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Dehtal文献资料
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构建siRNA慢病毒载体调控人牙髓干细胞Delta1表达的实验研究
目的 构建Notch配体Dehal基因慢病毒干扰载体及建立Dehal基因稳定干扰的人牙髓干细胞系.方法 将Dehal基因特异性siRNA靶序列与双酶切慢病毒载体pGCSlL-GFP连接,转化,挑取阳性克隆进行PCR鉴定;利用包装细胞293T获得重组的慢病毒,感染人牙髓干细胞,分为DPSCs/Dehal-RNAi组、DPSCs/vector组和DPSCs/wt组;RT-PCR和Western blot分别检测Dehal mRNA及蛋白的表达.结果 经PCR和DNA测序鉴定,成功构建Deltal特异性siRNA的慢病毒载体,并感染牙髓干细胞;经检测DPSCs/Deltal-RNAi组Deltal mRNA及蛋白表达较DPSCs/vector组和DPSCs/wt组明显降低,DPSCs/vector组和DPSCs/wt组之间无明显差异.结论 通过成功构建的Dehal特异性siRNA慢病毒载体对人牙髓干细胞的转染实现了对其Deltal mRNA和蛋白的调控.
