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神经干细胞及其临床应用前景
存在于神经系统中的神经干细胞,是一种具有潜在增值分化能力的神经前体细胞,是新生神经细胞的"发源地".作为一种具有终身自我更新能力的细胞,神经干细胞能分化产生神经系统的各类细胞,这一过程中经过不对称分裂产生一个祖细胞(neural progenitor)和另一个干细胞而实现的,其中,祖细胞具有有限的自我更新能力,并自发分化为成神经元和成胶质细胞,进而再转变为神经元及神经胶质细胞[1].
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大鼠骨髓间充质干细胞体外培养可自发分化为内皮细胞
目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)在体外正常培养条件下能否自发分化为内皮细胞.方法:分离原代大鼠BMSCs,传代后正常培养至第7代,选用第3代和第7代用于本次实验.用Real-time PCR方法检测第3代和第7代BMSCs内皮细胞标识物CD31、血管生成素受体2(tyrosine kinase with immunoglobulin-likeand EGF-like domains 2,Tie-2)及血管性血友病因子(yon Willebrand factor,vWF)的表达;体外血管生成试剂盒(Matrigel)检测血管生成能力;免疫荧光染色检测细胞内vWF蛋白的表达.结果:在培养至第7代后,部分BMSCs在形态上呈椭圆形;Real-timePCR和免疫荧光的结果显示第7代BMSCs的内皮细胞标志物表达水平明显高于第3代BMSCs;体外血管生成实验表明第7代BMSCs在Matrigel胶上能形成网状结构.结论:BMSCs在体外正常培养条件下细胞表型会发生一定的变化,并可部分自发分化为内皮细胞.
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红细胞生成素对骨髓间充质干细胞干性的影响
有研究表明,当体外培养的骨髓间充质干细胞(MSC)形成集落时,其多向分化潜能具有逐渐丧失的倾向,且在体外扩增过程中MSC出现了自发分化的倾向,限制了其在临床上的应用.我们前期实验发现,在体外促红细胞生成素(EPO)能促进MSC的增殖和迁移能力.本实验拟用EPO作用于MSC,观察其未分化相关转录因子端粒酶逆转录酶(TERT)、POU5fl转录因子-4(OCT4)、性别决定基因相关转录因子-2(SOX2)和多潜能维持因子(Nanog)mRNA的表达情况,探讨EPO对MSC干性的影响.
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面突外胚间充质干细胞在体内的自发分化
目的:探讨面突外胚间充质干细胞在体内自发分化的情况.方法:取第7代外胚间充质干细胞注射于裸鼠皮下,于第3d、1周、2周取材,HE及免疫组化染色观察细胞的生长及分化情况. 结果:注射后细胞团块逐渐变小、消失.HE染色细胞形态多样,数量逐渐减少.注射后3d,细胞仍表达Vimentin,其余染色未见明显阳性,细胞趋于坏死、吸收.1周时,细胞数量少,为成纤维样细胞.2周时,细胞团消失.结论:面突外胚间充质干细胞在体内生长、分化能力不明显, 多数细胞坏死、吸收.
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面突外胚间充质干细胞在体外的自发分化
目的:探讨无人为抗分化因素干扰下,具干细胞特性的面突外胚间充质细胞在体外自发分化的方向.方法:取第4代外胚间充质干细胞,去除抑制分化的白血病抑制因子(LIF),2d、2周爬片,免疫细胞化学法检测细胞分化情况.结果:去除LIF,细胞形态发生改变,由成纤维样变得多样化,随时间的延长而明显.去除LIF 2d,细胞不再表达HNK-1、NSE、S-100,约65%细胞表达a-SMA,I型胶原出现表达.去除LIF2周,约1%细胞表达NF,零星细胞表达GFAP.结论:外胚间充质干细胞在体外出现自发分化,向平滑肌细胞分化具有明显优势.