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酶抑制剂对V79-hCYP2E1-SULT1A1细胞酶依赖性化学诱变的影响
目的:V79-hCYP2E1-hSULT1A1是一个表达人细胞色素P450(CYP)2E1和硫酸基转移酶(Sulfotransferase,SULT) 1A1的重组中国地鼠V79[Chinese hamster lung (V79)cells]细胞系,它对于需有关代谢酶活化的间接诱变剂有基因突变反应;为观察单个酶的作用,需要建立对细胞中任一酶特异抑制的模型.方法:以细胞Hprt位点的正向突变为试验终点,N-二甲基亚硝胺(N-Nitrosodimethylamine,NDMA)和2-硝基丙烷(2-Nitropropane,2-NP)为依赖CYP2E1和SULT1A1的间接诱变剂,观察CYP抑制剂反式二氯乙烯(Trans-1,2-dichloroethylene,DCE)和1-氨基苯并三唑(1-Aminobenzotriazole,ABT)、SULT1抑制剂槲皮素和五氯酚(Pentachlorophenol,PCP)对上述间接诱变剂作用的影响.结果:在一定浓度下,ABT抑制NDMA的诱变率达99％而不影响2-NP的作用,DCE对其抑制仅达55％且对2-NP的细胞毒性有明显加强作用.槲皮素和PCP抑制2-NP的诱变率达63％和98％,且都对NDMA的作用无影响.结论:ABT和PCP可完全且特异地抑制该细胞中CYP2E1和SULT1A1依赖的诱变反应,此模型对于探讨遗传毒物的代谢活化有可靠价值.
关键词： 基因重组细胞 CYP2E1 Hprt位点 酶抑制剂 转硫酸基酶(SULT)1A1 -
昆明山海棠对人白血病细胞HPRT位点的影响
目的:研究昆明山海棠对人白血病细胞HL-60 HPRT位点的影响.方法:用THH水溶液对HL-60细胞进行浓度梯度染毒,不同时间点进行单细胞微孔接种,计数阳性克隆,测定接种存活率、克隆效率和突变频率.结果:THH染毒细胞的突变频率,在处理剂量3.35～20.10 mg/ml范围内,具有明显的剂量-反应关系.但随着THH的浓度增高至33.50 mg/ml组,由于细胞存活率太低,细胞数不够后接种要求,不能继续进行.这一现象可能与THH的细胞毒性有关.结论:THH对HL-60细胞具有肯定的致突变性,但只是在一定的剂量范围内遵循剂量反应规律.
