首页 > 文献资料
-
miR-124对非小细胞肺癌细胞迁移和侵袭的影响及机制
目的 观察miR-124对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭的调控作用,并探讨其作用机制.方法 取NSCLC细胞系A549,分为对照组(转染microRNA scramble)、miR-124组(转染miR-124 mimics)和miR-124+Smad4组(转染miR-124 mimics和pcDNA3.1-Smad4),采用细胞划痕实验和Transwell小室基质渗透实验观察三组细胞迁移和侵袭能力,蛋白印迹法测定E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin蛋白表达.将A549分为三组,野生型质粒组、突变型质粒组及阴性对照组,采用荧光素酶法鉴定miR-124与Smad4的靶向关系.结果 miR-124组的划痕愈合率低于miR-124+ Smad4组和对照组,侵袭细胞数少于其他两组(P均＜0,01).miR-124组E-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量高于miR-124+ Smad4组和对照组,N-cadherin蛋白相对表达量低于其他两组(P均＜0.05).野生型质粒组萤光素酶活性显著低于阴性对照组和突变型质粒组,证实miR-124与Smad4之间存在靶向关系.结论 miR-124通过抑制Smad4基因表达抑制上皮间质转化,进而抑制NSCLC细胞迁移和侵袭.
-
miR-124过表达诱导胶质瘤干细胞分化作用研究
目的 探讨miR-124过表达诱导胶质瘤干细胞分化作用的机制. 方法 构建miR-124过表达慢病毒载体并转染人胶质瘤干细胞,以正常培养的胶质瘤干细胞为对照,采用MTT法检测细胞增殖活性,采用流式细胞仪分析干细胞表型,采用RT-PCR检测miR-124及其靶基因Akt、RelA表达水平,采用ELISA法分析其信号通路中炎性因子白介素-1(IL-1)、IL-8分泌水平.结果 成功构建了miR-124过表达慢病毒载体并成功转染了人胶质瘤干细胞获得pGC-miR-124-GSCs.与正常培养的胶质瘤干细胞比较,pGC-miR-124-GSCs增殖能力明显降低,CD133阳性率明显下降,miR-124表达水平明显升高,Akt、RelA表达水平均明显下降,IL-1、IL-8分泌水平均明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 miR-124过表达诱导了胶质瘤干细胞分化,产生强烈的抑瘤活性,其机制可能与抑制炎性因子生成有关.
