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重组链激酶(rSK)国家标准品的研制
目的 建立效价测定用重组链激酶国家标准品。方法 以NIBSC的国际标准品为标准,采用体外溶圈法,按WHO要求组织了3家实验室,对该批rSK国家标准品(批号960701)的效价进行协作标定。结果 经统计学分析,均数为495IU/支,95%可信区间为457~535IU/支,单次测定的95%标准值范围为301~706IU/支。该批国家标准品效价确定为500IU/支。4种不同温度存放29个月的样品,效价稳定。结论 该批rSK效价稳定,可作为国家标准品。
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信号蛋白RSK的研究进展
RSK在高等真核细胞中广泛表达,在哺乳动物中有三种RSK同形类似物:RSK-1,RSK-2和RSK-3.生长因子、激素和神经递质激活Ras-ERK通路,RSK被ERK激活后调节细胞内信号,磷酸化细胞质和细胞核蛋白,参与基因转录、蛋白合成、细胞分化与增殖等过程.RSK还存在不依赖Ras-MAPK信号通路的调节机制.目前还不清楚是否不同的RSK同形类似物有不同的功能和不同的靶蛋白.RSK拥有多种底物,其中几个底物是转录因子,在转录调节当中具有重要的作用.寻找RSK的特异性抑制剂,明确不同类型RSK的功能和确切底物是今后研究的重点.
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低氧预适应鼠脑内核糖体S6激酶磷酸化水平和蛋白表达量的变化
探讨核糖体S6激酶(ribosomal S6 kinase, RSK) Ser221(PDK1磷酸化位点)和Thr359/Ser363(ERK1/2磷酸化位点)的磷酸化水平以及总RSK蛋白表达量在小鼠脑低氧预适应发生发展过程中的变化.将成年雄性BALB/c小鼠(18~22 g)随机分为正常对照(H0)和重复性低氧1~4次(H1~H4)等5组(每组n=6).应用蛋白凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western blot)技术,定量检测整体低氧预适应小鼠海马和皮层组织内Ser221位点(p-Ser221 RSK)和Thr359/Ser363位点(p-Thr359/Ser363 RSK)的磷酸化水平以及总RSK蛋白表达量.结果表明,随着低氧暴露次数增加,小鼠海马和皮层组织内p-Ser221 RSK磷酸化的水平显著增高(P<0.05, n=6),伴随着p-Thr359/Ser363 RSK磷酸化的水平明显降低(P<0.05, n=6);而RSK总蛋白的表达量则无明显改变.结果提示,Ser221 RSK磷酸化水平增高和Thr359/Ser363 RSK磷酸化水平降低可能参与了小鼠脑低氧预适应的发生发展过程.
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异常黑胆质成熟剂对抑郁症模型大鼠海马细胞外信号调控激酶信号转导通路的影响
目的:探讨异常黑胆质成熟剂对抑郁症模型大鼠大脑细胞外信号调控激酶信号转导通路(ERK)的影响。方法选取 Sprague-Dawley雄性大鼠84只,随机分为6组:正常对照组、阳性对照组、抑郁症模型组及异常黑胆质成熟剂低、中、高剂量组(ASMq低、中、高分别为1.5、3.0、6.0 g· kg-1· d-1,连续给药4 w),每组14只。除正常对照组外,其余各组均采用轻度不可预见性慢性应激刺激(Chronic mild unp redictable stress,CMUS)建立抑郁症大鼠模型,通过体质量测量、糖水摄取量综合评价大鼠行为学改变,在对 ERK信号转导通路中 Ras和 RSK蛋白表达水平测量的基础上,采用重复测量和单因素方差分析方法,揭示异常黑胆质成熟剂的抗抑郁作用。结果与正常对照组比较,抑郁症模型组体质量增幅明显降低(P <0.05),糖水摄入量显著降低(P <0.05),差异均有统计学意义。与正常对照组比较,抑郁症模型组大鼠海马 Ras和 RSK蛋白表达显著降低(P <0.05),与抑郁症模型组比较,异常黑胆质成熟剂低、中、高剂量组与阳性对照组海马 Ras和 RSK蛋白表达显著升高(P <0.05),差异均有统计学意义。结论异常黑胆质成熟剂可能通过上调 Ras/RSK/ERK信号转导通路起到抗抑郁作用。