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mTOR及PTEN、PHLPP、VEGF、p53蛋白在结肠癌中的表达及意义
目的 检测结肠癌组织中mTOR、PTEN、PHLPP及VEGF和p53蛋白表达,探讨结肠癌发生、发展可能的分子机制及临床意义.方法 选择2011年3月至2012年10月65例结肠癌癌组织标本及25例腹部外伤者的正常结肠组织标本,分别采用免疫组化法及Western-blot方法检测mTOR及PTEN、PHLPP、VEGF、p53蛋白的阳性表达率及相对表达量,并对检测结果进行比较.结果 mTOR、PTEN、PHLPP、VEGF、p53蛋白在正常结肠组织中的阳性率分别为12.0％、96.0％、92.0％、12.0％、8.0％,在结肠癌组织中综合阳性率为78.5％、23.1％、20.0％、92.3％、67.7％.结肠癌组mTOR、VEGF、p53阳性表达率高于正常对照组,PTEN、PHLPP低于正常对照组(P均＜0.01).Western-blot检测结果显示,TNM分期越晚,mTOR蛋白及VEGF表达水平越高(P ＜0.05,P＜0.01),PTEN、PHLPP蛋白表达水平越低(P ＜0.05,P＜0.01),而p53蛋白表达水平在肿瘤TNM不同分期无明显变化.结论 mTOR通路蛋白及抑癌基因PTEN、PHLPP、p53可能参与结肠癌发生、浸润、转移的信号传导.提示mTOR通路蛋白抑制剂可用于结肠癌的治疗.
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PHLPP基因对血管损伤后狭窄的影响
目的 分析蛋白磷酸酶(PHLPP)基因表达水平对血管损伤后狭窄的影响,并探讨其可能机制.方法 动物实验,大鼠分为研究组、对照组和假手术组.研究组大鼠鼠尾静脉给予PHLPP腺病毒,对照组大鼠鼠尾给予空载病毒.给予颈动脉球囊损伤,2周后取颈动脉,切片后染色,观察血管损伤后狭窄程度.细胞实验,取大鼠血管平滑肌原代细胞,分别将质粒pcDNA3.0/PHLPP(研究组)和pcDNA3.0/空载(对照组)转染至该细胞,采用EDU、划痕实验对细胞增殖和迁移能力进行检测;Western blot技术对增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白、基质金属蛋白酶2(MMP2)蛋白和PHLPP基因进行检测.结果 研究组的损伤血管后狭窄程度较对照组减轻,细胞增殖和迁移能力显著低于对照组,并且PCNA和MMP2的mRNA水平和蛋白水平低于对照组(P＜0.05).结论 PHLPP表达水平可通过调节血管平滑肌细胞增殖和迁移能力而影响损伤后血管的狭窄程度;抑制PCNA和MMP2表达可能为其作用机制.
