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金黄色葡萄球菌的多重耐药转运蛋白NorA
金黄色葡萄球菌的NorA蛋白是一种跨膜多重药物外排蛋白,介导了金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮类药物的耐药.NorA蛋白属于细菌转运系统中的主要易化族类,由位于染色体上的norA基因编码.norA基因大小约为1.8kb,编码388个氨基酸构成的多肽.NorA蛋白富含疏水性氨基酸,可能构建了亲水性氟喹诺酮类药物的膜相关性活性外排泵,主要介导了亲水性氟喹诺酮类药物从细胞中主动排出,研究认为这主要是由于膜上NorA蛋白数量的增加造成的.目前norA超水平表达的调控机制尚不清楚,部分人认为是norA基因多处位点或(和)启动子区域发生突变,影响了norA的表达.已证明利血平、维拉帕米和5'-methoxyhydnocarpin等是NorA外排蛋白的抑制剂,能增强亲水性氟喹诺酮类药物的抗菌活性,降低耐药率.
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金黄色葡萄球菌NorA蛋白免疫检测方法的建立
目的建立金黄色葡萄球菌耐药转运蛋白NorA免疫检测方法.方法利用琼脂稀释法测定诺氟沙星(NFLX)对临床分离的6株金葡菌和标准菌株ATCC25923的MIC.对norA基因进行克隆、表达,提取表达产物包涵体,并进行了纯化.将纯化的表达蛋白作为免疫原免疫家兔,获取NorA蛋白的抗体血清.利用制得的抗体通过Western blotting检测临床分离的6株金葡菌的NorA蛋白表达水平.结果氟喹诺酮类药物耐药水平较高的临床分离金葡菌菌株的NorA蛋白表达水平一般较高,敏感菌株的耐药水平较低且接近.结论免疫检测方法可用于检测金葡萄菌耐药转运蛋白NorA的表达水平.