首页 > 文献资料
-
白藜芦醇诱导乳腺癌细胞凋亡过程中ASPP1、ASPP2基因的表达
目的 检测白藜芦醇作用MCF-7(野生型p53)和MDA-MB-231(突变型p53)乳腺癌细胞后ASPP1和ASPP2的表达.方法 采用MTT法检测白藜芦醇对乳腺癌细胞增殖的影响,采用Western blot法检测经白藜芦醇处理后,MCF-7、MDA-MB-231和MCF-7/Caspase3细胞株PARP的蛋白水平变化.采用RT-PCR、Western blot法检测经白藜芦醇处理后,MCF-7、MDA-MB-231细胞中ASPP1和ASPP2的 mRNA和蛋白表达变化.结果 白藜芦醇对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB231的生长均有抑制作用,呈浓度依赖性.MCF-7和MDA-MB-231细胞中ASPP1和ASPP2的mRNA和蛋白表达均较低,与MDA-MB-231相比,MCF-7细胞中ASPP2的蛋白表达更低.白藜芦醇作用于细胞后,与对照组相比,ASPP1和ASPP2的mRNA和蛋白表达均升高,且随药物浓度增高而表达增高;ASPP1和ASPP2的mRNA和蛋白表达与肿瘤细胞的凋亡呈正相关.结论 白藜芦醇诱导乳腺癌细胞ASPP1、ASPP2基因高表达.
-
ASPP1对胃癌细胞SGC-7901增殖抑制
目的 本研究扩增及鉴定包含人类ASPP1基因转录本蛋白编码区的cDNA片段,将此片段克隆入真核表达载体,转染胃癌细胞,观察其对胃癌细胞增殖力的影响.方法 从胎盘组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增ASPP1基因全长编码序列CDS(full-length coding sequence),目的片段回收纯化后用限制性内切酶Xba I,EcoR I酶切的方法鉴定目的片段正确与否并检测其纯度、浓度:并转染胃癌SGC-7901细胞,观察ASPP1蛋白的表达及用MTT法进行细胞增殖力检测.结果 该扩增片段经限制性核酸内切酶切图谱分析,与预期结果吻合,p53表达增加,转染的胃癌SGC-7901细胞出现增殖受抑.结论 人类ASPP1基因对胃癌细胞增殖有抑制作用,从而为临床上胃癌的基因治疗提供了新思路.
-
大肠癌中ASPP1和p53蛋白的表达及意义
目的 观察人大肠癌组织中ASPP1以及p53蛋白的表达,并探讨其与大肠癌临床病理之间的关系.方法 应用免疫组织化学PV-6000法检测30例大肠癌和15例相应癌旁组织中ASPP1及p53的表达情况,比较ASPP1在大肠癌组织与癌旁组织中表达的差异,并探讨其与p53表达及临床病理之间的关系.结果 p53阴性时,大肠癌旁组织中ASPP1蛋白表达阳性率为80%,明显高于癌组织的16.7%(P<0.05);p53阳性时,癌组织、癌旁组织中的ASPP1蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 当p53阴性时,大肠癌组织中ASPP1表达明显降低,这提示ASPP1蛋白表达降低在大肠癌的发生、发展中起着重要作用.
-
ASPP1和ASPP2基因高表达对白藜芦醇诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡能力的影响
目的 观察ASPP1和ASPP2基因高表达对白藜芦醇诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡能力的影响.方法 采用瞬时转染法将pcDNA3/ASPP1和pcDNA3/ASPP2质粒分别转染入乳腺癌细胞MCF-7中,经G418筛选获得高表达ASPP1和ASPP2的MCF-7阳性克隆细胞株MCF-7/ASPP1与MCF-7/ASPP2.MCF-7、MCF-7/ASPP1与MCF-7/ASPP2细胞分别加入0、25、50 μmol/L白藜芦醇,采用MTT法检测细胞增殖情况,RT-PCT法检测细胞p53下游基因bax与p21mRNA表达情况;3种细胞分别加入0、100、200 μmol/L白藜芦醇,采用ELISA法检测细胞凋亡率.结果 MTT结果显示,25、50 μmol/L白藜芦醇处理后,MCF-7/ASPP1与MCF-7/ASPP2细胞存活细胞吸光度值均明显低于MCF-7细胞(P＜0.05);RT-PCR结果显示,25、50 μmol/L白藜芦醇处理后,MCF-7/ASPP1与MCF-7/ASPP2细胞中Bax和p21mRNA表达水平高于MCF-7细胞;细胞凋亡试验结果显示,100、200 μmol/L白藜芦醇处理后,MCF-7/ASPP1与MCF-7/ASPP2细胞凋亡细胞吸光度值均明显高于MCF-7细胞(P＜0.05).结论 ASPP1和ASPP2高表达可增强乳腺癌细胞对白藜芦醇的敏感性,且随浓度增高而敏感性增强.
-
p53凋亡刺激蛋白家族对自噬调控作用的研究进展
p53凋亡刺激蛋白家族(apoptosis stimulating proteins of p53 family，ASPPs)由ASPP1、ASPP2和iASPP (inhibitory member of the ASPP family)3个成员组成，该家族可通过与p53家族(p53/p63/p73)结合，调控细胞凋亡。自噬是细胞通过溶酶体溶解并回收利用胞内物质，藉此以维持自我稳态的一种方式。目前认为，自噬功能紊乱与肿瘤、神经退行性病变等多种疾病的发生和发展密切相关。本综述总结了近期关于ASPPs对自噬调控作用的研究进展，这些研究证明ASPPs能调控细胞内的自噬水平，并提示ASPPs可能成为多种疾病的潜在治疗靶点。
-
人脑胶质瘤中ASPP1和ASPP2蛋白的表达及其与细胞凋亡的相关性
目的 研究P53凋亡刺激蛋白(apoptosis stimulating protein of P53,ASPP)家族成员ASPP1、ASPP2蛋白在神经胶质瘤中的表达及其与细胞凋亡情况的相关性.方法 通过免疫组化的方法联合检测60例人脑胶质瘤组织和10例正常脑组织中ASPP1、ASPP2蛋白表达.采用TUNEL法检测胶质瘤组织与正常脑组织标本中的细胞凋亡情况,分析ASPP1、ASPP2蛋白表达与细胞凋亡情况的相关性.结果 ASPP1和ASPP2蛋白在正常脑组织和胶质瘤组织中均有表达,且它们在不同级别胶质瘤中的阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05);所有的正常脑组织和胶质瘤组织中均可见到不同程度标记的凋亡细胞,Spearman等级相关分析显示凋亡细胞的表达与肿瘤的恶性程度呈负相关(rs=-0.320,P<0.05).ASPP2蛋白在人脑神经胶质瘤组织中的表达与细胞凋亡的发生呈正相关(rs=0.596,P<0.05),而ASPP1蛋白在人脑神经胶质瘤组织中的表达与细胞凋亡的发生无相关性(rs=0.197,P>0.05).结论 联合检测ASPP1、ASPP2蛋白及细胞凋亡情况可较准确评价人脑神经胶质瘤的病理特征,对判断神经胶质瘤的恶性程度有重要的临床价值,为探讨人脑神经胶质瘤的可能发病机制提供分子实验依据,以ASPP1、ASPP2蛋白或其亚型为靶点的胶质瘤治疗研究将具有广阔的前景.
-
ASPP1基因启动子CpG岛甲基化检测方法的实验初探
目的:建立ASPP1甲基化状况的检测方法,研究ASPP1基因启动子在HEPG-2肝癌细胞株和成纤维细胞株中的甲基化状况.方法:利用因特网对ASPP1基因启动子的CpG岛进行分析,并设计MSP引物,然后对正常的成纤维细胞和p53野生型肿瘤细胞株HEPG-2的ASPP1 DNA启动子甲基化状况进行检测.结果:MSP分析显示,在正常的成纤维细胞中,ASPP1基因启动子CpG岛未出现甲基化;在p53野生型肿瘤细胞株HEPG-2中,ASPP1基因启动子CpG岛处于甲基化状态.结论:MSP检测ASPP1启动子CpG岛甲基化状况的方法客观、准确、可靠.
