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核定位信号肽在超声靶向微泡破坏介导基因转染中的增强效应
目的：利用超声靶向微泡破坏(UTMD)技术联合核定位信号(NLS)肽促进增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP)入核,提高 UTMD 介导基因的转染效率。方法实验分3组：UTMD+pEGFP 组(A 组)、UTMD+ NLS 肽+ pEGFP 组(B 组)和阳离子脂质体 Lipo3000+ pEGFP 组(C组)。FITC 荧光标记 NLS,核酸染料 Cy3标记 pEGFP,调整 NLS 肽与 pEGFP 不同摩尔比,观测两者佳结合比值。以佳超声辐照参数及 NLS 肽/pEGFP 摩尔比转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)。转染6 h 后,用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜分别评价 Cy3标记质粒的入胞率和入核率。转染48 h 后,用流式细胞仪检测转染效率,CCK8检测细胞存活率,RT-PCR 和 Western 分别检测 mRNA 和蛋白的相对表达量,并比较三组间的差异以评价 NLS 肽在 UTMD 介导基因转染中的增强效应。结果①转染6 h 后,带绿色荧光的 NLS 肽和红色荧光的 pEGFP 均能在细胞同一部位显示且强度信号一致,提示两者相互结合；琼脂糖凝胶电泳示佳 NLS 肽/pEGFP 结合摩尔比为104∶1。②转染6 h 后,A、B、C 三组质粒的入胞率分别为(63±12)%、(80±10)%和(92±8)%,入核率分别为(17±3)%、(50±12)%和(35±8)%,差异均有统计学意义(P 均<0.05),B 组入胞率和入核率分别为 A 组的1.3倍和2.9倍, C 组分别为 A 组的1.5倍和2.1倍。③转染48 h 后,三组细胞活性均>80%,转染效率、mRNA 和蛋白表达的相对量均依次增加,差异均有统计学意义(P 均<0.05),B 组分别为 A 组1.6倍、2.3倍和2.4倍,但仍低于 C 组。结论 NLS 联合 UTMD 能提高 pEGFP 入核率,从而提高转染效率,NLS 肽发挥增强效应为 UTMD 介导转染提供新策略。
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双配体pH敏感阿霉素前药-微泡复合物制备及体外药物释放研究
目的 构建一种双配体pH敏感阿霉素前药-微泡复合物,并研究其在超声辐照下的理化表征及体外释药特性.方法 碳二亚胺法将cRGD肽和叶酸配体连接到肝素上,阿霉素与肝素通过酸敏腙键连接,制备得双配体pH敏感阿霉素前药,再通过生物素-亲和素桥与微泡结合成复合物,检测超声辐照前后复合物的粒径变化 、 形态改变及不同pH介质中的释药特性.结果 紫外分光光度法测定双配体pH敏感阿霉素前药载药量约18.9％(DOX).动态光散射粒径分析(DLS)及透射电镜(TEM)检测发现双配体pH敏感阿霉素前药粒径分布不均一,出现纳米颗粒的聚集现象,粒径较多位于(159.7±24.5)nm处,小部分位于(1089.0±174.9)nm处.复合物经超声作用后粒径分布趋于均匀[平均直径(155.9±29.8)nm,聚合物分散性指数(PDI)0.22],Zeta电位为-(20.6±3.4)mV.体外释药实验表明双配体pH敏感阿霉素-微泡复合物具有良好的pH响应释放特性,在酸性介质(pH=5.0)释放效率要显著高于生理pH环境下(pH=7.4).结论 成功构建一种能在酸性环境下高效释药的双配体pH敏感阿霉素前药-微泡复合物,超声辐照可使复合物分散均匀 、 粒径减小,有助于药物进入肿瘤组织并在肿瘤酸性环境中释放,提高其体内抗肿瘤能力.
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低频超声控释尿激酶缓释系统在大鼠脑出血中的应用研究
目的 研究载尿激酶Pluronic P-105(the urokinase loaded in Pluronic P-105,NP-UK)缓释系统在活体内的控释情况及其对脑出血的治疗效果.方法 制作大鼠脑出血模型,分别用NP-UK和尿激酶注入血肿腔,用低频超声激发,测定脑组织尿激酶含量、脑组织含水量,进行行为学评分、观察脑组织病理学变化.结果 NP-UK非超声组大鼠尿激酶含量缓慢降低,NP-UK超声组大鼠在超声后即刻尿激酶浓度较高,24 h后迅速降低;尿激酶组中尿激酶含量在术后即刻浓度较高,24 h后迅速降低.NP-UK超声组脑组织含水量高峰提前至24 h,且峰值明显降低.行为学评价各组无统计学意义.病理学NP-UK超声组脑水肿程度轻.结论 NP-UK缓释系统在体内是可以利用低频超声满意控释的,并且其溶解颅内血肿的效果比单纯尿激酶要确切.
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肿胀麻醉下行体外超声吸脂术85例分析
肿胀麻醉下行吸脂术为传统的吸脂的方法[1],但为了减少术中出血及术后并发症,1996年Silberg[2]发明了体外超声吸脂术,将超声波通过皮肤使皮下脂肪乳化,既保证了超声能量的作用,又减少了组织的损伤.本文旨在评述体外超声吸脂术在临床的应用.
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超声引导下放置PTCD套针引流管治疗腹部脓肿30例报告
我们自2000年9月～2004年6月应用B超引导下放置PTCD套针引流管治疗腹部脓肿30例,方法简便,疗效满意,报告如下.
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超声引导下经皮肾穿刺造瘘术治疗盆腔肿瘤致梗阻性肾衰竭
目的 探讨超声引导下经皮肾穿刺造瘘术治疗晚期盆腔肿瘤致梗阻性肾衰竭的价值.方法 回顾分析24例晚期盆腔肿瘤致梗阻性肾衰竭超声引导下肾穿刺造瘘治疗前、后尿量及肾功能变化.结果 24例均置管成功.治疗后尿量明显增加,血肌酐明显下降.未发生严重并发症.结论 超声引导下经皮肾穿刺造瘘术治疗晚期盆腔肿瘤致梗阻性肾衰竭具有创伤小、费用低、并发症少的优点,可明显改善肾功能,提高患者终末期的生存质量.
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高强度聚焦超声治疗腹腔盆腔肿瘤134例临床疗效的初步报告
目的研究高强度聚焦超声(high-intensity focused ultrasound,HIFU)治疗中晚期腹腔、盆腔肿瘤或腺体增生症的近期治疗效果和安全性.方法以134例腹腔、盆腔肿瘤的患者作为治疗对象,采用FEPBY01高强度聚焦超声肿瘤治疗系统对靶组织进行超高温(70～100 ℃)治疗,并将恶性肿瘤分成空腔脏器肿瘤和非空腔脏器肿瘤两组进行HIFU疗效统计.结果空腔脏器肿瘤18例,显效率、有效率、无效率分别为27.8%、61.1%、11.1%;非空腔脏器恶性肿瘤83例,显效率12.0%、有效率71.1%、无效率16.9%.结论 HIFU这种局部治疗技术对腹腔、盆腔肿瘤及子宫肌瘤、前列腺增生等不仅有确切疗效、安全且还具有其他治疗手段无法比拟的独特优势.
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超声处理在西药检验中的应用分析
目的:分析和评价超声处理在西药检验中的应用效果.方法:按照药典规定方法和超声波预处理方法分别对5种药品进行实验,并分析和测定不同药品的样品含量,给予科学比较.结果:经药典规定方法和超声波预处理方法实验后,5种样品的测定结果大致相同,相比较而言,超声波预处理方法更为省时省力,操作也更为简单.结论:超声处理应用于西药检验中,具有较精确的检验结果,且能减少检验者的工作强度,具有一定的应用价值.
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痕量血氟测定预处理方法建立
人或动物的血氟含量与摄氟量密切相关,可直接反映机体氟水平,是相对稳定的生物标志物.但是,由于人或动物的正常血氟浓度处于痕量水平,加之现有氟化物测定技术仅能测定游离态氟[1],氟电极所测毫伏值E与氟离子浓度的对数(log C F)不呈能斯特响应,使得样品测定值偏差较大[2].国外研究者曾试用全固态离子电极,倒置平板式电极等方法测定微量血氟,效果尚可,但均需对现有装置作较大改制,难以普及应用[3].为此,本研究引入超声、生物酶消化、酸消化扩散法对血清样品进行系列化预处理,旨在破坏有机质,转化结合氟为易于测定的游离氟,从而提高血氟检出限.结果报告如下.
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超声和微泡超声造影剂介导核因子κB圈套寡核苷酸抗大鼠肝移植后的急性排斥
目的:观察经超声介导的核转移因子κB圈套寡核苷酸作用后大鼠移植肝的肝功能变化、急性排斥的病理情况及受体的生存时间,探讨超声介导的核因子κB圈套寡核苷酸抗大鼠肝移植急性排斥的作用.方法:实验于2005-04/11在南京医科大学第一附属医院动物实验中心完成.①DA大鼠和Lewis大鼠各36只随机分为3组;每组DA大鼠(供体)、Lewis大鼠(受体)各12只,行DA大鼠至Lewis大鼠的原位肝移植.①对照组:对供肝无干预处理.②生理盐水组:生理盐水1 mL+核因子κB圈套寡核苷酸100μg灌注供肝,并在冰水浴中经超声(频率2 MHz)处理1 min.③10%声诺维组:10%声诺维生理盐水1 mL+核因子κB圈套寡核苷酸100 μg灌注供肝,并在冰水浴中经超声(频率2 MHz)处理1 min.④检测各组受体大鼠(n=4)术后第1,4,7天的肝功能(天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转氨酶)变化、病理组织学检查术后第4天移植肝的排斥情况(n=4,按Banff标准进行程度分级,分为0,Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,0级:无排斥证据;Ⅲ级:严重排斥)、统计各组受体大鼠生存率.结果:生理盐水组和10%声诺维组各有1只受体大鼠在术后3 d内死亡,未纳入统计.进入结果分析34只.①肝移植术后各组受体大鼠天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转氨酶术后第1天便有不同程度的升高;10%声诺维组各时间点的天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转氨酶值明显低于对照组和生理盐水组(P＜0.01);对照组和生理盐水组的转氨酶变化差异无显著性.②术后第4天病理组织学检查各组急性排斥情况:10%声诺维组急性排斥较对照组轻(P＜0.05),与生理盐水组比较差异无显著性(P＞0.05).③10%声诺维组肝移植术后受体生存时间较对照组和生理盐水组明显延长(P＜0.01);对照组与生理盐水组之间术后生存时间差异无显著性.结论:超声和微泡超声造影剂介导的核因子κB圈套寡核苷酸处理大鼠移植肝,能够改善术后移植肝功能、减轻术后移植肝的急性排斥反应、延长受体大鼠的术后生存期.
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化疗并用抗癌药物超声雾化吸入治疗晚期肺癌临床观察
目的评价全身化疗联合超声雾化吸入5-氟脲嘧啶在治疗晚期肺癌中的价值.方法65例经细胞学或组织学证实的晚期肺癌,随机分成两组.对照组30例全身化疗用丝裂霉素、长春花碱酰胺和顺铂(MVP)方案,联合组35例用 MVP方案+超声雾化吸入5-氟脲嘧啶.每例患者至少化疗2个疗程.结果联合组中完全缓解(CR)2例,部分缓解(PR)15例,有效率为49%,对照组中CR 0例,PR 11例,有效率为37%.联合组的有效率比对照组高,但差异无显著性(P>0.05) .联合组的临床症状改善有效率86%,对照组50%,两者差异有显著性( P<0.05) .两组的毒副作用大致相同( P>0.05) .结论全身化疗并用超声雾化吸入治疗是一种安全有效的方法,对晚期肺癌可获得一定的疗效.
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超声激活血卟啉对体外培养的人肺癌细胞NCI-446、PLA-801C和PLA-801D的杀伤作用
目的:探讨超声激活血卟啉(HP)对体外培养的人肺癌细胞NCI-446、PLA-801C和PLA-801D的杀伤效应及机制.方法:以HP二盐酸盐为光敏剂,对不同浓度(5、10和20 g·L-1)HP处理的人肺癌细胞NCI-446、PLA-801C和PLA-801D进行超声波声照(实验组),另设细胞对照组不进行HP处理及超声波声照,用MTT法检测细胞活性(A492值),判断HP对肺癌细胞的杀伤作用.选用10 g·L-1HP和NCI-446细胞株进行声动力疗法(SDT),采用流式细胞仪检测HP对细胞周期及凋亡率的影响.结果:人肺癌细胞NCI-446、PLA-801C和PLA-801D各不同浓度HP实验组与对照组比较,细胞活性明显降低,差异有显著性(P＜0.05);NCI-446与PLA-801C、PLA-801D细胞活性比较差异有显著性(P＜0.05),而PLA-801C与PLA-801D比较差异无显著性(P＞0.05).流式细胞术检测结果显示,SDT组发生了G0/G1期生长停顿,凋亡率为(19.224±6.552)%,明显高于对照组[(0.320±0.360)%](P＜0.01).结论:超声激活HP对体外培养的人肺癌细胞NCI-446、PLA-801C和PLA-801D有明确的杀伤效应,其发生机制是通过诱导细胞凋亡.
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超声处理对鲜切马铃薯中营养成分的影响
目的:研究不同超声处理对鲜切马铃薯中的营养成分产生的影响,旨在阐明超声处理技术应用到鲜切马铃薯保鲜的中可行性.方法:分别采用Folin-Ciocaileu比色法、考马斯亮蓝法、直接滴定法、指示剂滴定法、紫外分光光度计法测定总酚、蛋白质、还原糖、可滴定酸和Vc含量.结果:超声处理能够抑制贮藏后期的鲜切马铃薯的总酚升高、有利于还原糖和Vc的保留,而对蛋白质、可滴定酸含量变化的作用效果不明显.其中,25℃下300 Hz超声处理8 min的鲜切马铃薯效果较好.结论:超声处理能有效保持鲜切马铃薯的营养成分.
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超声洁牙及口腔卫生指导在治疗妊娠期龈炎中的作用
目的 研究超声洁治术结合口腔卫生指导在防治妊娠期龈炎中的作用,提出治疗妊娠期龈炎的有效方法.方法 将240名孕妇随机分为治疗组与对照组,各120名.两组均进行良好的口腔卫生指导,治疗组在初诊时给予超声洁治术.检查初诊的牙龈指数和1个月后复诊时的牙龈指数(GI).结果 初诊时治疗组和对照组牙龈指数无明显差异(P＞0.05);复诊时经过洁牙处理后的治疗组和对照组的牙龈指数差异显著(P＜0.05).结论 超声洁治术辅以良好的口腔卫生指导对治疗妊娠期龈炎有良好的效果.
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经脉线高导声状态与筋膜组织结构关系的探讨
目的通过观察于经穴输声后,经脉线出现的高导声状态与筋膜组织结构的关系,探讨经脉物质基础.方法用声测经络技术测定家兔膀胱经体表循行线,在此基础上分层切断皮下组织,记录经脉线导声状态的变化.结果切断皮肤、皮下浅筋膜对经脉线导声状态无影响,切断深筋膜声波传导几乎消失.结论经脉线的物质基础为筋膜组织.
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三七总皂苷胶束状态与超滤分离的相关性
目的 探讨三七Notoginseng Radix et Rhizoma总皂苷胶束状态与超滤分离的相关性.方法 分别以5、10、30、50 kDa超滤膜超滤总皂苷水溶液,考察溶液2种质量浓度(1、5 mg/mL)对总皂苷主要成分三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Rd透过率的影响,以及超声处理对超滤分离特征的影响,并分析成分状态与超滤分离的相关性.结果 与5 mg/mL相比,1 mg/mL溶液中各成分透过率总体提高10％以上;超声处理后,各成分透过率明显上升,差异明显缩小,在1 mg/mL溶液中更显著,趋于以均一多分子缔合态形式存在.随着溶液质量浓度上升,胶束粒径明显增大,总皂苷逐渐向多分子缔合胶束过渡;超声处理后,粒径分布呈下降趋势,在1 mg/mL溶液中更显著.结论 三七总皂苷胶束状态与超滤分离直接相关.超声处理低质量浓度溶液后,可增加其中皂苷类成分的超滤透过率.
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超声波法处理输液用涤纶薄膜
涤纶薄膜在输液生产中直接与药液接触,普遍认为其洁净度是影响输液澄明度的重要原因,因此输液用涤纶薄膜的处理是医院制剂工作的重要环节之一.由于涤纶薄膜具有强烈的抗水性及静电吸附作用,极易吸附空气中的尘埃、微粒、纤维及有机杂质,而且难以去除,涤纶薄膜的处理方法的不同所产生的不同效果将直接影响大输液的澄明度,因而人们对涤纶薄膜的洗涤方法不断进行探索和改进,以求达到简便、快捷、省水、洁净和提高输液澄明度的目的.
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超声控释载尿激酶缓释给药系统的体外实验
目的 应用高分子材料Pluronic P-105,制备载尿激酶缓释给药系统,低频超声(US)控制尿激酶释放.方法 设立对照组与实验组,对照组检测对象为单纯尿激酶溶液,实验组检测对象为载尿激酶P-105缓释给药系统,浓度均为100 kU·L-1.并根据是否应用超声,每组分为超声组和非超声组;实验超声组根据超声时间再分为6组(0 h,1 h,6 h,24 h,48 h,72 h).通过气泡上升法,计算各组尿激酶释放的情况.结果 实验组中,超声应用各时间段内释放的尿激酶量,与同时间段未超声组比较差异非常显著(P<0.01);而非超声时间段内,组间无显著差异(P>0.05).实验组各超声时间段内尿激酶释放量和对照组即刻释放的尿激酶量比较,差异无显著意义(P>0.05).结论 可以制备载尿激酶Pluronic P-105缓释给药系统,超声可控制给药系统释放尿激酶,为高血压性脑出血的微侵袭外科治疗提供一种更为有效的清除残余血肿的方法.
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超声波破碎法在原生质体诱变中的运用
目的改良螺旋霉素的生产菌株-生二素链霉菌，提高其产量。方法以超声破碎法破坏出发菌株的细胞壁，获得该菌的原生质体，在再生培养基上培养后获得的诱变菌，其产螺旋霉素的效价上实现了大面积的提高。结果在参与初筛的菌落中，摇瓶发酵后有38.3%的菌株效价获得提高，范围为1.62%～11.92%，取效价较高的初筛菌株进行复筛，其效价依旧稳定在较高水平，提高范围为5.48%～11.92%(平均提高率为8.73%)。结论本文采用的超声波破碎法制备的原生质体，操作简便，成本低廉，影响因素少等诸多优势。是一种适合国内工业菌种改良的好方法。
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超声波快速石蜡细胞块切片技术在细针穿刺活检中的应用
细针穿刺(fine needle aspiration,FNA)细胞学检查可以对体表及实质器官的肿块作定性及分类诊断,但有局限性,对少见疑难病难以定性和分类,文献报道细胞块切片可一定程度地弥补细胞学诊断的局限性,因在制作细胞块切片过程中可部分恢复原组织结构,其中的微小组织碎片经切片也更清楚地显示其组织学特征,对疾病的病理诊断、分类有一定帮助.
