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pVAX-HsP70-HSV2gD DNA疫苗阳离子脂质体的制备
目的 制备pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗阳离子脂质体,为基因免疫和基因治疗寻找一种简单、经济、有效的DNA投递系统.方法 采用逆向蒸发法,用卵磷脂、胆固醇、十八胺制备成阳离子脂质体包封pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗,在透射电镜下观察脂质体颗粒的大小,应用紫外分光光度计检测DNA疫苗的包封率,免疫组化检测其转染真核细胞的效果.结果 制备的脂质体呈圆形、粒径大小较一致,平均粒径为580 nm,DNA疫苗脂质体包封率达到50%～55%,能有效转染真核细胞.结论 成功制备了pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗阳离子脂质体.该方法作为提高基因免疫效果的简单、经济、有效的手段之一,为其进一步的研究打下了基础.
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单纯疱疹病毒2型对小鼠树突状细胞体外影响的研究
目的探讨单纯疱疹病毒2型(HSV-2)对小鼠树突状细胞(DC)存活率、形态学及分泌白介素12(IL-12)的影响.方法用HSV-2感染小鼠DC系,倒置显微镜观测其形态学的变化,台盼蓝染色计数细胞存活率.HSV-2感染和/或LPS刺激后,ELISA法检测DC分泌IL-12的变化.结果 HSV-2感染3天后,小鼠DC树突回缩,变圆,细胞间间隙增大,存活率迅速降至79.73%,至7天后存活率仅为31.53%,均低于对照组(P均<0.05).HSV-2感染后能抑制LPS刺激DC IL-12的分泌(P<0.05).结论 HSV-2感染后,DC树突回缩,存活率降低,分泌IL-12功能受损,均不利于对HSV-2的免疫应答.
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定量PCR和间接免疫荧光法联合检测生殖器疱疹病毒感染
目的 研究间接免疫荧光法(IIF)检测生殖器HSV感染的敏感性和特异性。方法 以定量PCR为对照，用HSV型共同性糖蛋白单克隆抗体为夹心的IIF法，检测了94例临床诊断为生殖器疱疹的患者皮疹中的HSV。结果 IIF法检测HSV的敏感性为74.12％，特异性为55.60％；总阳性率(71.30％)明显低于定量PCR法的阳性率(90.40％)(P＜0.05)；但两种方法检测GH患者皮水疱内的HSV阳性率无明显差异(86.20％vers.97.00％)，而检测糜烂性皮疹内的HSV时，PCR法的阳性率高于IIF法(P＜0.05)。结论 IIF法具有简单、快捷的优点，适用于检测早期可疑GH患者皮疹内HSV，有临床实用价值。
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HSV-1型感染所致原发性生殖器疱疹1例
患者女,22岁.外阴红肿糜烂伴疼痛3天.皮疹累及口腔及右侧乳头.单纯疱疹病毒抗体:HSV-1 IgG(-)、HSV-1 IgM(-)、HSV-2 IgG(-)、HSV-2 IgM(-);外阴溃疡处行PCR检测:HSV-1 DNA(+),HSV-2 DNA(-).结合临床及实验室检查确诊原发性生殖器疱疹(HSV-1型),予伐昔洛韦抗病毒等对症治疗,取得满意疗效,随访半年未见复发.
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疑似生殖器疱疹1312例HSV基因检测结果分析
目的 了解海口地区疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒(HSV)感染情况.方法 用核酸PCR-荧光探针法对本院1 312例疑似生殖器疱疹患者进行HSV-1/2型基因检测.结果 1 312例疑似生殖器疱疹患者中,HSV-1型阳性22例,阳性率1.68％ (22/1 312),HSV-2型阳性621例,阳性率47.33％ (621/1 312),单纯疱疹病毒阳性共643例,阳性率49.01％ (643/1 312),无合并感染者.643例HSV阳性患者,有典型临床症状(溃疡、结痂、水疱等)426例,占66.25％;无症状217例,占33.75％.HSV-1型阳性率与HSV-2型阳性率比较,差异有统计学意义(P＜0.01).643例单纯疱疹病毒感染者中,男465例,阳性率49.47％ (465/940),女178例,阳性率47.85％ (178/372),男女阳性率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 海口地区疑似生殖器疱疹患者HSV阳性检出率高,感染有型别差异,以HSV-2为主.无症状HSV感染者占1/3,提示临床应重视对疑似生殖器疱疹患者进行HSV基因检测,避免误诊漏诊.HSV感染率无性别差异.
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宫颈糜烂患者单纯疱疹病毒Ⅱ型感染情况分析
目的 探讨宫颈糜烂患者单纯疱疹病毒(HSV-Ⅱ)感染情况.方法 用实时荧光定量PCR法对212例受试者宫颈棉拭子中HSV-Ⅱ进行检测.结果 162例宫颈糜烂患者中,HSV-Ⅱ阳性率为29.01％(47/162),50例正常对照组中,HSV-Ⅱ阳性率为10.00％(5/50),两组差异有统计学意义(P＜0.05).Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ度宫颈糜烂患者HSV-Ⅱ阳性率分别为19.64％(11/56),27.78％(15/54)和40.38％(21/52),提示宫颈糜烂程度与HSV-Ⅱ的阳性率呈正相关(r=0.186,P＜0.05).结论 HSV-Ⅱ感染与宫颈糜烂密切相关,且随宫颈糜烂程度的增加,HSV-Ⅱ感染率增加.应加强对宫颈糜烂患者HSV-Ⅱ的检测.
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性病门诊836例患者单纯疱疹Ⅰ,Ⅱ型检测结果分析
目的 探讨性病专科门诊患者中HSV-Ⅰ,Ⅱ型病毒的感染情况及在典型和非典型生殖器疱疹(GH)患者中的分布.方法 采用荧光定量聚合酶链反应技术(FQ-PCB)对836例性病专科门诊患者进行HSV-Ⅰ,Ⅱ型DNA的检测.结果 836例患者中,HSV-Ⅰ型感染38例(4.54%),男性阳性率5.20%,女性为3.36%,二者差异无显著性;HSV-Ⅱ型感染380例(45.45%),男性阳性率39.96%,女性为55.37%,二者差异有显著性(P＜0.05).具有典型GH或高度可疑GH症状者369例,HSV感染者218例;无明显GH症状者467例,HSV感染者198例,二者差异有显著性(P＜0.05).结论 HSV在本地区具有较高感染率,以HSV-Ⅱ型为主.在非典型GH患者中,HSV的检出率较高,须引起临床注意.
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性病门诊患者单纯疱疹病毒血清型特异性抗体的检测
目的了解本地区性病门诊患者单纯疱疹病毒感染的血清学特征.方法用酶联免疫吸附试验法对864例性病患者及100例健康对照人群进行血清HSV1及HSV2抗体检测.结果性病患者血清HSV1-IgM,HSV1-IgG,HSV2-IgM,HSV2-IgG抗体阳性率分别为13.8%,90.3%,15.4%,42.4%,明显高于健康对照者的5.0%,82.0%,0,4.0%.女性患者HSV 1型和2型 IgM抗体阳性率分别为17.3%和23.0%,明显高于男性患者的11.0%和9.0%;男女患者HSV1型和2型 IgG抗体阳性率均无统计学差异.结论性病门诊患者HSV感染严重,尤其是HSV2感染.对血清HSV-2抗体阳性者采取行为干预及预防性治疗,对降低HSV传播的危险性及复发频率具有十分重要的意义.
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胸腺肽加阿昔洛韦治疗复发性生殖器疱疹临床观察
生殖器疱疹(GH)是由单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)引起的1种复发性很高的性传播疾病.我们于1999年2月～2000年11月应用胸腺肽针(西安长城制药厂)加服阿昔洛韦片进行治疗,在控制其复发方面,取得了较好的疗效.现报告如下.
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非淋菌性尿道炎患者单纯疱疹病毒感染的研究
非淋菌性尿道炎(NGU)的病原体多样,沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)是其中主要的病原体[1],但临床上相当部分的患者无明确病因.泌尿生殖道单纯疱疹病毒(HSV)感染临床类型多样,常易形成潜伏感染,当机体抵抗力下降时可重新激活,导致机体局部免疫力下降.为明确HSV感染与NGU发病的关系,我们探讨了NGU人群中HSV的感染状况. 资料与方法一、研究对象所有患者均来自我院性病专科门诊,共52例,其中男35例,女17例,年龄18～46岁,平均25.36岁,病程2～14月,平均3.6月.所有患者或其配偶均有非婚性交史,有典型的尿道炎或宫颈炎的表现,泌尿生殖道均未见水疱及糜烂.
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彩色乳胶免疫层析法检测单纯疱疹病毒1,2型抗原临床应用分析
目的 探讨彩色乳胶免疫层析法检测单纯疱疹病毒(HSV)1和2型抗原的临床应用价值.方法 采用彩色乳胶颗粒免疫层析法检测各种水疱、溃疡和其他皮损中的HSV-1和2型抗原,同时用实时荧光定量PCR法进行对照.结果 免疫层析法可检出≥1×106DNA拷贝/mL的HSV-1型混悬液和≥5×105DNA拷贝/mL的HSV-2型混悬液.132例标本中,免疫层析法检出HSV阳性43例,PCR检出HSV阳性50例.以PCR法为金标准,免疫层析法的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为84.00％,98.78％,97.67％和91.01％.结论 免疫层析法检测HSV敏感性和特异性高,具有方便、快速和经济的特点,适于有症状患者的及时检测,对疱疹感染早期诊断和及时治疗有重要作用.
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对ELISA检测生殖器疱疹患者HSV及其临床应用的评价
目的评价酶联免疫吸附试验(ELISA)检测生殖器疱疹病毒的临床应用价值.方法采用ELISA和分型聚合酶链反应(分型-PCR)检测生殖器标本中的单纯疱疹病毒(HSV),两种试验结果不符合者采用不分型PCR检测.结果164例受检者中,ELISA法HSV阳性96例(58.5%),其中具典型皮损者阳性84例(80.8%,84/104),非典型皮损阳性12例(20.0%,12/60);分型PCR HSV阳性98例(59.8%),其中典型皮损者HSV阳性86例(82.7%,86/104),非典型皮损者阳性12例(20.0%,12/60).HSV-1感染者占生殖器疱疹的5.1%,HSV-2感染占88.7%,HSV-1和HSV-2混合感染者占6.1%.ELISA的敏感性和特异性分别为96.7%和94.0%.结论ELISA检测HSV感染,其敏感性高、特异性强,方便、快速,尤其适合大批量样本的检测.
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妊娠期生殖器HSV感染的研究进展与管理对策
生殖器疱疹是常见的性传播疾病之一,病原体为单纯疱疹病毒(HSV),导致慢性、复发性、终身性感染.妊娠期HSV感染可能通过垂直传播引起严重的新生儿疱疹.容易导致垂直传播的危险因素包括:妊娠晚期原发感染、HSV-1感染,以及产道活动性皮损.妊娠期生殖器疱疹的诊断依靠临床表现及病原学/血清学检测.使用阿昔洛韦、伐昔洛韦、泛昔洛韦治疗是安全有效的.剖宫产可以降低新生儿感染风险,妊娠晚期原发感染或者产道活动性皮损者可考虑行剖宫产.
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单纯疱疹病毒的潜伏、复发感染与防治
单纯疱疹病毒(HSV)分为HSV-1及HSV-2两种血清型,感染后可在人体内长期潜伏且易复发,造成治疗及预防上的巨大困难.潜伏相关转录体(LATs)是单纯疱疹病毒潜伏期间大量存在和被转录的RNA,也是目前研究单纯疱疹病毒潜伏与复发机制的热点.近年来的研究使研究者们对LATs在单纯疱疹病毒潜伏、复发中所起的作用有了更进一步的认识.CTCF(CCCTC binding factor)是广泛存在于真核生物的多功能转录因子,其M段11个锌指结构可以形成不同的组合,调控多种靶基因的表达.CTCF在病毒的潜伏和激活过程中发挥着重要的调节作用,CTCF从结合位点脱落,病毒将被激活进行复制.目前,HSV感染的治疗主要依靠口服抗病毒药物,但难以清除患者体内潜伏的病毒,因此研究HSV疫苗已成为预防和治疗生殖器疱疹的关键.虽然目前尚无安全有效的疫苗批准上市,但其研制已取得一定的进展.阐明病毒潜伏及感染复发的具体机制,对揭示HSV感染易复发的本质,及有效防治HSV感染有重要意义.
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新鲜羊膜移植治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的初步研究
目的:探讨新鲜羊膜移植治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的可行性、手术方法和治疗效果.方法:对本院收治的23例单纯疱疹病毒性角膜炎患者(25眼)进行羊膜移植,手术方法有:单层羊膜覆盖术18例(20眼),多层羊膜移植术5例(5眼).术后随访6～12mo.结果:术后均未见新鲜羊膜植片急性排斥反应.术后3～15d炎症得到迅速有效的控制,眼部刺激症状消失,睫状体充血消退.视力有不同程度的提高.结论:对单纯疱疹病毒性角膜炎进行新鲜羊膜移植可以有效的控制炎症,迅速减轻局部症状,重建眼表,缩短病程,防止严重并发症的发生.
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解毒明目方对鼠复发性单纯疱疹病毒性角膜炎的治疗机制
目的:观察解毒明目方药对鼠复发性单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)血清细胞因子(IL-6、IL-8、IFN-α)水平的影响、检测病毒、观察复发情况,来进一步探讨该药物治疗作用机制.方法:用Balb/c小鼠建立潜伏感染模型,随机分为对照组和治疗组,治疗组使用中药灌胃,对照组使用生理盐水灌胃,两组经紫外线B光(UV-B)照射诱导复发后,角膜刮片检测病毒,处死小鼠取血清检测胞因子(IL-6、IL-8、IFN-α)水平.结果:HSK复发,治疗组角膜炎的发生率较对照组比较有显著差异(P＜0.05);与对照组比较血清中IL-6(P＜0.05)、IL-8(P＜0.01)、IFN-α(P＜0.05).结论:中药解毒明目方可以影响血清中细胞因子(IL-6、IL-8、IFN-α)的水平,使其发挥调整机体免疫功能的作用,可以减轻HSK复发后炎症反应程度.
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阿昔洛韦和贝复舒联合治疗单纯疱疹病毒性角膜炎
角膜炎是眼科常见的眼表面疾病,单纯疱疹病毒性角膜炎是由单纯疱疹病毒(HSV)引起的角膜炎症性损害.
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多重聚合酶链反应快速诊断HSK和真菌性角膜炎的研究
目的:探讨多重聚合酶链反应(multiplex PCR,MPCR)技术快速诊断单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)和真菌性角膜炎的价值.方法:建立单纯疱疹病毒(HSV)和致病性真菌菌株的MPCR检测方法,检测49例患者54眼角膜刮片或泪液标本,对怀疑为真菌和混合感染的与涂片镜检和真菌培养比较.结果:MPCR 5h可检测出标本中微量HSV和真菌,54份标本MPCR检测阳性43份(80%),其中怀疑有真菌感染的25份标本中17份真菌检测阳性(68%),阳性率明显高于真菌培养(x2=11.57,P＜0.005)和涂片镜检(x2=-13.33,P＜0.005).结论:MPCR速度快、敏感性和特异性高,有助于HSK和真菌性角膜炎的快速明确诊断.
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HSV 载体用于中枢神经损伤基因治疗的研究进展
近年来，基因治疗（ gene therapy ）在临床试验上越来越受到重视，正成为常规方法难以治愈的中枢神经系统疾病的新的治疗手段。单纯疱疹病毒（ herpes simplex virus ，HSV）是自然界普遍存在的人类病原体，具有天然的神经趋向性，能自然感染有丝分裂后的神经元，可从外周神经逆行感染进入中枢神经系统（ CNS）并在其中长期潜伏，是外源大容量基因常用的的运载工具。视神经属于中枢神经系统，因此，HSV载体可考虑用于视神经损伤后的基因治疗。本文综述了HSV作为载体用于CNS损伤后的基因治疗的研究进展并阐述用于视神经损伤后基因修复的可行性。
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单纯疱疹病毒脑炎脑皮质广泛钙化1例报告
女,70 d.足月顺产.生后轻度窒息,3 d后发热伴嗜睡、拒奶、呕吐,皮肤黄染,口唇粘膜出现疱疹.生后20 d起有抽搐,近日来出现昏睡.体检:深昏迷,呼吸浅,节律不齐,四肢肌张力低.实验室检查:PCR-HSV阳性、HSV-IgM阳性.CT表现:两侧大脑半球萎缩,皮质广泛变薄钙化,髓质内多发性囊性软化灶,双侧侧脑室扩大.颅板与钙化皮质间充以脑脊液,宽约2 cm(附图).
