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朱砂七总蒽醌体外抗单纯疱疹病毒的研究
目的 研究朱砂七总蒽醌(ZSQ)体外对单纯疱疹病毒的抑制作用.方法 运用单纯疱疹病毒I型(HSV-Ⅰ)和Ⅱ型(HSV-Ⅱ),以非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)为宿主细胞,通过观察感染病毒后的细胞变性反应(CPE)和MTI比色法,检测ZSQ对单纯疱疹病毒的抑制作用.结果 与病毒对照组相比,朱砂七总蒽醌各质量浓度组均能有效地保护感染 HSV-I和HSV-Ⅱ病毒的Vero细胞,抑制单纯疱疹病毒的复制,使病毒导致的细胞病变减弱.ZSQ抗HSV-I病毒作用IC50为0.004 7 g·L-1,抗病毒有效率达90.83%,治疗指数(TI)为16.62;总蒽醌抗HSV-Ⅱ病毒作用IC50为0.006 7 g·L-1,抗病毒有效率达90.06%,治疗指数(TI)为11.66.结论 ZSQ在体外显示出明显的保护宿主细胞、抵抗单纯疱疹病毒感染的活性.
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聚合酶链反应检测单纯疱疹病毒感染
0 引言单纯疱疹病毒(HSV) 有两个血清型:HSV-1和HSV-2,流行于全世界. 近年来,HSV在性传播疾病(STD)和妇幼保健、优生优育方面已受到高度重视. 目前HSV感染的检验诊断技术有病毒培养、免疫荧光(IF)、酶联免疫吸附试验(ELISA)以及PCR等. 我们依据HSV基因的特异性保守区设计三条引物,建立了分型检测HSV基因的PCR方法.
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聚合酶链反应(PCR)检测可疑HSK患者外周血及角膜上皮单纯疱疹病毒DNA
1 材料和方法1.1 材料正常对照组20 例,临床可疑单纯疱疹性角膜炎(HSK)患者50例(均为我院眼科中心住院或门诊患者).
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单纯疱疹病毒Ⅱ型gD模拟抗原表位的筛选及分析
目的:用抗-HSV-2gD单克隆抗体(mAb)从噬菌体随机12肽库中筛选HSV-2gD抗原模拟表位序列.方法:利用HSV-2gD McAb淘筛噬菌体随机12肽库,经四轮富集筛选,随机挑取阳性克隆扩增后进行ELISA鉴定,同时提取其基因组DNA进行序列测定,并利用生物信息学软件对包膜糖蛋白D(gD)进行B细胞抗原表位分析.结果:经四轮生物淘筛后,特异性噬菌体克隆得到了富集.经过对阳性克隆携带的随机12肽序列进行综合生物信息学分析,得到了PYH-H和P-PLW两个模拟HSV-2gD抗原表位的主要氨基酸基序.结论:用噬菌体随机12肽库成功筛选到了两个模拟HSV-2gD抗原表位的主要氨基酸基序,可模拟McAb针对的抗原表位,可能是HSV的替代抗原.该研究方法为研制更有效及更广谱的HSV基因疫苗提供了依据.
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单疱病毒性角膜炎患者血清一氧化氮的改变及临床意义
1对象和方法1.1 对象单疱病毒性角膜炎(herpes simplex keratitis,HSK)患者43(男26,女17)例,均系本院收治的患者,其中HSK活动期15例,HSK非活动期28例;发病年龄19～68(平均43.5)岁. 病史、主觉症状和复发诱因,裂隙灯显微镜检查呈典型而特有的病变形态,角膜知觉下降或消失等.
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宫颈单纯疱疹病毒感染的检测和分型
0引言 单纯疱疹病毒(HSV)分HSV-1和HSV-2两个血清型,两型病毒均能引起宫颈慢性炎症,并具有反复发作和致癌的特性,可对孕妇及围产儿造成严重后果. 而且两型病毒的生物学特征及其引起的生殖器疱疹的病程和预后却不同[1,2]. 因此,对HSV感染的快速检测和准确分型,有助于生殖器疱疹的诊断、预后及流行病学研究. 我们已建立了用于HSV检测与分型的抗原捕获聚合酶链反应(AC-PCR)方法[3,4]. 为了解宫颈HSV感染情况,评价AC-PCR 在生殖器疱疹诊断中的应用价值,我们用AC-PCR 法对宫颈棉拭标本中HSV进行检测和分型,并与病毒培养法进行比较.
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通过序列分析筛选单纯疱疹病毒I型蛋白组中的PACS-1结合蛋白
［刘军，李英辉，薛采芳，甄荣芬，李旬，王宪锋，刘忠湘，万磊. 细胞与分子免疫学杂志,2001;17(2):123-03］ 目的筛选单纯疱疹病毒I型蛋白组中的PACS-1结合蛋白. 方法根据筛选标准，利用ScanProsite和PSORT软件对蛋白质进行分析，并结合相关文献中的实验数据对分析结果进行校正. 结果该方法可有效地筛选出PACS-1结合蛋白. 利用该方法，在单纯疱疹病毒I型蛋白组中，共筛选出可能与PACS-1结合的蛋白质33种. 结论建立了一种有效的筛选PACS-1结合蛋白的方法. 筛选出的单纯疱疹病毒I型的PACS-1结合蛋白，将为研究PACS-1在疱疹病毒发生及潜伏性感染中的作用提供指导.
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新制柴连汤治疗单疱性角膜炎24例小结
单疱性角膜炎是由于感染单纯疱疹病毒而引起的病变,临床表现复杂,迁延难愈,且易复发.本病似属中医"聚星障"、"花翳白陷"范畴,从1995年至1997年采用新制柴连汤加减共治疗24例,27眼,取得了较好疗效,现报导如下:
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单纯疱疹病毒2型gG-2"独特区"基因的原核表达及其血清学诊断价值
目的 在大肠杆菌中表达HSV-2的gG-2"独特区"基因(gG-2T)并对其免疫学特性进行初步研究.方法 克隆HSV-2的gG-2T,并在大肠杆菌中表达gG-2T融合蛋白.通过Western blot和间接ELISA鉴定融合蛋白的活性.结果 通过原核系统表达的gG-2T融合蛋白可以与GST多克隆抗体结合并在46 ku附近出现特异性结合条带.并且能够与确诊的HSV-2患者血清反应,而不与HSV-1患者血清和正常人血清反应.结论 获得了HSV-2 gG-2T融合蛋白,它可以与GST多克隆抗体特异性结合并且可以同HSV-2型患者血清特异性反应;获得的gG-2T蛋白为研究以gG-2蛋白作为靶区域的诊断试剂盒和疫苗研发打下实验基础.
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土贝母皂甙对家兔单纯疱疹病毒性角膜炎的作用
目的评价土贝母皂甙(tubeimoside, Tu)治疗家兔单纯疱疹病毒性角膜炎(herpes simplex keratitis, HSK)的效果.方法在地鼠肾细胞BHK-21上进行单纯疱疹病毒I型(HSV-1型)SM44毒株复苏,制作兔HSK模型.家兔分为0.2g/L Tu、无环鸟苷(ACV)和生理盐水(NS)3组,采用裂隙灯显微镜、扫描电镜和透射电镜观察眼部病变的变化.结果 0.2g/L Tu、无环鸟苷和生理盐水组第6～8天角膜病变分值分别为3.13～3.5、1.75～1.88和3.83～3.88,第14天时为2.07、1.13和2.77,3组间比较,均有显著性差异(P<0.01).0.2g/L Tu可以显著缩小角膜病变面积,促进角膜上皮细胞的修复,其作用优于生理盐水组,但不及ACV组.结论 Tu点眼剂治疗实验性HSK有一定的疗效,但尚不及ACV.
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单纯疱疹病毒性角膜炎土贝母皂甙点眼的浓度筛选与刺激性评价
目的通过动物试验评价土贝母皂甙(tubeimoside,Tu)治疗单纯疱疹病毒性角膜炎(herpes simplex keratitis, HSK)的效果及点眼刺激性,并确定其点眼浓度值.方法根据药物的眼刺激性选用5、2、0.8、8×10-2、8×10-3、8×10-4?g*L-1Tu点眼,确定0.4、0.2、0.1?g*L-1评价药物疗效.在地鼠肾细胞BHK-21上进行单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1型)SM44毒株复苏,制作兔HSK模型.采用裂隙灯显微镜、扫描电镜和透射电镜观察眼部病变的动态变化评价Tu疗效.结果 5、2?g*L-1 Tu有中度刺激性,0.8?g*L-1 Tu有轻度刺激性.8×10-2、8×10-3、8×10-4?g*L-1 3组Tu无任何眼刺激性.0.4?g*L-1 Tu有轻度刺激性,0.1、0.2?g*L-1 Tu无刺激性.0.4、0.2、0.1?g*L-1 3组Tu均具有一定疗效.结论 Tu点眼剂的浓度与刺激性呈正相关,点眼刺激性从轻度到无的界值浓度为0.4、0.2、0.1?g*L-1.治疗实验性HSK有一定的疗效,但尚不及无环鸟苷.
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单纯疱疹病毒1型糖蛋白D核酸疫苗的构建及初步免疫观察
目的构建用于防治单纯疱疹的核酸疫苗并观察其免疫效果.方法用PCR反应,从HSV-1 F株基因组DNA中扩增出gD蛋白的全部编码序列,将其插入pcDNA3.1(+)的PCMV下游,构建HSVgD核酸疫苗,并用酶切分析和测序鉴定;通过中和试验、ELISA方法和攻击试验检测用pLy-D三次肌肉接种小鼠的免疫效果.结果经鉴定证实了HSV gD核酸疫苗pLy-D的构建;实验小鼠产生了对HSV-1特异性的抗体(抗体滴度:ELISA法1:203,中和试验法1:37),并经受了HSV-1病毒的攻击(存活率:70%).结论成功构建出了HSV gD核酸疫苗pLy-D,用其接种小鼠可以诱导产生特异性免疫反应,并具有良好的保护作用.
关键词： 单纯疱疹病毒 糖蛋白D 聚合酶链式反应(PCR) 核酸疫苗 -
UL2基因与HSV-1在三叉神经节中潜伏感染的相关性
目的深入了解UL2基因与HSV-1在三叉神经节潜伏感染的相关性。方法选择HSV-1国际参考标准株F株、HSV-1RE(株)(UL2基因插入突变株)和其亲代HSV-1△305株(TK-)三株病毒进行对比分析研究。对三株HSV-1病毒腹腔免疫接种小鼠双侧三叉神经节分别进行PCR扩增。结果 HSV-1(RE)和HSV-1(△305)组HSV-1潜伏感染率明显低于HSV-1(F)组(P<0.025)，提示UL2基因可能在HSV-1形成潜伏感染过程中起一定作用。经HSV-1(F)病毒攻击实验后三个实验组小鼠，其潜伏感染率无明显变化，而对照组小鼠潜伏感染率明显高于HSV-1(RE)组和HSV-1(△305)组(P<0.01)。结论 HSV-1(RE)株的免疫接种可以预防HSV-1潜伏感染的建立。同时也为HSV-1RE株作为神经系统疾病基因治疗载体提供了理论依据。
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小儿腹泻病并发惊厥1例
患男，1岁8个月。大便稀薄5d ，精神差、发作性抽搐1d。5d前患儿因饮食不当出现大便稀薄，呈糊状便，1次／d ，伴有非喷射性呕吐，为胃内容物，约3～4次／d ，自服“健儿清解液”1d ，呕吐缓解，但大便稀薄性质基本同前，1d前出现精神差，呈嗜睡状，伴抽搐发作，表现为双眼上翻，双手握拳、抖动，伴口唇发绀，持续约1 m in缓解，缓解后伴疲乏明显，并出现撞头现象，不伴呕吐，查粪常规示脂肪球阳性，精神好转，至外院就诊，就诊时再次出现抽搐发作，性质基本同前，给予水合氯醛灌肠及吸氧处理后好转。辅助检查：头颅 CT 未见异常，血气分析示：“pH 7．28mmHg ，Ca2＋1．21mmol／L ，HCO313．2mmol／L ，BE （B）-12．2 mmol／L”。静脉给予“甘露醇”、“磺苄西林”、“利巴韦林”，无抽搐再次发作，伴烦躁明显，撞头现象明显，为求进一步诊治，遂来我院，门诊以：①腹泻病；②抽搐原因待查：颅内感染收住我科。发病以来患儿体温正常，无特殊气味，无发育倒退，食纳欠佳，大便性状同上，小便正常。既往体建，否认水痘、麻疹病史，否认肝炎、结核等急慢性传染病史及其他接触史，否认重大手术史、外伤及输血史，否认特殊食物及药物过敏史，按时预防接种。患儿系第1胎1产，足月剖宫产，生长发育同一般同龄儿，体格发育未见明显异常。家族中无类似病史，否认遗传代谢病及遗传倾向家族疾病史。入院后大便次数增多，约7次／d，呈黄色稀水样便，无脓液，无血性分泌物，无呕吐，无抽搐再次发作，患儿精神差，食纳差。查体：T 36．8℃，P120次／m in ， R 40次／min ，体重15kg ，系统检查未见明显异常。辅助检查：脑脊液生化CSF蛋白0．12g／L ，生化全套示磷酸肌酸激酶同工酶33U／L ，氯109．1 mmol／L ，碳酸氢根16．30 mmol／L ，钙1．95 ；mmol／L ；脑脊液常规、粪常规、血沉、同型半胱氨酸、乳酸、抗结核抗体阴性。尿常规示白细胞计数36．1个／μl，白细胞（±），尿蛋白（±），酮体（触）；柯萨奇病毒阳性；血常规、C反应蛋白、脑脊液免疫球蛋白G、抗酸染色、革兰染色、真菌涂片、降钙素原、单纯疱疹病毒I定量未见明显异常。脑电监测示异常脑电图，醒睡中显示少量短促阵发高幅θ活动或短促小尖、棘波。诊断为：①腹泻病；②小儿惊厥。给予：①静脉给予美洛西林钠舒巴坦钠1．25g ，2次／d；磷酸肌酸钠注射液1000mg ，1次／d ，还原型谷胱甘肽300mg ，1次／d ，利巴韦林注射液100mg ，1次／d ，布拉酵母菌散剂，半袋／次，2次／d，思密达1／3袋／次，3次／d；②规律饮食，保证睡眠，避免摔伤；③暂时延缓以免接种。治疗5d ，大便性状好转，次数减少约3次／d ，无抽搐再次发作，一般情况可，出院。出院后巩固抗病毒治疗，有情况随时就诊。
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带状疱疹后遗症针灸治疗50例体会
疱疹病毒(herpes-virus)属于疱疹病毒科.是一群中等大小,有包膜的DNA病毒,现已发现有100种以上,与人感染有关的病毒主要有:单纯疱疹病毒1型和2型、水痘-带状疱疹病毒、巨细胞病毒、EB病毒、人疱疹病毒6型和7型.笔者仅对水痘-带状疱疹后遗症的针灸治疗方法提出讨论.
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国内外口腔单纯疱疹病毒感染的治疗
口腔单纯疱疹感染是由单纯疱疹病毒(herpes simplex virus，HSV)引起的急性口腔黏膜及口周皮肤以疱疹为主的感染性疾病，是口腔临床常见的病毒感染。治疗口腔单纯疱疹病毒感染的方法多种多样，此文针对国内外治疗口腔单纯疱疹病毒感染的治疗进展进行论述。
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单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体室内质控血清制备及临床应用评价
目的：探讨自制外部弱阳性质控血清在检测血清单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSVⅡ）试剂盒中应用的可行性，并与康润公司质控血清进行结果比对。方法试验采用对比检测研究，使用美国Trinity Biotech Plc公司提供抗HSVⅡIgG型和IgM型试剂盒分别检测自制和康润公司质控血清，采用SPSS16.0进行数据处理。不同月份和不同批号试剂盒间质控血清精密度和稳定性的比较采用均数的t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。结果自制血清抗 HSVⅡIgM S/CO 平均值为（2.56±0.611），CV值11.95％；康润公司质控血清抗 HSVⅡIgM型S/CO值（2.38±0.48），CV值为10.08％，两种质控血清 CV值比较无统计学差异P＞0.05。自制血清抗HSVⅡIgG型的S/CO值（3.57±0.98），CV值13.78％；康润公司抗HSVⅡIgG型质控血清S/CO值为（3.275±0.822），CV值为12.55％，两种质控血清 CV值比较无统计学差异P＞0.05。结论自制外部弱阳性质控血清在实际检测中精密度、稳定性符合国家对质控物的要求，基层医院检验科有能力制备，值得推广应用。
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单纯疱疹病毒感染临床特点分析
目的：探讨单纯疱疹病毒（HSV）感染临床特点。方法：我院2012-02/2013-02月门诊共接诊20例HSV感染患者的资料。结果：20例HSV感染患儿中，17例患儿出现全身感染，仅3例无临床表现，5例出现局限性皮肤、眼、口腔黏膜损害。结论：HSV感染常表现为皮肤粘膜的泛发性疱疹，并能引起全身性播散病变，后期可累及中枢神经系统，病情严重，应及早发现及早治疗。
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中药香菊胶囊对初发性生殖器疱疹豚鼠模型的影响
目的:探讨中药香菊胶囊对生殖器疱疹(GH)豚鼠模型的影响.方法:选取Hartley雌性豚鼠30只,随机选取其中5只作为正常对照组,其余25只以人工感染单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的方式建立GH动物模型,并随机分为模型对照组、阿昔洛韦组和香菊胶囊高、中、低剂量组,各组分别灌胃给药及给生理盐水后观察豚鼠发病情况和病程变化情况.结果:香菊胶囊治疗后GH豚鼠的皮损严重程度和消退时间较对照组明显降低,其中高剂量组效果好,类似于阿昔洛韦组的用药效果,低剂量组效果弱,中剂量组效果居中.香菊胶囊各剂量组豚鼠阴道内病毒滴度与阿昔洛韦组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:香菊胶囊能够抗HSV-2增殖,在豚鼠体内具有良好的抗HSV-2感染所致GH的作用.
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基因疗法中非整合型病毒载体的应用
在过去的十年间,基因疗法在肿瘤、遗传性疾病以及传染性疾病等多个领域的临床治疗中取得了突破性进展.在基因疗法中,广泛地应用了各种各样的病毒载体,按其生活史可分为整合型病毒载体(如 γ-逆转录病毒、慢病毒)和非整合型病毒载体(如腺病毒、腺相关病毒、单纯疱疹病毒和痘病毒).腺病毒、单纯疱疹病毒是溶瘤病毒中常用的病毒载体,能优先感染肿瘤细胞,经复制后造成其裂解.这些病毒的特点是基因携带量大,但只能维持较短时间的外源性基因表达,加之免疫原性较强,因此需要采取肿瘤内注射的给药方式.腺相关病毒则由于其较低的免疫原性和持久的表达能力而被广泛使用于遗传缺陷性疾病的基因替代疗法中.现就用于直接在体细胞内进行稳定表达的非整合型病毒载体作一概述.
