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一步柱层析纯化血浆分离多种血液制品组分
目的 采用一步吸附及分步解吸的柱层析技术——扩张床吸附(expanded bed adsorption,EBA)技术,从原料血浆中分离多个有效组分,从而提高血浆的综合利用率.方法 以琼脂糖(碳化钨)-DEAE为吸附介质,将原料血浆按一定流速流经层析柱,并使待分离组分吸附于介质上,通过不同的缓冲液组成、洗脱流速、洗脱体积分步分离有效组分,并初步探讨工艺放大过程中的关键因素.结果 EBA技术可从原料血浆中依次分离出白蛋白、免疫球蛋白、纤维蛋白原、α-1蛋白酶抑制剂4种蛋白;该技术在工艺放大过程中,柱高及洗脱流速是影响分离效果的关键因素;该技术可去除部分病毒,使病毒滴度降低约一个数量级.结论 一步柱层析技术具有血浆综合利用度高、易操作、操作周期短、成本低、可去除病毒等优势,其有望成为传统低温乙醇工艺的有效替代技术,应用于工业化生产.
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扩张床吸附直接从牛血中快速分离牛血清白蛋白
目的研究扩张床吸附技术直接从牛血中快速分离血浆蛋白.方法用葡萄糖等张液与牛血按4:1混合,混合液的渗透压在280～300mOsmo范围内,与血浆的总渗透压相近;pH值降至6.8,黏度从全血4.7 mPa·s降至1.0 mPa·s以下,再用扩张床Streamline DEAE对血浆蛋白进行吸附洗脱.结果扩张床洗脱液中单体牛血清白蛋白(BSA)的纯度接近70%,全血进料时血浆蛋白吸附容量为纯BSA进料的21.44%.结论扩张床技术直接从未经固液分离的牛血血浆中分离BSA,只经一步操作,实现了BSA的有效快速分离.
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新型树脂扩张床吸附分离PCC的工艺及其放大研究
目的 优化新型离子交换树脂CG-6从人血浆吸附分离凝血酶原复合物的工艺并作放大研究.方法采用两因素两水平正交试验,优化筛选大孔阴离子交换树脂CG-6从人血浆中吸附分离PCC的保护剂；比较2种规模扩张床流体力学性能,研究吸附柱放大规律；考察该工艺生产PCC的回收率并分析成分.结果 优化保护剂0.12 mol/L甘露醇+100 IU/L肝素条件下,FIXⅨ一次性洗脱回收率为(90.7±7.8)%,回收率提高41%.扩张床吸附柱放大效应小.Ф 25mm 柱洗脱液中杂蛋白少,FⅡ、FⅧ、FⅨ、FX回收率分别为(72.6±4.9)％、(72.9± 10.6)%、(70.4±6.16)%、(77.8±11.8)%.结论 工艺优化后制备的PCC比活及均衡度均优于传统工艺制得的产品.
