首页 > 文献资料
-
胃癌与mTOR信号通路的相关性研究
目的 研究胃癌与mTOR信号通路的相关性.方法 选取2014年1月—2015年12月在包头医学院第二附属医院诊治的50例胃癌患者,采用免疫印迹技术及逆转录聚合酶链反应技术,就其癌旁胃组织及癌组织实施检测,另选取同期50例非胃癌患者,就其mTOR相应表达状况予以检测;且对mTOR表达与临床参数关系予以分析.结果 mTOR在胃癌组织中的表达水平高于正常胃组织及癌旁胃组织,差异有统计学意义(P<0.05);mTOR mRNA在胃癌组织相应表达当中呈现为正相关,而其在正常胃组织及癌旁胃组织表达当中也呈现为正相关.mTOR mRNA在胃癌组织当中相应表达水平,则相关于有无淋巴结转移及病理分期等,而不相关于性别及肿瘤直径等.结论 针对胃癌患者,mTOR信号通路在其组织当中特异性激活,而mTOR信号通路可能作用于胃癌的发生及发展.
-
益气化瘀清热方及其拆方对IgA肾病大鼠肾组织mTOR信号通路的影响
目的:探讨益气化瘀清热方及其拆方干预IgA肾病的作用机制及IgA肾病的发生发展机制.方法:将90只雄性Wistar大鼠随机分为6组,即空白组、模型组、益气组、化瘀组、清热组、复方组,采用牛血清白蛋白+四氯化碳+脂多糖的方法制备IgA肾病模型;运用免疫组化技术检测mTOR信号通路下游信号蛋白磷酸化核糖体蛋白S6(pS6)、磷酸化真核细胞启动因子4E结合蛋白1(p-4EBP1)的表达部位,并对其进行半定量分析;运用Western blot检测各组大鼠肾皮质pS6、p-4EBP1的蛋白表达量.结果:pS6、p-4EBP1主要在IgA肾病模型大鼠肾组织中肾小球足细胞及壁层上皮细胞中表达,肾小管中散在表达.免疫组化结果显示,pS6表达量模型组高(P＜0.05),益气组次之(P＜0.05).各实验组p-4EBP1蛋白表达量模型组高(P＜0.05),复方组、空白组低(P＜0.05).Western blot结果同免疫组化结果一致.结论:益气化瘀清热方及其拆方可通过抑制mTOR下游信号蛋白pS6、p-4EBP1的表达发挥治疗作用.
-
齐墩果酸通过mTOR信号通路促进骨肉瘤细胞凋亡
目的:探讨齐墩果酸(0A)促进骨肉瘤细胞凋亡、抑制骨肉瘤细胞生长是否与rmTOR信号通路有关.方法:骨肉瘤细胞分别用0、12.5、25、50、75、100μmol/L的OA处理后,MTT法观察OA抑制骨肉细胞生长情况;用AnnexinⅤ和PI凋亡染色,比较不同浓度组之间的差异性,同时行流式细胞仪检测不同组之间的凋亡率;用流式细胞仪检测OA抑制骨肉瘤细胞的细胞周期情况;用Western Blot检测OA促进细胞凋亡与mTOR信号通路之间关系.结果:MTT检查结果显示OA能显著按浓度依赖和时间依赖抑制骨肉瘤细胞生长,各组间有统计学差异;OA能显著按照浓度依赖促进骨肉瘤细胞凋亡,随浓度增加凋亡率显著增高,各组间有统计学差异;流式细胞仪检测OA抑制骨肉瘤细胞生长,主要抑制在G1期,随OA浓度增加抑制越明显;mTOR信号检查发现,OA促进骨肉瘤细胞凋亡,凋亡蛋白Caspase-3随浓度增高而增加,p-AKT、p-S6、p-4EBP1随OA浓度增加而显著减少.结论:OA能显著抑制骨肉细胞生长并促进其凋亡,OA通过mTOR信号通路促进骨肉瘤细胞凋亡.
-
齐墩果酸抑制骨肉瘤生长的mTOR信号通路分子机制研究
目的:探讨齐墩果酸(OA)通过促进凋亡、抑制mTOR信号通路从而抑制骨肉瘤生长的分子机制.方法:18只裸鼠,成功构建骨肉瘤模型后,对照组(6只)给予正常饲养;实验Ⅰ(6只)、Ⅱ组(6只)给予OA每日灌胃.观察裸鼠骨肉瘤瘤体外观形态大小变化,测量瘤体体积变化,计算抑瘤率;取瘤体组织Western blot检测凋亡蛋白Caspase-3、PARP变化情况,检测mTOR信号通路中主要蛋白p-AKT、p-S6、p-4EBP1含量变化.结果:实验Ⅰ、Ⅱ组中瘤体组织体积及重量均明显较对照组小(P＜0.01);肿瘤组织中凋亡蛋白Caspase-3、PARP裂解明显比对照组中增多;瘤体组织中mTOR信号通路中主要蛋白p-AKT、p-mTOR、p-S6、p-4EBP1含量明显较对照组中减少(P＜O.05).结论:OA在体内能明显抑制瘤体生长,通过促进肿瘤细胞凋亡、抑制mTOR信号通路起作用.
-
自噬调控肾脏衰老的分子机制及中药的干预作用
衰老是生物体在遗传和环境等多种因素共同作用下而逐渐发生的组织、器官功能性衰退.自噬是真核细胞由溶酶体介导而降解细胞质成分的过程.肾脏是典型的衰老靶器官.自噬可以调控肾脏衰老,自噬水平降低就会加速肾脏衰老,反之,自噬水平升高就能延缓肾脏衰老.在这一肾脏衰老的调控过程中,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)及其相关信号途径,包括腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)/mTOR、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)／丝氨酸-苏氨酸激酶(serine-threonine kinase,Akt)/mTOR、AMPK/沉默信息调节因子1(silent information regulation 1,Sirtl)和转化生长因子β(transforming growth factorβ3,TGF-β)等通路发挥了重要作用.在体内调控这些信号途径的关键信号分子就可以干预肾脏衰老.一些经典的补肾、活血类中药及其提取物,如冬虫夏草(Cordyceps sinensis)、姜黄素(curcumin)、白藜芦醇(resveratrol)等对肾脏衰老和／或肾脏自噬具备有益的影响.因此,基于自噬调控的分子机制揭示中药抗肾脏衰老的药理作用是今后的发展方向之一.
-
mTOR信号通路调控糖尿病肾病肾小球肥大的机制及中药的干预作用
肾小球肥大(glomerular hypertrophy)是糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)早期阶段主要的病理特征,其调控机制与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路活性密切相关.mTOR包括mTORC1和mTORC2,其中,mTORC1上游信号通路是磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸激酶(serinethreonine kinase,Akt)/5-单磷酸腺苷活性蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK),其代表性的下游信号分子是4E结合蛋白(4E-binding proteins,4EBP)和70 kD核糖体S6激酶(phosphoprotein 70 S6Kinase,p7OS6K).一些中药提取物可以在体外通过干预PI3K/Akt/mTOR信号通路关键上、下游信号分子的表达而改善细胞增殖.对于肾小球系膜细胞和足细胞,mTOR通过调节细胞周期、能量代谢以及相关的基质蛋白合成等多种途径对肾小球固有细胞发挥着重要的调控作用.对于DN动物模型,mTOR抑制剂——雷帕霉素可抑制肾小球固有细胞肥大、增殖以及相应的肾小球基底膜增厚和系膜基质沉积.一些中药提取物在体内外可以通过干预DN肾组织或肾脏固有细胞mTOR信号通路的活性而减轻相应的肾小球病变.
-
大黄酸调控mTOR信号通路活性抑制肾小管上皮细胞自噬蛋白表达的分子机制
目的:探讨大黄酸抑制饥饿诱导的肾小管上皮(NRK-52E)细胞自噬蛋白的作用和分子机制.方法:用Hank's平衡盐溶液(Hank's balanced salt solution,HBSS)诱导NRK-52E细胞产生饥饿状态,在干预后的各时间点(0,0.5,1,2,6 h),首先,检测细胞自噬标志性蛋白——哺乳动物同族物微管相关蛋白1轻链3 (microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)Ⅰ/Ⅱ的表达水平;其次,检测细胞哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)表达及其磷酸化水平(phos-phorylated-mTOR Ser2448,p-mTOR S2448);然后,以大黄酸(5 mg· L-1)、HBSS(1 mL)以及mTOR抑制剂雷帕霉素(100 nmol·L-1)单独或联合干预,分别检测其LC3 Ⅰ/Ⅱ,mTOR,p-mTOR S2448蛋白表达水平的变化.结果:HBSS诱导NRK-52E细胞LC3Ⅱ蛋白高表达、p-mTOR S2448蛋白低表达;大黄酸与HBSS联合干预可以逆转HBSS诱导的NRK-52E细胞LC3 Ⅱ和p-mTORS2448蛋白表达水平;雷帕霉素与大黄酸、HBSS联合干预可以恢复HBSS诱导的NRK-52E细胞LC3 Ⅱ蛋白表达水平.结论:HBSS抑制mTOR信号通路活性而诱导肾小管上皮细胞发生自噬;大黄酸调控mTOR信号通路活性而抑制肾小管上皮细胞白噬蛋白的表达,这可能就是其干预细胞自噬的作用和分子机制.
-
柴苓汤诱导小鼠心脏移植免疫耐受的实验研究
目的 探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路在柴苓汤诱导调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)增殖以及诱导小鼠同种异体心脏移植免疫耐受中的作用.方法 以CC57BL/6j(H-2b)小鼠为供体、C3 H/He(H-2k)小鼠为受体建立腹部心脏移植模型,术后随机分为对照组、雷帕霉素组和柴苓汤组,每组20只.每天分别用无菌生理盐水、雷帕霉素(1.5 mg/kg)和柴苓汤(2 g/kg)灌胃,共7天.术后观察3组小鼠移植心脏生存期及心脏形态学改变;术后第7天,采用流式细胞术和RT-PCR分别检测受体脾脏Tregs百分率和Foxp3 m RNA的表达量;RT-PCR和Western blot检测mTOR通路分子的mRNA(mTOR、P70s6k)和磷酸化蛋白(p-mTOR、p-P70s6k)的表达水平.结果 柴苓汤组和雷帕霉素组移植心脏生存时间较对照组均明显延长(P＜0.05);术后第7天,病理结果显示对照组出现典型细胞免疫性损伤改变,柴苓汤组和雷帕霉素组少许炎症细胞浸润.柴苓汤组和雷帕霉素组Tregs百分率和Foxp3 mRNA表达量较对照组均明显增加(P＜0.05);柴苓汤组和雷帕霉素组mTOR通路分子的mRNA和磷酸化蛋白的表达较对照组均明显下调(P＜0.05),柴苓汤组和雷帕霉素组间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 柴苓汤可以通过抑制mTOR通路分子表达来诱导Tregs增殖,从而实现诱导小鼠心脏移植免疫耐受.
-
mTOR信号通路对非小细胞肺癌放疗敏感性的影响
目的:探讨mTOR信号通路对非小细胞肺癌放疗敏感性的影响.方法:将非小细胞肺癌细胞系A549细胞分成对照组与实验组,对照组不对mTOR信号通路进行干预,实验组采用不同剂量的雷帕霉素干预mTOR信号通路,两组采用不同剂量射线辐射,对比分析两组细胞的存活能力、克隆数目、凋亡情况.结果:实验组细胞的平均存活时间为(3.5±0.7)d,对照组细胞的平均存活时间为(5.8±0.6)d,实验组明显短于对照组,对比两组差异显著,有统计学意义(P<0.05);实验组细胞4Gy、8Gy的平均克隆数目分别为(55±6)个、(19±2)个;对照组细胞4Gy、8Gy的平均克隆数目分别为(144±21)个、(96±13)个,实验组明显低于对照组,对比两组差异显著,均有统计学意义(P<0.05);实验组细胞的凋亡比例明显高于对照组,对比两组差异显著,有统计学意义(P<0.05).结论:mTOR信号通路对非小细胞肺癌放疗敏感性具有一定的影响,抑制mTOR信号通路可增强非小细胞肺癌放疗的敏感性.
-
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路相关基因对大鼠再生肝8种细胞生长过程的调节作用
目的 从基因转录水平了解哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对大鼠再生肝8种细胞的生长调节作用. 方法 在本实验室建立大鼠2/3肝切除模型,分离和鉴定再生肝8种细胞,采用大鼠Genome230 2.0芯片检测、数据处理及实时荧光定量PCR等方法,构建mTOR的信号通路网络,分析mTOR信号通路的相关基因在以上8种细胞中的表达谱,用系统生物学方法分析基因表达谱预示的细胞生长活动. 结果 mTOR信号通路涉及110个基因和25条途径,99个基因含于大鼠Genome 230 2.0芯片,82个基因与大鼠肝再生相关.其中,在启动阶段,mTOR信号通路主要参与激活、促进肝细胞、陷窝细胞、库普弗细胞、树突状细胞、肝星形细胞和窦内皮细胞的生长过程；在进展阶段,mTOR信号通路明显地促进肝细胞、胆管上皮细胞、卵圆细胞、肝星形细胞、库普弗细胞、陷窝细胞和树突状细胞的生长过程；在终止阶段,mTOR信号通路的大多数途径对肝细胞、库普弗细胞和树突状细胞的生长过程的促进作用减弱,而途径25却对肝细胞、窦内皮细胞、肝星形细胞和陷窝细胞的生长过程有明显的抑制作用. 结论 mTOR信号通路的25条途径和82个基因参与大鼠再生肝8种细胞的生长调控.
-
2型糖尿病大鼠早期心肌病 mTOR 信号通路的改变与自噬损伤
目的：检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（ mTOR）信号通路及自噬相关蛋白在糖尿病大鼠心肌早期损伤中的表达变化，探讨其在糖尿病心肌病发生发展中的作用。方法 SD大鼠30只经高脂饮食5周后，腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型，实验将大鼠分为空白对照组和糖尿病2周、4周模型组，Western blot和免疫组织化学检测心肌mTOR、p-mTOR、S6K1、Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白表达变化。结果糖尿病2周模型组大鼠相对于正常对照组心肌mTOR、p-mTOR、S6K1、Beclin-1和LC3-Ⅱ表达显著增加， p-mTOR及S6K1表达4周模型组比2周模型组增加更明显。结论 mTOR信号通路可能通过调控心肌自噬损伤，参与早期糖尿病心肌病的发生发展。
-
吡格列酮改善糖尿病肾脏疾病肾小管间质纤维化病变的动物实验研究
目的 探讨吡格列酮通过影响AMPK/PI3K/mTOR通路抑制糖尿病肾脏纤维化发生发展的分子机制.方法 24只SD大鼠随机分为正常对照组(NC)、糖尿病组(DM)及吡格列酮治疗组(BG),每组各8只.DM组和BG组STZ腹腔注射复制T1DM模型,成模后第9周BG组予吡格列酮10 mg/(kg·d)连续灌胃8周.16周末处死大鼠,取血清和处死前24 h尿液检测生化指标,观察肾脏组织病理改变,免疫组织化学法和Western blot检测目的蛋白的表达.结果 与NC组比较,DM组FBG、UACR、TG、TC均升高(P<0.05),与DM组比较,BG组UACR、TG和TC降低(P<0.05).与NC组比较,BG组肾小管间质纤维化增加,胶原阳性染色加重,胶原容积分数(CVF)[(17.48±0.59)％vs(36.16±2.09)％,P<0.05],肾间质Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)[(0.08±0.02)vs(0.26±0.02),P<0.05]沉积增加而上皮钙黏附蛋白(E-cadherin)减少[(0.44±0.01)vs(0.19±0.01),P<0.05],肾组织活化的AMPKα 减少[(3.42±0.57)vs(0.93±0.05),P<0.05],活化的Akt[(0.27±0.04)vs(0.49±0.06),P<0.05]、mTOR[(0.63±0.15)vs(5.28±0.89),P<0.05]及P70S6K[(0.63±0.09)vs(0.97±0.13),P<0.05]增加,E-cadherin减少[(0.45±0.09)vs(0.27±0.06),P<0.05],α-SMA表达增加[(0.21±0.04)vs(0.51±0.12),P<0.05];与BG组比较,DM组肾脏纤维化病理改变减轻,胶原阳性染色减轻,CVF[(36.16±2.09)％vs(25.24±2.34)％,P<0.05],肾间质Col-Ⅲ沉积减少[(0.26±0.02)vs(0.18±0.03),P=0.005],E-cadherin增加[(0.19±0.01)vs(0.31±0.02),P<0.05],肾组织活化的AMPKα 增加[(0.93±0.05)vs(2.64±0.76),P<0.05],活化的Akt[(0.49±0.06)vs(0.29±0.08),P<0.05]、mTOR[(5.28±0.89)vs(1.63±0.71),P<0.05]和P70S6K[(0.97±0.13)vs(0.71±0.09),P<0.05]减少,肾组织E-cadherin蛋白表达增加[(0.27±0.06)vs(0.42±0.03),P<0.05],α-SMA表达减少[(0.51±0.12)vs(0.24±0.05),P<0.05].结论 吡格列酮可能通过增加AMPKα 的活化,抑制PI3K/mTOR信号通路,缓解糖尿病大鼠肾脏纤维化病变.
-
雷帕霉素调控自噬在骨关节炎软骨细胞退变中的机制研究
背景:骨关节炎(Osteoarthritis,OA)的发生与软骨细胞自噬活动降低、细胞稳态失衡密切相关.雷帕霉素是一种常用的自噬诱导剂,能上调自噬活动、维持细胞稳态.目的:明确能否通过雷帕霉素提高软骨细胞自噬相关因子的表达,促进软骨细胞生存.方法:收集正常软骨标本5例,中期及晚期OA软骨标本各10例.免疫组织化学检测软骨组织中自噬相关蛋白表达情况.体外分离、培养软骨细胞,进行药物实验.各期OA标本软骨细胞分为低、中、高浓度实验组和对照组,分别予以1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L雷帕霉素及相同体积培养基.运用聚合酶链式反应(poly-merase chain reaction,PCR)及Western-Blot检测自噬相关因子ULK1、Beclin1、LC3表达变化规律.结果:免疫组织化学检测发现,随着OA退变程度加重,软骨组织中自噬相关蛋白阳性表达率逐渐降低.PCR及Western-Blot发现,雷帕霉素干预正常软骨细胞后,实验组自噬相关因子ULK1、Beclin1、LC3表达量高于对照组,且与雷帕霉素呈浓度依赖性.中期OA软骨细胞结果与正常软骨细胞类似,但组间差异更明显.晚期OA软骨细胞中,实验组自噬相关因子表达量较对照组呈上升趋势,但升高幅度较小.结论:雷帕霉素可以上调自噬相关因子的表达,其中正常及中期OA软骨细胞对雷帕霉素诱导的自噬活动具有良好的反应性,而晚期OA软骨细胞对雷帕霉素刺激反应较差.
-
雷帕霉素延缓老年小鼠脊柱退变的实验研究
目的 探讨雷帕霉素(Rap)对老年小鼠自发性脊柱退变的保护作用.方法 将20只老年C57B6小鼠(27月龄)随机分为实验(30 m+Rap)和对照(30 m)两组,实验组小鼠每天灌胃1次西罗莫司(2 mg/(kg.d)),对照组灌等量生理盐水,均持续灌胃3个月后取材,通过μCT观察椎体结构和进行骨小梁分析,组织切片行HE和阿尔新蓝染色观察椎体和椎间盘情况,还进行TRAP染色检测破骨细胞数目和免疫组织检测二型胶原(COLⅡ)表达及分布.结果 Micro-CT检查测量,发现雷帕霉素能缓解脊柱椎体骨皮质变薄和骨小梁减少,主要表现在喂雷帕霉素后椎体的BV/TV及骨小梁数量增加,骨小梁分离度减少,但骨小梁厚度无明显改变.HE染色和阿尔新蓝染色显示雷帕霉素能缓解老年小鼠椎间盘退变,表现在30 m+Rap组小鼠椎体骨小梁较30 m组多,30 m+Rap组小鼠椎间隙较30 m组大,30 m组纤维环结构紊乱,向髓核内生长替代部分髓核组织,生长板和软骨终板软骨退变明显.TRAP染色检测,发现30 m+Rap组破骨细胞减少,免疫组化检测显示COLⅡ在30 m组小鼠的软骨终板和生长板表达明显较30 m+Rap组减少.结论 雷帕霉素能通过mTORC1调控破骨细胞和软骨细胞,延缓老年小鼠脊柱退行性病变.
-
mTOR信号通路及其在宫颈癌研究中的进展
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR) 信号通路由于处于生长调节的中心环节而倍受关注,其在细胞生长、增殖、分化及细胞周期调控等多个方面起到重要作用.mTOR信号通路复杂且涉及广泛,其中多个元素的调控异常均与肿瘤的发生密切相关.近年来研究显示,宫颈癌中mTOR信号通路过度表达,表明宫颈癌的发生发展与mTOR信号通路存在紧密内在联系.这可为寻找阻断此通路的特异性靶向治疗药物提供依据.但其具体机制仍需深入研究.本文就mTOR信号转导通路的组成与功能、调节及其与宫颈癌发生发展的相关性进行综述.
-
白藜芦醇对病理性瘢痕成纤维细胞mTOR信号通路相关分子表达的影响
目的 观察白藜芦醇对病理性瘢痕成纤维细胞mTOR信号通路关键分子PI3K、Akt、mTOR表达的影响.方法 应用免疫荧光检测PI3K、Akt、mTOR在病理性瘢痕及正常皮肤组织成纤维细胞中的表达;病理性瘢痕成纤维细胞经不同浓度白藜芦醇处理后,分别应用RT-PCR、Western Blot检测PI3K、Akt、mTOR mRNA和蛋白的表达.结果 免疫荧光检测结果显示,PI3K、Akt、mTOR在病理性瘢痕成纤维细胞中表达明显增强,且主要表达于细胞核,而在正常皮肤组织成纤维细胞中未见明显表达;RT-PCR及Western Blot检测结果显示,病理性瘢痕成纤维细胞经不同浓度的Res干预后,Akt和mTOR mRNA和蛋白表达量降低,并且呈剂量依赖关系,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05),而PI3K mRNA和蛋白表达量降低不明显,与对照组相比差异无统计学意义(P＞O.05).结论 白藜芦醇抑制病理性瘢痕成纤维细胞增殖的机制可能与其下调mTOR信号通路关键分子Akt、mTOR表达有关.
-
3周大运动量训练对大鼠骨骼肌mTOR信号通路的影响
目的:探讨3周大运动量训练过程中,大鼠骨骼肌蛋白合成代谢的变化规律和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的变化特点.方法:以7周龄雄性SD大鼠(36只)为研究对象,按体重随机分对照组3组(C1、C2、C3)和运动组(E1、E2、E3)3组.运动组进行3周大强度和中等强度相结合大运动量跑台训练,对照组不运动.每周训练结束后,随机选取对照组和运动组各1组,测试腓肠肌湿重、肌球蛋白重链(MHC)表达、mTOR及其下游信号70KD核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)、真核起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)的蛋白表达和磷酸化水平.结果:(1)第1周训练结束,与同期对照组(C1)相比,E1组p70S6K(Thr389)磷酸化水平和4EBP1蛋白表达显著升高(P＜ 0.01);4EBP1 (Thr37/46)磷酸化水平显著升高(P＜0.05).(2)第2周训练结束,与同期对照组(C2)相比,E2组mTOR (Ser2448)磷酸化水平显著降低(P＜0.01);p70S6K(Thr389)磷酸化水平显著降低(P＜0.05).(3)第3周训练结束,与同期对照组(C3)相比,腓肠肌MHC蛋白表达显著降低,mTOR (Ser2448)和p7OS6K(Thr389)磷酸化水平显著降低(P＜0.01);腓肠肌湿重和mTOR、p70S6K、4EBP1蛋白表达显著降低(P＜0.05).结论:3周大运动量训练过程中,骨骼肌蛋白合成能力呈现出先升高后降低的变化特点.大运动量训练疲劳后对骨骼肌蛋白合成的抑制作用主要由mTOR信号通路蛋白表达降低所致.
-
有氧运动干预父系C57BL/6J小鼠对雄性子代骨骼肌mTOR信号通路的影响
目的:探究运动干预父系小鼠对雄性子代骨骼肌mTOR信号通路的影响.方法:同窝C57BL/6J雄性小鼠(F0),自出生21天断乳后随机分为运动组(E)和安静组(C),正常饮食,运动组进行6周跑台训练,6周后两组分别与同窝安静雌性小鼠1︰1交配.运动组F1代雄性小鼠为EM组;安静组F1代雄性小鼠为CM组.F1代小鼠出生21天断乳后,分别检测其表型及骨骼肌mTOR信号通路分子的表达变化.结果:(1)EM组小鼠体重、抓力、股四头肌湿重及股四头肌湿重/体重比值较CM组均显著增加(P<0.05);(2)EM组小鼠股四头肌细胞的横截面积较对照组增加30.26％(P<0.05);(3)EM组小鼠股四头肌PI3K、Akt、mTOR以及S6K1总蛋白表达水平较CM组略有增加(P>0.05);而pAkt,pmTOR,pS6K1以及p4E-BP1蛋白表达水平较对照组显著增加(P<0.05).结论:(1)6周跑台运动干预父系小鼠可显著增加雄性子代小鼠的体重、抓力、股四头肌湿重及股四头肌细胞横截面积.(2)6周跑台运动干预父系小鼠后,其雄性子代小鼠骨骼肌组织mTOR信号通路活性显著高于对照组.提示,运动干预父系小鼠促进子代雄性小鼠骨骼肌发育可能与mTOR信号通路激活密切相关.
-
mTOR信号通路在神经胶质瘤干细胞样细胞中激活的意义研究
目的：探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在神经胶质瘤干细胞样细胞中激活的意义。方法通过Hoechst33342染色流式细胞仪，利用Western blot法和荧光定量-PC R法对非侧群(NSP)细胞和侧群(SP)细胞中的mTOR信号通路在神经胶质瘤干细胞样细胞中激活的意义进行分析研究。结果光定量PCR检测NSP和SP细胞中， mTOR基因的2-△Ct值为(0.289±0.042)和(0.623±0.021)，两者差异有统计学意义(P<0.05)， Western blot检测结果证实， SP细胞的mTOR蛋白表达也明显高于NSP细胞(P<0.05)。结论神经胶质瘤干细胞中存在mTOR高表达现象。
-
利拉鲁肽对1-甲基4-苯基吡啶离子诱导的PC12细胞氧化损伤的影响
目的:观察利拉鲁肽(LIR)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的PC12损伤的保护作用,并探讨其可能的机制.方法:利拉鲁肽(1,10和100 nmol·L-1)预处理半小时后,800 μmol·L-1 Mpp+处理PC12细胞24 h诱导损伤,细胞存活率的检测采用噻唑蓝法(MTT);JC1染色检测细胞线粒体膜电位;细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平采用丙酮酸二硝基苯腙比色法检测;硫代巴比妥法检测细胞培养液中丙二醛(MDA)水平;Western blot检测S6K1和4E-BP1的表达.结果:与对照组比较,MPP+损伤组细胞的存活率显著降低,线粒体膜电位显著降低,细胞培养液中LDH和MDA及细胞内活性氧水平均显著升高,细胞中p-S6K1和p-4E-BP1表达水平均显著下调(均P＜0.05);与MPP+损伤组比较,利拉鲁肽保护组(10和100nmol· L-1)细胞的存活率显著增加,线粒体膜电位显著增加,细胞培养液中LDH和MDA及细胞内活性氧水平显著降低,细胞中p-S6K1和p-4E-BP1表达水平均显著上调(均P＜0.05),均呈浓度依赖性.结论:利拉鲁肽抑制了MPP+诱导的PC12细胞氧化应激损伤,其机制可能与mTOR信号通路的激活有关.
关键词： 利拉鲁肽 1-甲基-4-苯基吡啶离子 PC12细胞 氧化应激 mTOR信号通路
