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痰结核杆菌DNA扩增对肺结核疗效监测
目的:探讨聚合酶链反应痰结核杆菌DNA扩增在监测肺结核治疗效果中的作用。方法:收治肺结核患者50例为观察组,同时选择32例其他肺部疾病患者为对照组,其中肺炎10例、肺癌10例、支气管扩张12例,所有患者行聚合酶链反应检查,调查疾病疗效监测效果。结果:在两组患者中,72例患者的痰涂片与痰聚合酶链反应结果相同,符合率87.8%,两组比较,差异不存在统计学意义(P>0.05)。在观察组,2例患者在随访第12个月痰聚合酶链反应复发阳性,第14个月痰涂片复发阳性。结论:聚合酶链反应能够对肺结核患者的疗效进行监测,敏感度非常高,其检查结果与痰涂片符合率非常高。
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DNA扩增技术在接触性检材检验中的应用研究
目的:应用DNA扩增技术检验基础性材料,以构建DNA生物检验方法.方法:采用擦拭、剪取等方法对接触性材料进行取样,同一种材料采用三种方法进行检测,分别为DNA扩增法、QIAGEN硅膜提取法、Chelex-100提取法,比较三种方法检测结果的有效性.结果:DAN扩增技术在不同材料中的检出基因型均为单一来源,分别对5种材料多处去电进行扩增,DNA扩增法对各种接触性材料的成功率均高于QIAGEN硅膜提取法、Chelex-100提取法,QIAGEN硅膜提取法的成功率又高于Chelex-100提取法,组间差异具有统计学意义(P<0.05).结论:DNA扩增技术对接触性材料具有较高的敏感性,是接触性材料检验的可靠方法.
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DNA扩增制备探针并用于临床白色念珠菌感染鉴定
目的应用聚合酶链反应技术扩增特异DNA片段,并制备成为可应用于临床鉴定白色念珠菌的基因探针. 方法采用聚合酶链反应技术特异地扩增白色念珠菌标准株DNA EO3 125 bp基因片段,然后用半抗原地高辛配基标记,在完成基因探针显色敏感度检测之后,应用该基因探针分别对血液病病房分离的白色念珠菌、热带念珠菌及大肠埃希菌等多种细菌进行斑点杂交测试. 结果基因扩增制备Dig-125 bp DNA探针显色敏感度为0.01 pg,具有白色念珠菌特异性,与其他念珠菌和细菌不发生杂交. 结论基因扩增制备EO3 125 bp DNA探针方法简便可靠,具有很强特异性,可应用于临床鉴定白色念珠菌感染.
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无抗生素质粒DNA扩增系统的探讨
质粒DNA疫苗在很多方面克服了传统疫苗和病毒载体疫苗的缺陷,本文对无抗生素质粒DNA扩增系统发展现状进行作一简要概述.
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560例病人血清标志物检测分析
为了掌握我县农村人群乙型肝炎病毒的感染情况,我们对2000~2001年来我院检验门诊就诊并确定其HBsAg阳性者进行了血清乙肝5项指标及HBV-DNA的检测,旨在为临床提供一个准确可靠的数据资料.
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依赖热稳定解旋酶DNA恒温扩增技术检测烟曲霉
目的:探讨分析依赖热稳定解旋酶DNA恒温扩增技术检测烟曲霉;方法:将烟曲霉基因作为目的片段,以此设计特异度引物,并且在恒温条件下建立快速检测烟曲霉依赖热稳定解旋酶DNA恒温扩增技术,进行特异度和灵敏度实验,并与普通聚合酶链式反应(PCR)方法进行比较.结果:热稳定的依赖解旋酶恒温核酸扩增(tHDA)产物序列与EnsemblFungi数据库的序列相似率高达95%;在特异度检测中,黄曲霉的电泳结果为阳性,在100 bp处能够观察到清晰的条带;在灵敏度检测中,不同稀释浓度均能够明显观察到条带;结论:烟曲霉的tHDA检测方法具有普通PCR的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求低,普通水浴槽即可进行反应.
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幽门螺杆菌CagA对胃癌HER-2拷贝数和表达的影响
目的:旨在阐明感染幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)者CagA含量是否影响HER-2蛋白表达,以评估CagA和HER-2扩增在胃癌中的意义.方法:首先分析AGS、MKN1和HFE-145中CagA表达情况对HER-2的影响,再用免疫组化检测HER-2表达情况.结果:AGS,MKN1和HFE-145细胞中异位CagA表达显示HER-2表达显著增加.免疫组化中示胃癌中HER-2过表达.结论:HP中CagA诱导HER-2蛋白的过量表达.
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碱基序列直接测序基础上的HLA-DNA分型方法的研究进展
20世纪90年代以来DNA扩增、DNA纯化和人类基因成果对HLA领域的渗透,使得碱基序列测序方法(sequence basedtyping,SBT)成为一种可直接阅读HLA系统复杂性的基因物质的佳技术,并在器官移植、人类遗传学、疾病关联等研究方面被认为是HLA基因分析的金标准.就近年来SBT对HLA-DNA分型及其意义的研究进展作一综述.