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乳浆大戟提取物诱导HeLa细胞凋亡及其机制研究
目的 研究乳浆大戟提取物诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及其分子机制.方法 采用MTT法和克隆形成实验检测乳浆大戟提取物对宫颈癌HeLa细胞的生长和增殖抑制作用；利用Annexin V-FITC/PI双染和DAPI细胞核染色法检测乳浆大戟提取物诱导细胞凋亡情况；线粒体膜电位检测凋亡细胞的线粒体膜电位变化情况；流式细胞仪和Western blot法分别分析细胞周期及细胞周期蛋白变化情况.结果 ①乳浆大戟提取物以时间和剂量依赖的方式显著抑制宫颈癌HeLa细胞的生长和增殖；②乳浆大戟提取物能使宫颈癌HeLa细胞线粒体膜电位显著降低,诱导细胞发生凋亡性细胞死亡；③乳浆大戟提取物能够显著阻滞宫颈癌HeLa细胞在G0/G1期,降低Cyclin D1、Cyclin E和CDK4的表达水平,增加P21的表达水平.结论 乳浆大戟提取物通过下调Cyclin D1、Cyclin E和CDK4的表达和上调P21的表达,使HeLa细胞阻滞在G0/Gl期,进而显著抑制宫颈癌HeLa细胞生长和增殖,诱导细胞依赖线粒体通路的凋亡性死亡.
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中药乳浆大戟抑制人胃癌多药耐药细胞增殖迁移侵袭和诱导凋亡的研究
本文旨在研究中药乳浆大戟抑制多药耐药人胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用,以及诱导细胞凋亡的作用及其作用通路.用不同浓度的乳浆大戟提取液处理人胃癌多药耐药SGC7901/ADR细胞,MTT试验观察细胞增殖抑制情况,Hochest33528染色荧光显微镜观察凋亡细胞核形态并测定凋亡指数,流式细胞术测定细胞凋亡率,Transwell法检测细胞迁移能力和侵袭能力,分光光度法检测caspase-3和caspase-9的酶活性表达,Western blotting检测细胞色素c的亚细胞分布.结果发现,乳浆大戟提取液对人胃癌多药耐药SGC7901/ADR细胞有明显的增殖抑制作用,该作用具有时间和浓度依赖性.乳浆大戟提取液处理的人胃癌多药耐药SGC7901/ADR细胞,凋亡指数和凋亡率均比对照组显著升高,并有时间和剂量依赖性;但添加了caspase酶抑制剂的细胞,凋亡指数没有明显上升.Transwell法检测显示,乳浆大戟提取液处理后的SGC7901/ADR细胞,迁移能力和侵袭能力显著下降.分光光度法检测发现,乳浆大戟提取液处理后的SGC7901/ADR细胞中,caspase-3和caspase-9表达均增加,与对照组有明显差异.Western blotting检测显示,细胞色素c在线粒体中的分布下降,在细胞质中的分布上升(即细胞色素c从线粒体向细胞质逸出).研究表明,乳浆大戟提取液具有抑制人胃癌多药耐药SGC7901/ADR细胞增殖、抑制细胞迁移侵袭和诱导细胞凋亡的作用;乳浆大戟提取液诱导细胞凋亡的作用有细胞色素c、caspase-9和caspase-3的参与,提示内源性或线粒体凋亡通路.
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乳浆大戟增加多药耐药胃癌细胞对化疗药敏感性的研究
目的 研究乳浆大戟增加人胃癌多药耐药细胞对化疗药物敏感性的作用.方法 用MTT实验研究乳浆大戟对阿霉素和紫杉醇对SGC7901/ADR细胞生长抑制作用的影响,并与SGC7901细胞作比较;测定乳浆大戟作用下阿霉素和紫杉醇对SGC7901细胞和SGC7901/ADR细胞的IC50,并作比较.结果 乳浆大戟能增加阿霉素和紫杉醇对SGC7901/ADR细胞的生长抑制作用(P＜0.01),作用具有浓度依赖性(P＜0.05).乳浆大戟对阿霉素和紫杉醇抑制SGC7901细胞的IC50没有显著性的影响(P＞0.05),但能够显著性地降低阿霉素和紫杉醇对SGC7901/ADR细胞的IC50(P ＜0.01),该作用亦具有浓度依赖性(P＜0.05).结论 乳浆大戟提取物能够增加人胃癌多药耐药细胞SGC7901/ADR对化疗药物阿霉素和紫杉醇的敏感性.
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乳浆大戟抑制人宫颈癌细胞增殖迁移和诱导细胞凋亡的研究
目的 研究乳浆大戟抑制人宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭和诱导细胞凋亡的作用并初步探讨其作用机制.方法 用不同稀释度的乳浆大戟提取液处理人宫颈癌SiHa细胞,MTT实验观察细胞生长抑制现象,吖啶橙染色荧光显微镜观察凋亡细胞的核形态改变并测定凋亡指数,流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell法检测细胞迁移能力和侵袭能力,用分光光度法检测caspase-3和caspase-9的表达情况.结果 乳浆大戟对人宫颈癌SiHa细胞有增殖抑制作用,该作用有时间和浓度依赖性.乳浆大戟处理后的人宫颈癌SiHa细胞,凋亡指数和凋亡率均显著上升,均有时间和浓度依赖性.Transwell法检测显示,乳浆大戟提取液处理后的SiHa细胞,迁移能力和侵袭能力显著下降.分光光度法检测发现,乳浆大戟处理后的SiHa细胞中,caspase-3和caspase-9均表达增强.结论 乳浆大戟提取液具有抑制人宫颈癌SiHa细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,其作用通路有caspase-3和caspase-9的参与.
