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  • 神经电刺激对骨折愈合过程中CGRP表达影响的实验研究

    作者:田振峰;郭洁;武建忠;高雁冰;徐建杰;喻伟光

    目的 通过观察降钙素基因相关肽(CGRP)在骨折部位表达的时空变化,探讨电刺激对骨折愈合的影响及调控机制.方法 选用健康新西兰雄兔40只,取双侧桡骨建立分离骨折模型,以左侧桡骨为实验组进行神经电刺激,右侧为对照组给予假刺激.分别在术后第1,7,14,21,28天取标本,应用免疫组化及HE染色测定CGRP在新生骨痂中的表达变化.结果 免疫组化染色检测发现相同时期神经电刺激组CGRP表达量的平均光度值明显高于对照组,实验组CGRP的峰值持续时间长,CGRP分布范围广,2组比较有显著性差异(P均<0.05).结论 电刺激能够使周围神经组织CGRP分泌量增加,周围神经系统通过CGRP等神经肽物质在早期骨修复及后期骨痂塑形改建过程中发挥重要调节作用,其表达量与骨折愈合呈正相关;通过神经电刺激等措施能够促进神经支配区域的骨折愈合.

    关键词: 骨折 CGRP 神经电刺激
  • 颈复汤对颈性眩晕患者血浆内皮素和降钙素基因相关肽水平影响的研究

    作者:梁芳;魏德芝;王宇新;黄侃;霍清萍

    目的 观察颈复汤对颈性眩晕患者血浆内皮素(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)水平变化的影响及临床疗效.方法 将170例确诊为颈性眩晕的患者随机分为颈复汤低剂量联合西药倍他司汀组(低结合组)、颈复汤中剂量联合西药倍他司汀组(中结合组)、颈复汤高剂量联合西药倍他司汀组(高结合组)、颈复汤中剂量组(中药组)、倍他司汀组,每组34例,疗程1周,用放射免疫法检测治疗前后血浆ET-1、CGRP水平变化,并进行积分评估.结果 治疗后各组血浆ET-1水平显著下降,血浆CGRP水平和CGRP/ET-1比值显著提高.血浆ET-1水平各结合组与中药组相比有显著性差异(P均<0.05),血浆ET-1水平高结合组、中结合组与倍他司汀组比较有显著性差异.血浆CGRP水平高结合组、中结合组与中药组比较有显著性差异,高结合组与倍他司汀组、中结合组、低结合组比较有显著性差异.治疗后积分评估各组显著升高,低、中、高结合组与中药组比较具有显著性差异;高结合组、中结合组与倍他司汀组比较有显著性差异.结论 血浆ET-1、CGRP可能是颈性眩晕发病的重要物质基础,两者失衡对颈性眩晕的发生发展起着重要作用.颈复汤可能通过对ET-1与CGRP水平的调整而起治疗作用,值得深入研究.

  • 实验性根尖周炎组织中CGRP免疫阳性纤维的变化

    作者:姜文兰;周杰;林莉

    目的观察根尖周炎时根尖周组织中CGRP免疫阳性纤维的变化.方法在大鼠双侧上颌第一磨牙开髓,分别观察8、15、35天,通过免疫组化法比较正常和炎症状态下根尖周组织中CGRP免疫阳性纤维的变化,然后进行图像分析阳性纤维密度.结果开髓8、15、35天根尖周组织中CGRP免疫阳性纤维增多,开髓15天组阳性纤维密度高.结论 CGRP参与了根尖周炎症的发生、发展过程.

  • 经皮神经电刺激对桡骨远端骨折患者血清CGRP变化的影响及意义

    作者:田振峰;喻伟光;李洁冰;郭尔斐;董志辉;宋亮亮;武建忠;张立兴;高雁冰

    目的 探讨采用手法闭合复位结合经皮神经电刺激治疗桡骨远端骨折的临床疗效,以及对患者血清降钙素基因相关肽(CGRP)变化的影响及临床意义.方法 选择2012年6月至2013年6月骨科收治桡骨远端骨折患者52例,骨折AO分型为A型10例、B型31例、C型11例,随机将患者分为2组,每组26例,治疗组采用闭合复位石膏固定桡骨远端骨折,固定后给予经皮神经电刺激治疗;对照组采用闭合复位石膏固定桡骨远端骨折,固定后不予特殊干预.随访时间12个月,于伤后入院时、1d、7d、28 d等时间节点采用ELISA法检测患者血清CGRP水平变化,石膏固定后每周复查X线片并检查石膏固定是否松弛并给予调整,并于终随访时根据改良Cooney评分标准进行腕关节功能评分.结果 52例桡骨远端骨折均愈合,骨折临床愈合拆除石膏时间分别为:治疗组(4.80±0.52)周,对照组(6.20±0.64)周;患者血清CGRP结果显示2组伤后入院时及第1天2组间比较差异无统计学意义(P>0.05),伤后7d及28 d2组间比较差异有统计学意义(P<0.05),治疗组血清CGRP水平明显高于对照组.52例均获得随访,在终的随访中采用改良Cooney腕关节评分评价腕关节功能,治疗组优18例,良6例,中2例,优良率92.3%;对照组优8例,良12例,中6例,优良率76.92%.结论 桡骨远端骨折患者伤后血清CGRP水平明显升高,且并随着时间推移而逐渐下降,给予经皮神经电刺激后可明显延缓CGRP下降趋势,可保持全身及局部CGRP高水平,从而达到促进骨折愈合改善腕关节功能的目的,临床采用闭合复位石膏固定结合经皮神经电刺激治疗桡骨远端骨折,方法安全有效,易于推广,具有良好的临床效果.

  • CGRP对UUO小鼠肾组织间质纤维化与炎性因子表达的干预作用

    作者:刘丽辉;石亮;王岩;谷昆峰;崔素娅;宋铁鹰

    目的 探讨CGRP对小鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾间质纤维化的影响.方法 选择雄性小鼠36只,建立小鼠UUO模型,前2 d治疗组和模型组分别每天给予CGRP 1 R.0 nmol·kg-1·d-1和同等量0.9%氯化钠溶液静脉注射.观察模型第14天肾小管损害百分比、肾间质纤维化程度、肾间质α-SMA平滑肌肌动蛋白、肾间质巨噬细胞数,单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)以及F4/80 mRNA的表达.结果 CGRP显著减轻肾小管损害和肾间质纤维化(P<0.05);治疗组肾间质巨噬细胞数F4/80和肾间质α-SMA表达显著低于模型组(P<0.05);CGRP显著抑制MCP-1以及F4/80 mRNA的表达(P<0.05).结论 CGRP减少小鼠UUO模型肾间质巨噬细胞浸润、降低MCP-1以及F4/80 mRNA表达、抑制α-SMA的表达,从而减轻肾间质纤维化.

  • CGRP受体拮抗剂CGRP8-37对颅脑创伤后大鼠保护作用的实验研究

    作者:贾志亮;刘跃亭;段虎斌

    目的 探讨脑室给予CGRP受体拮抗剂CGRP8-37对颅脑创伤后大鼠的保护作用.方法 将90只Wistar大鼠随机分为对照组(6只)、创伤组(TBI组,42只)、CGRP8-37组( 42只).TBI组、CGRP8-37组大鼠分别作自由落体创伤模型,应用免疫组化和PCR技术,动态观察对照、创伤和CGRP8-37组大鼠0.5 h,2 h,6 h,12 h,24 h,48 h,72 h后CGRP的变化规律.结果 ①免疫组化显示:对照组在TBI组脑组织 CGRP阳性单位在伤后0.5 h 开始表达上调,2 h、6 h 依次增高,12 h 达到峰值( P<0.05),之后逐渐回落,72 h时高于正常水平.与TBI组相比,CGRP8-37组脑组织 CGRP阳性单位表达在2 h即达到高峰,随后持续回落,48 h即恢复正常,72 h低于正常水平.且在相应的时间点CGRP阳性单位表达都低于TBI组.②PCR显示:与免疫组化结果基本相似,即CGRP8-37组脑组织CGRP mRNA表达较TBI组峰值提前,由12 h提前至2 h,且在相应时间点减少CGRP mRNA表达.结论 CGRP受体拮抗剂CGRP8-37能减轻大鼠创伤性脑损伤后CGRP的表达,减轻脑水肿,并能促进病理过程的恢复.

  • TNF-α和CGRP在门脉高压大鼠胃黏膜中的表达及其意义

    作者:李科;鲍民生;孟俊鹏

    目的:观察肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related pep-tide,CGRP)在门脉高压大鼠胃黏膜中的表达及其意义.方法:25只雄性SD大鼠随机分为两组.其中对照组10只,实验组15只.实验组采用门静脉两步结扎法左肾上腺静脉结扎.对照组入腹后仅分离出门静脉主干,并显露左肾及左肾静脉.门静脉完全结扎2 W后检测门静脉压力以及胃组织中TNF-α、CGRP表达.结果:术后2 w实验组大鼠门静脉压力较对照组明显升高(P<0.05).TNF-α阳性细胞为胞浆内可见棕黄色颗粒,主要分布在黏膜下层,实验组呈强阳性表达,对照组为阴性或仅为弱阳性.CGRP于黏膜层和黏膜下层可见阳性产物及少量的黄染CGRP神经纤维,实验组CGRP的表达强度明显高于对照组(P<0.05).结论:rrNF-α和CGRP在门静脉高压症导致的胃黏膜病变中起一定的作用.

  • 支气管哮喘发作期冷、热哮证与ET-1、CGRP关系的临床研究

    作者:甘慧娟

    目的:探讨冷热哮证与ET-1、CGRP的关系.方法:对60例哮喘急性发作期患者,就ET-1、CGRP含量与中医辨证分型的关系进行研究.结果:发现哮喘组ET-1、CGRP含量显著高于正常对照组,其中冷哮证ET-1较热哮证有非常显著差异(P<.01),热哮证CGRP较冷哮证有显著差异(P<.05).结论:ET-1、CGRP可作为冷、热哮证不同病理、生理变化的客观指标之一.

  • TNF-α与CGRP在门脉高压大鼠肠组织中的表达及其意义

    作者:李科;鲍民生;孟俊鹏

    目的:在大鼠门脉高压模型上,观察肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在门脉高压大鼠肠组织中的表达,探讨其在门脉高压性肠病中的意义.方法:雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组采用门静脉两步结扎法加左肾上腺静脉结扎,并于门静脉完全结扎后两周测量门静脉压力;采用免疫组织化学的方法观察TNF-α和CGRP在肠组织中的表达.结果:实验组大鼠门静脉压力明显高于对照组,P<0.05;实验组大鼠肠组织中的TNF-α、CGRP呈强阳性表达,而对照组呈阴性和弱阳性表达.结论:TNF-α、CGRP在门静脉高压症的肠黏膜病变中可能具有一定的作用.

  • 严重创伤时降钙素基因相关肽对心血管系统的影响

    作者:张宝林;王小兵;卢颖洁;张琳

    近年来,多脏器功能障碍综合征(MODS)已成为创伤后并发症的突出问题,其中心血管系统的损害日益引起人们的重视.严重创伤早期即存在心脏的器质性损伤和功能不全;休克期常伴有明显的心脏功能下降,除血容量、回心血量、外周阻力等因素,心脏本身功能变化是其重要的原因.目前的研究多集中于心脏能量代谢、离子紊乱和脂质过氧化等方面,而对于创伤后心脏调节肽变化的研究较少,其中,降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)是由非肾上腺素非胆碱能释放的介质,对心血管系统功能代谢、生长发育及心血管系统疾病的发生发展均有重要影响.本文主要就严重创伤时CGRP对心血管系统的影响及其机制做一综述.

  • 自拟疏肝开窍饮经验方联合盐酸氟桂利嗪片治疗偏头痛患者的临床效果及对外周血CGRP、5-HT、TNF-α水平的影响

    作者:方珣;曾科学

    目的:探讨自拟疏肝开窍饮经验方联合盐酸氟桂利嗪片治疗偏头痛患者的临床效果,重点探究其对患者血清降钙素基因相关肽(calcium gene related peptide,CGRP)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平的影响.方法:将92例偏头痛患者机分为观察组及对照组各46例,对照组患者口服盐酸氟桂利嗪片,观察组患者则在对照组基础上加用自拟疏肝开窍饮经验方内服,连续用药1个月.对比两组治疗方案的临床疗效,记录并比较两组患者治疗前后的头痛发作频率、每月无头痛天数、疼痛持续时间,用疼痛视觉模拟评分法VAS对偏疼痛程度进行评定,采用超声经颅多普勒血流分析仪检查患者治疗前后脑血流动力学指标变化,监测治疗前后血清CGRP、5-HT、TNF-α水平,记录两组患者用药期间的不良反应.结果:观察组有效率91.3%明显高于对照组的71.7% (P<0.05);经治疗后观察组患者的头痛发作频率明显低于对照组,每月无头痛天数明显多于对照组,疼痛程度评分显著降低,疼痛持续时间明显缩短(P<0.05);观察组患者脑血流动力学指标MCA、BA、PCA、ACA水平较治疗前及对照组显著降低(P<0.05);观察组患者血清中CGRP、TNF-α水平较治疗前及对照组显著降低,5-HT水平较治疗前及对照组显著升高(P<0.05);观察组治疗期间不良反应率8.7%明显低于对照组的不良反应率21.74%(P<0.05).结论:自拟疏肝开窍饮经验方联合盐酸氟桂利嗪片利于减轻患者头痛程度,其止痛机制可能是通过改善患者的脑血流动力、调控血清中CGRP、5-HT、TNF-α水平以改善神经元代谢与脑微循环、缓解血管痉挛等途径实现的,值得临床推广.

  • “肺肠合病”模型大鼠肺、肠CGRP与CCK8表达的实验研究

    作者:冯贤荣;杨宇;张显明;朱素有;叶建红;郑旭锐

    目的:通过观察模型大鼠肺、结肠组织中降钙素基因相关肽(CGRP)与八肽胆囊收缩素(CCK8)表达量的变化,从而探讨“肺与大肠相表里”的机制.方法:实验设空白对照组、肺肠合病组(过敏性哮喘合便秘)共两组.用免疫组化方法测定CGRP与CCK8的表达.结果:在肺肠合病状态下,与空白对照组比较,大鼠肺、结肠组织中CGRP与CCK8的表达呈显著性差异(P<0.01).结论:在肺肠合病状态下,肺、结肠组织中CGRP与CCK8的表达均发生了变化,提示在上述病理模型情况下,说明在上述病理模型情况下肺与大肠之间存在一定的联系,提供了部分支持“肺与大肠相表里”的实验依据.

  • 疏肝饮对内脏高敏感性大鼠结肠及DRG中SP和CGRP表达的影响

    作者:尚精娟;唐蓉珠;徐晖;袁建业;谢建群

    目的:观察疏肝饮对内脏高敏感性大鼠结肠组织及DRG中SP和CGRP表达的影响.方法:96只wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、疏肝饮大剂量组、疏肝饮中剂量组、疏肝饮小剂量组、西药组,采用慢性避水应激法造模10 d,造模第4d起,各给药组大鼠于造模前半小时分别给予药物灌胃,连续7天,第10 d造模结束后,采用结直肠气囊扩张引起的腹壁撤回反射来评估内脏敏感性;取出结肠及DRG组织,采用western-blotting法分别检测SP和CGRP含量.结果:与正常组相比,模型组结肠及DRG中SP及CGRP的含量显著增加;与模型组比较,疏肝饮组大、中剂量组和得舒特组大鼠结肠及DRG中SP和CGRP含量均明显减少,差异有统计学意义.结论:疏肝饮通过调节结肠及DRG中SP和CGRP的表达,从而降低内脏高敏感性.

  • 红花黄色素联合电针对颈性眩晕患者血清CRP、肝功能及CGRP水平及临床疗效的影响

    作者:王权

    目的:探讨红花黄色素联合电针对颈性眩晕患者血清CRP、肝功能、CGRP水平影响及临床疗效.方法:选取本院住院颈性眩晕患者80例,患者或家属签字同意,按随机数字表法分为两组.对照组40例予以西医常规治疗;研究组40例予以红花黄色素联合电针治疗,治疗前后测定椎-基底动脉平均血流速度,空腹采血5 mL,采用ELISA法测定血清CRP、ET-1及CGRP水平,同时对比临床疗效.结果:对照组有效率75.00%低于研究组有效率92.50%,具有统计学意义(P<0.05);研究组治疗后椎-基底动脉平均血流速度显著高于对照组,研究组治疗后血清CRP、ET-1水平低于对照组,CGRP水平高于对照组,具有统计学意义(P<0.05),两组治疗后肝功能无明显变化.结论:颈性眩晕患者采用红花黄色素联合电针治疗能降低血清CRP,提高CGRP水平,且对肝功能无影响,疗效可靠.

  • 金氏痔痛贴的药效学作用实验研究

    作者:金莹;金纯;谢杰斌;郑晨果;叶乐驰;陈荣

    目的:观察金氏痔痛贴( Jin's Hemorrhoid Patch,JHP)的止血、镇痛作用.方法:采用断尾法测定出血时间,玻片法测定凝血时间;测定大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)及血小板聚集功能.通过热板法及化学刺激法观察各组小鼠的镇痛作用;采用双抗体夹心法(ELISA法)检测降钙素基因相关肽(Calciton in gene - related peptide,CGRP)水平变化.结果:金氏痔痛贴能明显缩短大鼠的出血时间和凝血时间,且与云南白药相比,差异有显著性意义;金氏痔痛贴能明显缩短大鼠的PT和APTT,并能增强大鼠的血小板聚集功能;该药对热传导及化学刺激引起的拟痛反应有明显的镇痛作用;该药对大鼠血浆CGRP水平有显著升高作用.结果均具有统计学意义(P<0.01).结论:金氏痔痛贴具有良好的止血、镇痛功效.

  • 开窍通腑汤对MCAO大鼠内皮素-1和降钙素基因相关肽含量的影响

    作者:刘树权;关欣;李檀;金岩;孟宪生;池明宇

    目的:通过CGRP和ET-1探讨开窍通腑汤的活血及神经元的保护作用.方法:采用栓线法复制大鼠大脑中动脉缺血3h再灌注模型.放射免疫法观察MCAO后不同时间点各组大鼠血清ET-1与CGRP的变化.结果:开窍通腑汤有提高CGRP水平以及拮抗ET-1的作用,促使ET-1/CGRP的调节平衡,能使ET-1水平下降,CGRP释放增多,能减少脑动脉痉挛,改善脑组织缺血缺氧,保护脑细胞及血管内皮细胞,从而达到防治脑缺血再灌注损伤的目的.

    关键词: 开窍通腑汤 ET-1 CGRP
  • PKA调控TRPV1敏化介导CGRP表达探讨疏肝健脾方防治肠易激综合征研究

    作者:方健松;马媛萍;刘畅;张涛

    目的:通过观察肠易激综合征(irritable bowels syndrome,IBS)大鼠结肠黏膜组织形态、超微结构及蛋白激酶A(protcin kinase A,PKA)、辣椒素受体(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)、降钙素基因相关肽(caleitonin gene-relatedpeptide,CGRP)的表达变化,探讨疏肝健脾方治疗IBS可能机制.方法:72只清洁级雄性大鼠按体质量随机分为正常组,模型组,疏肝健脾方组(低、中、高剂量)和对照组;用辣素灌胃结合束缚应激刺激法复制IBS大鼠模型.正常组予同步饲养;疏肝健脾方组分别按低、中、高不同剂量给药;对照组予匹维溴胺;模型组予等剂量生理盐水;连续灌胃2周.末次给药后,处死所有大鼠,取结肠组织并应用HE染色法和醛品红-桔黄G法分别检测病理组织学改变及肥大细胞阳性表达情况;采用Western-blot技术和荧光定剂量PCR检测大鼠结肠PKA、TRPV1、CGRP的表达情况.结果:光镜下见各组黏膜及黏膜上皮绒毛完整,排列规则,可见少许炎症细胞,未见黏膜下血管扩张及弥漫性炎症浸润改变,腺体结构、排列正常;正常组除外,各组大鼠结肠组织黏膜间质或黏膜下层可见类圆形紫红至深紫色染色点.模型组大鼠结肠组织中PKA、TRPV1、CGRP基因和蛋白表达明显高于正常组(P<0.05).高剂量组PKA、TRPV1、CGRP以及中剂量组CGRP基因表达和高剂量组PKA、CGRP蛋白表达均低于模型组(P<0.05),其余低、中剂量各组PKA、TRPV1及CGRP表达与模型组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:疏肝健脾方可能通过PKA调节IBS大鼠TRPV1、CGRP的变化,是其发挥疗效的作用机制之一.

  • 通脉宁对血管狭窄模型家兔病理学及相关因子影响

    作者:宋崇顺;任映;葛新;陈淑长;郭菁;赵凤志;戴欣;杨金铎

    目的:观察通脉宁胶囊(TMNJN)对家兔颈动脉内皮球囊损伤后引起血管狭窄模型的预防治疗作用.方法:在无菌条件下分离出颈内和颈外动脉,由颈外动脉向颈内动脉插入气囊,在恒定压力下,反复抽拉3次,造成经腔内皮损伤,连续给药21天后取出颈内动脉,肉眼和苏木素伊红染色观察动脉壁外观和病理学改变;颈总动脉取血,分别检测血a-颗粒膜蛋白(GMP-140)、内皮素1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)的变化.结果:家兔颈动脉内皮球囊损伤21天后模型组家兔颈内动脉内皮明显粗糙,管腔明显狭窄,狭窄处87.5%可见黄色或暗红色血栓,内膜明显增厚,平滑肌细胞明显增生;血浆GMP-140、ET-1、CGRP明显高于假手术组.造型家兔灌服通脉宁胶囊后,大、中、小剂量组上述指标均有不同程度的改善,特别是大剂量组改善明显,差异显著.结论:大、中剂量组家兔灌服通脉宁胶囊后对动脉球囊损伤后引起血管狭窄模型有较好的预防治疗作用,为通脉宁胶囊能治疗经皮经腔内皮损伤引起的血管狭窄提供了充实的药理学基础.

  • 神昌滴丸对中风病人ET CGRP的影响

    作者:方永奇;李艳慧

    目的:观察神昌滴丸治疗中风病的临床疗效及对内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)的影响.方法:53例中风病人随机分为神昌滴丸治疗组31例,醒脑静对照组22例.观察病人的症状、体征、毒副作用,并测定血液中ET、CGRP的含量.结果:神昌滴丸明显改善中风症状和体征;治疗前后神识、语言、面瘫、上肢瘫、指瘫、下肢瘫、趾瘫都有显著改善,其中面瘫、指瘫、趾瘫改善程度优于对照组;显效率达38.71%、总有效率达77.42%,高于对照组(18.18%、63.64%);神昌滴丸有降低ET、升高CGRP的作用;临床使用未见明显毒副作用.结论:神昌滴丸对中风病有良好的治疗作用,能舒张脑血管,改善脑供血.

    关键词: 神昌滴丸 中风病 ET CGRP
  • 电针足三里对应激大鼠血浆表皮生长因子和降钙素基因相关肽的影响

    作者:顾炳全;秦民;刘树林;黄裕新

    Objective To study the effect of electroacupuncture (EA) on epidermal growth factor( EGF),calcitonin gene-related peptide(CGRP) and gastric mucosa in stress rats. Methods 72 SD rats were randomized into 3 groups:control group,stress group and EA group.Each group were divided into 3 small groups by 1,3,5 d test time.By radioactive-immunon-assay and Guth methods, ;the changes of EGF.CGRP in plasma and ulcer index (UI) were analyzed. Results Stress group compared with control group, the level of EGF decreased (P< 0.05);but UI increased (P< 0.01).In the EA group compared with stress group, plasma EGF increased (P< 0.05);but UI decreased (P< 0.01).The changes of CGRP in test 5d was more obvious than in 1d in EA group (P< 0.01).Conclusion EA can protect gastric mucosa in stress rats, EGF, CGRP take part in this function.CGRP in EA group can be effected by test time.

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