良好,抗人Fcα/μR和pIgR的多抗相互没有交叉.结论:在E.coli中成功表达了人Fcα/μR的EC12结构域和pIgR的DI结构域,并制备了无交叉的多克隆抗体,为进一步研究其功能和相互关系奠定基础.
-
鱿鱼墨多糖改善小鼠肠粘膜免疫及作用机制的研究
目的 探讨鱿鱼墨多糖对小鼠肠粘膜免疫的影响及其作用机制.方法 将50只Balb/c小鼠随机分为5组:正常组、模型组、低、中、高鱿鱼墨多糖剂量组.采用环磷酰胺腹腔注射法制备免疫低下小鼠模型,并通过灌胃给予各剂量组小鼠鱿鱼墨多糖饲养28 d.检测胸腺指数/脾指数,取小鼠空肠段检测肠粘膜SIgA的含量,观察北太平洋鱿鱼墨多糖对肠道粘膜免疫的保护作用.采用酶联免疫反应和RT-PCR方法,检测了pIgR的蛋白质与mRNA表达量.结果 与正常组相比,模型组小鼠胸腺指数、脾指数分别下降44.4%、19.4%,肠道SIgA的表达量下降40.9%,免疫组织化学染色也显示肠道IgA明显下降;与模型组相比,鱿鱼墨多糖可以改善免疫低下小鼠的机体免疫功能,并且呈剂量依赖性,胸腺指数在模型组水平上分别升高了53.5%、67.6%、61.8%,脾指数分别升高了12.7%、13.1%、15.6%.鱿鱼墨多糖还可以提高小鼠肠粘膜SIgA的分泌功能,相比于模型组小鼠,鱿鱼墨多糖组小鼠SIgA的分泌量分别升高了43.9%、63.6%、68.7%;免疫组织化学染色发现鱿鱼墨多糖组小鼠肠道固有层中IgA明显增加,且ELISA检测发现鱿鱼墨多糖高剂量组小鼠小肠pIgR的蛋白表达量明显增加.结论 北太平洋鱿鱼墨多糖能够促进小鼠肠粘膜SIgA的分泌,并呈剂量依赖关系,作用机制可能与其促进浆细胞分泌IgA以及促进上皮细胞分泌pIgR有关.
