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中华眼镜蛇膜毒素免疫导向治疗鼻咽癌的实验研究
目的和方法:应用SPDP加抗低分化鼻咽癌上皮细胞表面相关抗原的单抗BAC5与中华眼镜蛇膜毒素(CT)偶联,制备免疫毒素(IT).并用放射性核素双标记、示综、免疫显像和电镜等技术,实验观察IT在体内外对鼻咽癌作用及探讨其作用机制.结果:BAC5在肿瘤组织部位呈现高度浓集的现象,癌/非癌组织放射性强度比(T/NT)高达10.26.IT对体外单层培养的CNE-2细胞和肿瘤多细胞微球均具有抑制作用,体内的初步结果也显示IT对荷人鼻咽癌裸鼠模型也有抑制作用(另文报道).电镜观察发现三个治疗组均出现癌细胞的死亡(包括坏死和凋亡),以联合治疗组为明显.镜下可见大部分癌细胞的细胞膜不连续或溶解的现象,有的癌细胞出现凋亡的特征,表现为癌细胞膜绒毛减少,胞浆浓缩,核固缩或碎裂,在癌细胞间可见大量凋亡小体,偶可见癌细胞吞噬凋亡小体的现象,可见癌组织内有各种免疫细胞的浸润.结论:BAC5对鼻咽癌细胞有特异结合作用,BAC5-CT在体内外具有抑制鼻咽癌的作用,其机制可能与"弹头"CT直接溶解癌细胞膜,或/和IT促进免疫细胞浸润于肿瘤局部而诱导癌细胞凋亡等有关.
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中华眼镜蛇毒膜毒素诱导膀胱癌细胞凋亡的检测
目的 研究中华眼镜蛇毒膜毒素(MT-12)诱导膀胱癌细胞的凋亡作用,比较检测凋亡的几种方法.方法 MT-12作用于体外培养的人膀胱癌(BIU-87)细胞,HE染色、Hoeehest 33342荧光染色、透射电镜观察凋亡细胞的形态变化,DNA琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量检测凋亡率.结果 3种形态学检测方法均能观察到细胞凋亡的形态学变化.3μg/Ml MT作用2、4、8、12、24 h和36 h,双染法流式细胞术检测的细胞凋亡率分别是46.94%、51.2%、28.85%、20.43%、6.03%和5.19%,阴性对照组凋亡率为0.77%.DNA电泳未能检测到细胞凋亡的DNA ladder.结论 MT-12能诱导体外培养的BIU-87细胞凋亡,且具有时间依赖性.透射电镜观察凋亡细胞的形态特征可靠.Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量检测细胞凋亡,其特异性、敏感性、重复性和准确性高.
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蛇毒膜毒素抗肿瘤机制的研究进展
蛇毒是从毒蛇的毒腺中分泌出来的一种毒液,主要成份为蛋白质和多肽.其中的膜活性多肽(membrane active polypeptide)是一种碱性蛋白,其毒性通过破坏细胞膜而实现,又被称为膜毒素membrane toxin,MT).
