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BmpA基因文献资料
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莱姆病螺旋体P39蛋白的基因克隆及在大肠杆菌中的高效表达
目的克隆并表达我国莱姆病螺旋体分离株BmpA即P39基因，为制备莱姆病螺旋体基因工程重组抗原以用于我国莱姆病的基础与临床诊断研究奠定基础。方法应用PCR方法及基因重组技术对我国莱姆病螺旋体分离株P39蛋白进行全基因克隆，并在此基础上去掉信号肽序列，将P39基因插入原核表达载体LKB2，在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。表达产物以SDS-PAGE电泳、Western blot、薄层扫描分析。结果成功地克隆了P39基因，序列分析显示，P39基因全长1020bp，其核苷酸序列及氨基酸序列同源性与国外分离株均较高，与Sh-2-82株皆为99％，P39基因在大肠杆菌中以天然蛋白形式得到高效表达，扫描分析其分子量为37kDa，单株表达量占菌体总蛋白的58％，Western blot实验表明其可与莱姆病患者血清发生特异性反应。结论成功克隆了莱姆病螺旋体国内分离株P39蛋白基因并且在原核系统中得到高效表达。重组P39蛋白具有较好的免疫活性，可作为莱姆病新型诊断试剂理想的候选抗原。
