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脐血干细胞移植在儿童疾病中的应用前景
骨髓造血干细胞移植(BMT)是近年来各国应用较为广泛的医治血液系统疾病的方法.BMT可分为自体和异体造血干细胞移植两种,由于种种原因均开展得很局限.一般无血缘关系的人群中,HLA配型一致的机率是1～2万分之一,再加之对骨髓移植的偏见使多数人不愿接受HLA配型检测,因此,干细胞的来源成为干细胞移植的一大难题. 脐血干细胞(umbilical cord blood stem cell,UCBC),取自来源广泛的脐血,富含CD34+细胞.CD34+细胞是具多系分化潜能的造血前体细胞,可能与细胞与细胞间的粘附及造血相关基因的表达有关.随胎龄增长,CD34+细胞表达比例显著下降,妊娠13周时CD34+细胞占11.1%,足月时仅占1.0%.所需造血干细胞低数量随供体与受体间HLA相容性、病人抗HLA敏感性及年龄等因素而变化.人脐血CD34+ Thy+Lin-细胞被当作原始的干细胞,每104个低密度单核细胞(LDMNC)中有一个干细胞.脐血中还包括早期和定向造血祖细胞,是成人外周血10倍,含CFU-GM(粒单系集落形成单位)、BFU-E(红系爆式集落形成单位)、CFU-L(淋巴系集落形成单位)、CFU-Meg(巨核系集落形成单位)和CFU-Mix(混合系集落形成单位).BMT时重建体内造血所需造血干细胞数量尚未确定.成人同种异基因骨髓移植少需CD34+细胞≥2×105/kg,而1份脐血通常含(20～50)×104个干细胞.粒单集落形成细胞(GM-CFCs)为(1～10)×103/kg,而脐血GM-CFCs在(2～2.5)×106.每例脐血采集量约50ml～200ml,就可移植成功1个50kg体重的成人,因此1份脐血对于1名一般儿童已经足够.
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造血刺激因子对巨核细胞体外扩增的影响
目的:探讨造血刺激因子对巨核系成熟细胞体外扩增的影响.方法:将小鼠骨髓单个核细胞(BMNC)按(2,4,6,8,10)×105个/mL浓度加入半固体培养体系,体外培养巨核细胞集落形成单位(CFU-Meg),观察BMNC数与CFU-Meg生成数之间的关系;将BMNC分别加入含rmSCF+rmTPO+rmIL-3(3HSFs),rmSCF+rmIL-3+rmTPO+rmIL-6(4HSFs)或骨髓成纤维细胞条件培养液(F-CM)的液体培养体系中持续培养,从培养的第1d开始每两天观察巨核系成熟细胞的生成情况.结果: 当小鼠骨髓单个核细胞按(2,4,6,8,10)×105个/mL浓度种入CFU-Meg培养体系时,CFU-Meg生成数随细胞种入数增加而增多;种入细胞浓度对CFU-Meg产率有影响,种入细胞浓度为1×106个/mL时,与种入细胞浓度为2×105个/mL,每2×105个骨髓单个核细胞生成的CFU-Meg数相比,差异有统计学意义(P<0.05).3HSFs,4HSFs和F-CM均对巨核系成熟细胞体外扩增有促进作用.3HSFs和4HSFs的扩增作用明显优于F-CM,4HSFs的扩增效果优于3HSFs; 3HSFs和4HSFs扩增体系扩增7 d效果好,F-CM扩增体系扩增5 d效果好.结论: 3HSFs, 4HSFs和F-CM均对巨核系成熟细胞体外扩增有促进作用;4HSFs扩增成熟巨核细胞效果优于3HSFs和F-CM;不同扩增体系扩增巨核细胞的佳效果所需的时间不同.
