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茶多酚对人乳头瘤病毒16亚基因永生化人宫颈上皮细胞生长的影响
目的 探讨茶多酚对人乳头瘤病毒16(HPV16)亚基因永生化宫颈上皮细胞(H8细胞)生长的影响.方法 采用0(对照组)、6.25、12.5、25、50 mg/L茶多酚与H8细胞共孵育24、36、48 h后,CCK8法检测细胞增殖,孵育24h后流式细胞仪检测细胞凋亡与细胞周期,荧光显微镜观察细胞凋亡形态.结果 不同浓度茶多酚孵育H8细胞24、36、48 h可抑制H8细胞的增殖,12.5 mg/L茶多酚可时间依赖性降低H8细胞的相对生长率.流式细胞仪检测结果示,0、6.25、12.5、25、50 mg/L茶多酚组细胞凋亡率分别为29.96％±0.70％、52.62％±0.62％、52.22％±0.72％、42.52％±0.90％、45.96％±2.11％,组间差异有统计学意义(F=272.00,P＜ 0.05),各浓度茶多酚组细胞凋亡率均显著高于对照组(均P＜ 0.05).荧光显微镜下可见茶多酚处理组H8细胞出现核固缩、核碎裂等典型凋亡形态学改变.各浓度组细胞G1、G2期细胞比例和细胞增殖指数差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,6.25、12.5、25 mg/L组G1期细胞比例增加(55.96％±0.72％、54.12％±3.20％、65.30％±1.51％,均P＜ 0.05),G2期细胞比例减少(3.17±1.82％、4.94±1.46％、4.65±4.26％,均P＜0.05),增殖指数降低(0.44±0.01、0.46±0.02、0.36±0.01,均P＜0.05).结论 茶多酚可抑制H8细胞增殖,诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期.
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鬼臼毒素纳米脂质载体诱导永生化人宫颈上皮细胞凋亡的作用及机制
目的 研究鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)对永生化人宫颈上皮细胞(H8 细胞)的凋亡诱导作用及机制.方法 采用超声乳化法制备POD-NLC,分别以不同质量浓度(0.000 1、0.001、0.01、0.1、μg/ml)的POD-NLC和鬼臼毒素(POD)处理H8细胞,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,荧光显微镜和透射电镜观察细胞形态变化.结果 POD-NLC和POD干预后均能抑制HB细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性,在同一时间相同浓度条件下,POD-NLC干预后细胞增殖抑制率明显高于POD干预后;0.01μg/ml的POD-NLC干预H8细胞24、48 h后细胞凋亡率均明显高于POD.POD-NLC和POD干预H8细胞48 h后,荧光显微镜和透射电镜下观察均出现核固缩、染色质高度凝聚、凋亡小体等典型的凋亡形态改变.结论 与POD相比,POD-NLC对H8细胞具有更强的增殖抑制和凋亡诱导效果,其机制可能为POD经NIC包裹后对组织的黏附性增大,更易黏附于细胞表面,细胞内的药物浓度提高.
关键词： 鬼臼毒素 纳米结构脂质载体 细胞凋亡 永生化人宫颈上皮细胞 -
鬼臼毒素纳米脂质载体的制备及体外对HPV感染的永生化人宫颈上皮细胞的作用
目的 研究鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)的体外对HPV感染的永生化人宫颈上皮细胞的作用.方法 采用乳化蒸发法制备POD-NLC,分别应用扫描电镜、粒径仪、高效液相法等方法研究其表征,并观察其稳定性.分别以不同浓度(0.0001~1 μg/ml)的POD-NLC和鬼臼毒素(POD)处理H8细胞,采用MTT法检测细胞的增殖活性,以荧光显微镜观察细胞的形态变化,流式细胞术(FCM)检测其凋亡率和细胞周期.结果 ①制备的POD-NLC扫描电镜下呈球形,有较好的稳定性,粒径为(85.6±10.25)nm,电位为(26.2±4.1)mV,包封率为(88.56±3.1)%;②POD-NLC能较强地抑制H8细胞的增殖,其抑制作用呈现时间和剂量依赖性;POD-NLC和POD作用72 h对H8细胞的抑制率高分别为95.8%、65.6%,半数抑制浓度(IC50)分别为0.015、0.13 μg/ml;空白NLC对H8细胞的增殖无影响;③浓度为0.01 μg/ml的POD-NLC和POD分别处理H8细胞48 h后,H8细胞的凋亡率分别为(88.30±4.28)%和(59.95±3.26)%;荧光显微镜观察,均出现了核固缩、染色质高度凝聚、凋亡小体等典型的凋亡形态改变;与空白对照组相比,POD-NLC组和POD组G2/M期细胞比例明显增多,S期细胞比例无明显变化,G0/G1期细胞比例明显减少,但两组间细胞周期时相比例的差异无统计学意义(P>0.05).结论 该制备工艺可行;与POD相比,POD-NLC对H8细胞具有更强的增殖抑制和凋亡诱导效果,可使细胞阻滞于G2/M期,显示出良好的抗宫颈HPV感染的效果.
关键词： 鬼臼毒素 纳米结构脂质载体 细胞凋亡 永生化人宫颈上皮细胞
