首页 > 文献资料
-
中间普氏菌致蜕膜炎症诱导孕鼠死胎模型研究
目的：研究牙周病常见的条件致病菌中间普氏菌（Pi）致蜕膜炎症引发C57BL/6孕鼠死胎的动物模型的建立方法，初步分析蜕膜炎症部位炎症相关基因表达水平。方法经尾静脉注射5×106 CFU Pi（ATCC25561）至孕15~16日雌鼠体内，分别在12、24和48 h后处死小鼠后解剖，剥离胎鼠胎盘组织，其中部分胎盘组织分离为蜕膜组织和非蜕膜胎盘组织，用于后续实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测10种细胞因子和7种信号通路关键分子的mRNA表达水平。另外，两种对照组分别是尾静脉注射大肠埃希氏菌（E.coli）JM109（E.coli组）和磷酸盐缓冲液（PBS组），尾静脉注射Pi为实验组（Pi组），注射后48 h后处死孕鼠，计数胎鼠数量和死亡胎鼠数量，比较胎鼠死亡率。采用独立样本t检验分析细胞因子、信号分子的mRNA表达水平差异。卡方检验分析Pi组和E.coli组、PBS组之间孕鼠体内胎鼠死亡率的差异。结果静脉注射Pi（5×106 CFU）、E.coli（5×106 CFU）和PBS 48 h后导致孕鼠的胎鼠死亡率分别为39.2%、3.0%和0%，实验组死亡率均显著高于对照组死亡率（Pi组vs. E.coli组：χ2=17.54，P＜0.001；Pi组vs. PBS组：χ2=21.49，P＜0.001）。实时荧光定量PCR检测结果显示，与PBS组相比，Pi组胎盘组织内细胞因子白细胞介素（IL）?1α、IL?1β、肿瘤坏死因子α（TNF?α）、IL?6、粒细胞集落刺激因子（GCSF）、人IL?8同系物（KC）和信号分子环氧化酶2（COX2）、核因子κB （NF?κB）、髓样细胞分化因子88（MyD88）、Toll样受体4（TLR4）至少在注射24 h后mRNA表达水平显著升高（均P＜0.05）。而干扰素γ（IFN?γ）、IL?12、IL?18、IL?10、前列腺素E合成酶（PGES）、COX1、诱导白细胞介素B的TIR相关区域接受蛋白（Trif）差异无统计学意义。进一步比较胎盘内蜕膜和非蜕膜组织IL?1α、IL?1β、TNF?α、COX2的表达水平证实炎症发生主要位于胎盘内蜕膜组织。结论牙周病常见的条件致病菌Pi静脉注射可导致孕鼠出现死胎，潜在机制与蜕膜部分的急性炎症关系密切。
-
米非司酮对人早孕绒毛及蜕膜中骨桥蛋白、绒毛膜促性腺激素-β和p53蛋白表达的影响
目的 探讨米非司酮对早孕绒毛及蜕膜中骨桥蛋白、绒毛膜促性腺激素-β和p53蛋白表达影响.方法 米非司酮组:20例停经5～7周,药流完全的早孕女性.对照组:同期20例相同孕周手术流产女性.流产后即刻取绒毛、蜕膜.采用免疫组织化学半定量法检测其骨桥蛋白、绒毛膜促性腺激素-β和p53的表达情况.结果 ①米非司酮组的骨桥蛋白表达显著低于对照组 (P＜0.01);②米非司酮组的绒毛膜促性腺激素-β表达显著低于对照组 (P＜0 .01);③米非司酮组的p53蛋白表达显著高于对照组 (P＜0.01).结论 米非司酮终止早孕的机制可能与绒毛及蜕膜的骨桥蛋白和绒毛膜促性腺激素-β表达下调、p53蛋白表达上调有关.
关键词： 米非司酮 骨桥蛋白 绒毛膜促性腺激素-β P53蛋白 蜕膜 -
米非司酮对人早孕期绒毛及蜕膜中骨桥蛋白和p53蛋白表达的影响
目的 探讨米非司酮对人早孕期绒毛及蜕膜中骨桥蛋白(OPN)和p53蛋白表达的影响.方法 选取2006年3月-2006年6月在海军总医院妇产科自愿要求终止妊娠(停经5～7周)的40例健康早孕妇女,随机分为米非司酮组(药流组)和对照组<手术流产组),每组20例.流产后取绒毛及蜕膜,并采用免疫组织化学半定量法检测OPN和p53的表达情况.结果 对照组绒毛和蜕膜组织中OPN呈强阳性表达,平均光密度(A)值分别为0.245±0.005和0.130±0.008;米非司酮组则呈弱阳性表达,A值分别为0.144±0.006和0.080±0.007,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05).对照组绒毛和蜕膜组织中p53呈弱阳性表达,A值分别为3.600±0.110和1.360±0.510,米非司酮组则呈强阳性表达,A值分别为8.720±0.160和2.900±0.810,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 米非司酮终止早孕的机制可能与绒毛及蜕膜的OPN表达下调,p53蛋白表达上调有关.
-
妊娠期高血压疾病患者外周血和蜕膜Th1/Th2失衡的研究
目的 研究妊娠期高血压疾病患者外周血和蜕膜组织中CD4+T辅助细胞(Th1)和(Th2)细胞免疫反应的变化,探讨Th1/Th2比率失衡在妊娠期高血压疾病发生中的作用.方法 选取住院分娩的子痫前期(PE)患者25例(子痫前期组,包括轻度10例和重度15例),妊娠期高血压患者10例,同期住院分娩的正常孕妇12例和自愿参与实验的年龄匹配的健康未孕妇女12例作为对照组,治疗前抽取各组实验对象空腹肘静脉抗凝血0.5ml送流式检验Th1,Th2细胞百分比及Th1/Th2比率.三组孕妇均于剖宫产术胎盘娩出后,立即搔刮子宫腔取蜕膜制成单细胞悬液,分离离心收集淋巴细胞送流式检验Th1,Th2细胞百分比及Th1/Th2比率.结果 ①子痫前期组外周血Th1细胞百分比(16.18±3.93)%高于其它各组(P＜0.01),PE患者Th1/Th2细胞比率(16.75±3.84)均高于其余各组(P＜0.05).②子痫前期组蜕膜组织中CD4+T细胞中Th1百分比(37.83±12.04)%显著高于其它各组(P＜0.001),妊娠期高血压患者蜕膜组织中Th1细胞百分比(16.30±5.36)%也高于正常妊娠妇女(11.79±4.61)%(P＜0.05).PE患者Th1/Th2比率(26.70±9.40)显著高于其余各组(P＜0.001),重度PE组(30.11±10.42)高于轻度PE组(21.59±4.25)(P＜0.05);妊娠期高血压患者Th1/Th2比率(13.13±5.62)也高于正常妊娠妇女(7.61±4.63)(P＜0.05).结论 子痫前期患者体内存在着免疫失衡现象.Th1/Th2细胞平衡向Th1漂移,Th2受抑制可能是妊娠期高血压疾病(包括子痫前期和妊娠期高血压)发生的重要原因.
-
IL-18在复发性流产患者蜕膜和绒毛组织中的表达
目的 探讨IL-18在复发性流产(RSA)患者蜕膜和绒毛组织中的表达,研究IL-18与RSA的关系.方法 选取20例RSA患者和20例正常妊娠要求人工流产患者,采用免疫组化法分别检测两组患者蜕膜和绒毛组织中IL-18表达.结果 ①两组患者蜕膜组织中均有IL-18表达,RSA组主要表达于蜕膜间质细胞胞浆中,对照组主要表达在蜕膜腺体细胞胞浆中,两组中表达强度无统计学意义(P＞0.05).②两组患者绒毛组织中均有IL-18表达,均主要表达在细胞滋养细胞和合体滋养细胞胞浆中,RSA组中表达高于对照组(P＜0.01).结论 ①复发性流产患者蜕膜和绒毛组织中均有IL-18的表达.②RSA的发生可能与患者绒毛组织中IL-18的表达升高有关.
-
药物在中期引产中的观察与护理
随着诊断技术的不断提高,药物在引产中已被广泛应用.米非司酮是作用于受体水平的新型抗孕酮药物,具有强烈的抗孕激素活性,与内源性孕酮竞争结合受体,使蜕膜、绒毛组织变性,LH下降,黄体溶解,胚囊坏死[1].近期我们应用于中期妊娠引产获得成功,现总结报告如下:
-
青蒿琥酯对大鼠孕酮、雌二醇和蜕膜组织的影响
目的研究青蒿琥酯对妊娠大鼠血清孕酮和雌二醇含量及蜕膜组织的影响，以探讨其终止妊娠机理。方法采用放射免疫分析法(RIA)、HE染色和人蜕膜细胞体外培养等方法。结果青蒿琥酯40 mg*kg-1*5 d可使妊娠大鼠血清孕酮水平显著下降(P<0.05)；雌二醇有下降趋势，肿瘤坏死因子水平则有上升趋势；整体水平能损伤蜕膜组织乃至胎盘；对体外培养的人蜕膜细胞有直接杀伤作用，其LC50为(25±3) mg*L-1。结论青蒿琥酯能使血清孕酮含量下降并损伤蜕膜和胎盘而使胚胎坏死、吸收而终止妊娠。
-
青蒿琥酯对孕体组织的损伤
为了探讨青蒿琥酯(Art)对胚胎发育的影响,作者观察了Art对体外培养人蜕膜细胞存活率的影响,并选用SD大鼠用DTNB直接法和TBA法测定胚胎和胎盘组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量. 结果表明,二氢青蒿素对体外培养的人蜕膜细胞有直接杀伤作用,其LC50为(25.2±3.5)mg*L-1. 大鼠于妊娠d 6～10 sc Art,末次给药后24 h,胚胎中GSH-Px活性显著降低,MDA含量显著升高(P<0.05),并使胎盘中GSH-Px活性非常显著升高(P<0.01). 结果提示,Art能直接损伤蜕膜,破坏胚胎和胎盘的抗氧化系统的平衡状态,造成胚胎和胎盘组织的氧化损伤,终导致胚胎吸收.
-
寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜组织膜联蛋白A2表达的影响
目的 探讨寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜组织膜联蛋白A2(annexin A2)表达的影响.方法 品系CBA/J的雌性小鼠与品系BALB/C雄性小鼠交配建立正常妊娠模型,品系CBA/J的雌性小鼠与品系DBA/2雄性小鼠交配建立复发性流产模型,将复发性流产模型孕鼠按怀孕先后顺序随机分为4组:模型组、寿胎丸高剂量组、寿胎丸中剂量组和寿胎丸低剂量组,从妊娠第1天开始灌胃给药,至孕14 d处死小鼠,采用免疫组化与蛋白印迹方法检测各组孕鼠蜕膜组织annexin A2的表达强度.结果 模型组与正常组相比,蜕膜annexin A2表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01);寿胎丸高、中、低剂量组与模型组相比,蜕膜annexin A2表达均升高,差异有统计学意义(P＜0.01);寿胎丸高剂量组蜕膜annexin A2表达较中、低剂量组明显升高(P＜0.01).结论 通过上调复发性流产小鼠蜕膜组织annexin A2的表达,从而维持妊娠,这可能是寿胎丸安胎的作用机制之一.
-
胚胎停育患者蜕膜和绒毛组织中B淋巴细胞刺激因子的表达及意义
目的 探讨胚胎停育患者蜕膜和绒毛组织中B淋巴细胞刺激因子(BAFF)的表达与胚胎停育的关系.方法 随机选择早孕胚胎停育患者30例作为实验组,正常早孕人工流产者30例为对照组.用免疫组化(二步法)法测定蜕膜及绒毛中BAFF的表达情况.结果 BAFF在所有标本中都有表达,但胚胎停育组蜕膜中BAFF的表达均低于对照组(P＜0.05),胚胎停育组蜕膜血管内皮中则无表达.结论 BAFF与胚胎停育有一定的关联,可能是导致胚胎停育的原因之一.
-
NK细胞与早发型重度子痫前期疾病进展的相关性研究
目的：探讨自然杀伤细胞( natural killer cell, NK)与早发型重度子痫前期发生、发展的相关关系。方法选取2012年1月至2014年12月在北京潞河医院定期孕检的重度子痫前期患者44例(早发型重度子痫前期20例,晚发型重度子痫前期24例)为研究对象。选取同时期正常无合并症的患者20例为对照组。采集母亲外周血2 mL,胎儿脐带血2 mL及蜕膜组织。采用流式细胞学方法检测外周血和脐带血中的CD3－CD16－CD56＋的百分率；蜕膜组织应用免疫组织化学方法,计算CD3－CD16－CD56＋的数量取均值,应用计算机图像分析法读取CD56＋细胞平均灰度值。结果重度子痫前期组外周血、脐血、蜕膜组织中的NK细胞数量高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)；早发型重度子痫前期组脐血、蜕膜组织中NK细胞数量高于晚发型重度子痫前期组,差异有统计学意义(P<0.05)。重度子痫前期外周血、蜕膜组织中的NK细胞数量与病程进展呈负相关(r＝－0.397,P＝0.040；r＝－0.391, P＝0.044),与血压升高幅度呈正相关(r＝－0.597,P＝0.001；r＝－0.416, P＝0.031)。蜕膜组织中的NK细胞数量与确诊重度子痫前期的孕周呈负相关(r＝－0.594,P＝0.003)。结论重度子痫前期患者外周血、脐血、蜕膜中NK细胞数量增加,早发型重度子痫前期增加更为显著。外周血、蜕膜中NK细胞数量与早发型重度子痫前期的发生、发展相关。
-
药物流产后子宫刮出物的组织病理学和免疫细胞化学研究
为探讨药物流产后阴道出血和子宫内膜中胎盘残留组织的关系,用组织病理学和免疫细胞化学方法,对药物流产后刮出组织(20例)和正常流出组织(10例)进行了研究.组织病理学显示:刮出内膜组织中都含有残留蜕膜组织,后者多数蜕膜细胞变性坏死,蜕膜和内膜都有大量炎性细胞浸润,并具有不同步发育的腺体和间质.免疫细胞化学方法显示:正常流出或刮出组织的毛细血管内皮因子Ⅷ相关抗原和胎盘碱性磷酸酶(PALP)呈阳性反应.残留的蜕膜组织中可见结构和功能正常的毛细血管.提示:子宫内膜中的炎细胞浸润,内膜不同步发育,残留蜕膜的某些部位因正常血液供应而继续生长,可能是药物流产后出血的原因.
-
绒毛和胎盘中Jagged-1/Jagged-2的表达与蜕膜中CD56+NK表达相关性探讨
目的：探讨绒毛和胎盘中Jagged-1/Jagged-2的表达与蜕膜中CD56+NK表达相关性情况。方法分析该院2013年3月—2014年2月收治的妊娠期流产对象42例和正常剖宫产30例的临床资料，对Jagged-1、CD56+NK细胞和Jagged-2应用免疫组化方法检测，通过对其测定的情况。结果胎盘组Jagged-1高于绒毛组，Jagged-2低于绒毛组，自然流产组Jagged-1、Jagged-2及CD56+的表达均低于人工流产组, CD56+NK细胞和绒毛组织中的Jagged-1阳性细胞表达水平、Jagged-2阳性细胞表达水平均呈现明显正相关性，差异有统计学意义（r=0.91,0.95，P<0.05）。结论 Jagged-1、Jagged-2对NK细胞表型的变化可能两者一起参与，因而对妊娠结局造成影响，并且形成妊娠免疫耐受。
-
前列腺素受体亚型FP-V2与早孕药物流产结局的分析
目的 比较FP、FP-V1和FP-V2在完全流产患者与不完全流产患者早孕蜕膜中mRNA的表达差异.方法 选取2013年6月～2015年3月辽宁省计划生育科研院门诊主动要求药物流产终止正常妊娠的50例患者作为研究对象,根据流产是否完全分为完全组(30例)和不完全组(20例).采用实时定量PCR方法检测两组早孕蜕膜中FP、FP-V1和FP-V2的表达差异.结果 不完全组早孕蜕膜中的FP和FP-V2的mRNA表达显著高于完全组,差异有统计学意义(P＜0.05).两组的FP-V1表达比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 人早孕蜕膜FP-V2 mRNA高表达可能与不完全流产相关.
-
芳香烃受体与复发性流产的相关性分析
目的 分析不同组织中芳香烃受体(AHR)与人绒毛膜促性腺激素(HCG)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的相关性,探讨AHR与复发性流产(RSA)的关系.方法 选取2016年12月～2017年3月在山西医学科学院妇产科门诊就诊的30例RSA患者为研究组,正常早孕要求行人工流产的30例患者为对照组,取每例患者的外周血、绒毛、蜕膜组织,检测每例患者血清中的AHR、HCG、E2、P水平,绒毛及蜕膜组织中的ER、PR水平,进行统计学分析.结果 研究组患者绒毛、蜕膜中的AHR水平明显高于对照组(P＜0.05),两组的血清AHR水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).研究组患者的血清HCG、P、E2水平明显低于对照组(P＜0.05).研究组绒毛及蜕膜组织中的ER、PR水平明显低于对照组(P＜0.05).血清中AHR与HCG、P、E2无相关性,绒毛及蜕膜组织中AHR与相应部位ER、PR无相关性.结论 人体中AHR的增高可能会导致RSA,尤其是局部组织绒毛及蜕膜中AHR的升高,ER、PR的表达量减少也是导致复发性流产的原因,但AHR的升高与ER、PR之间无联系,AHR升高既不会通过ER、PR影响妊娠结局,ER、PR也不会影响AHR的升高,AHR可能直接或者通过其他路径影响着妊娠结局.
-
米非司酮配伍米索前列醇终止10～14周妊娠疗效及护理体会
米非司酮是一种新型甾体抗孕激素药物,经过临床验证,它具有抗孕卵着床,阻胚胎发育,使蜕膜和绒毛变性.米索前列醇具有刺激宫底收缩,软化宫颈的作用.两种药物配伍,使胚囊及绒毛球坏死,变性排出宫腔外.我院2001年1月至2002年1月,对于310例10～14周妊娠的妇女,应用米非司酮配伍米索前列醇终止妊娠,取得良好效果.现将临床疗效及护理体会介绍如下:
-
转化生长因子-β对人早孕母胎界面中吲哚胺2,3-双加氧酶基因表达的调控研究
目的 探讨吲哚胺 2,3-双加氧酶 (indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO) 和转化生长因子-β(Transforming Growth Factor Beta,TGF-β)在母胎界面的表达及其相关性,分析 TGF-β对IDO表达的调节作用. 方法 Western blot方法检测正常妊娠绒毛及蜕膜组织中TGF-β和IDO蛋白的表达. 结果 IDO及TGF-β蛋白同时表达于正常妊娠绒毛和蜕膜组织中;TGF-β与IDO蛋白表达呈正相关(r1=0.59,P1<0.05;r2=0.74,P2<0.05).结论 在生理妊娠状态下,母胎界面中TGF-β通过正性调节IDO的表达,参与妊娠免疫耐受的调节.
-
Fas/FasL系统在RSA患者蜕膜与绒毛组织的表达及临床意义
目的 探讨反复自然流产患者蜕膜与绒毛组织Fas/fasL的表达和研究其临床意义.方法 采用免疫组化法检测33例反复自然流产患者绒毛组织Fas/FasL的表达水平,并以30例健康早孕组为对照.结果 反复自然流产患者蜕膜与绒毛组织FasL低于对照组,数据经统计学比较具有显著差异(P<0.05),蜕膜组织Fas数据经统计学比较具有(P>0.05),而绒毛组织却无显著差异.结论 反复自然流产患者蜕膜与绒毛组织的Fas/FasL失衡可能是反复自然流产的原因之一,需加以重视.
-
药物流产不全215例彩色多普勒超声检查结果分析
药物流产操作简单,痛苦少,容易被米索前列醇配伍方案完全流产率达90%以上,但随着流产次数增多,流产后出血时间长和潜在的感染或大出血等危险不容忽视.绒毛或蜕膜组织残留可造成子宫收缩不良,是药物流产后阴道出血时间长的主要原因[1].宫内残留还可以引起宫内感染,甚至导致绒癌发生,及时准确的诊断是采取相应治疗措施的关键.我院依据彩色多普勒超声(TVS-CD)检查结果判定药流后阴道持续少量出血是否需要行清宫术,效果较好.
-
白细胞介素-10在反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达
目的：研究白细胞介素-10（IL-10）在反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达情况。方法应用免疫组织化学染色和图像分析技术，分别对30例反复自然流产患者（实验组）和30例正常妊娠者（对照组）绒毛和蜕膜组织中的表达进行定位和半定量分析。结果免疫组织化学显色显示，在绒毛组织中IL-10蛋白定位于滋养层的细胞质内，且实验组的IL-10蛋白表达明显低于对照组（P＜0.01）；在蜕膜组织中IL-10蛋白定位于蜕膜细胞和腺上皮细胞的细胞质内，且实验组的IL-10蛋白表达明显低于对照组（P＜0.01）。结论实验组绒毛和蜕膜组织中IL-10蛋白的低表达与反复自然流产有关，可能参与反复自然流产的病理过程。
