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蚤休醇提物对H2O2损伤的ECV304细胞的细胞周期与凋亡的影响
目的 制备中药蚤休醇提物,研究其对H2O2诱导的脐静脉内皮细胞(ECV304细胞)损伤的保护作用及其机制.方法 体外培养ECV304细胞,建立氧化损伤的细胞模型,然后分为五个实验处理组:①正常对照组;②氧化损伤组;③高浓度蚤休醇提物(EFB 500 ng·L-1)组;④中浓度蚤休醇提物(50 ng·L-1)组,⑤低浓度(5 ng·L-1)组.应用流式细胞仪Annexin V/PI染色检测该药物干预H2O2氧化损伤前后的细胞凋亡、PI染色检测细胞周期与凋亡的关系;RT-PCR检测各实验组caspase-3 mRNA表达的变化.结果 采用流式细胞仪PI染色检测结果 对细胞周期进行分析,表明损伤作用于ECV-304细胞后,细胞在G0/G1期的数目增多,在S期的数目减少,同时流式细胞仪检测可见亚二倍体峰,而蚤休醇提物预处理以后,S期细胞数明显增多.流式细胞仪Annexin V/PI检测方法 显示,损伤组的早期与晚期凋亡率之和高,预处理后细胞的早期与晚期凋亡率之和降低.caspase-3 mRNA水平在各实验组的表达显示损伤组与内参照相比的灰度值大,经过预处理之后其值明显下降(P<0.01).结论 蚤休醇提物可以保护H2O2造成的ECV304细胞的氧化损伤,是通过保护细胞周期正常进行、抑制凋亡蛋白caspase-3介导的凋亡信号转导通路实现的.
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蚤休醇提物对离体蟾蜍坐骨神经动作电位的影响
目的:研究蚤休醇提物对蟾蜍离体坐骨神经动作电位传导阻滞作用.方法:观察蚤休醇提物对蟾蜍离体坐骨神经复合动作电位的振幅和传导速度的影响.结果:0.0075g/ml,0.0175g/ml,0.0250g/ml,0.0500g/ml,0.1000g/ml 5种浓度的蚤休醇提物均使坐骨神经复合动作电位的振幅变小(P<0.01),传导速度变慢(P<0.01)并终使坐骨神经动作电位消失.结论:蚤休醇提物能阻滞神经动作电位的传导.
