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广西金槐种植基地环境质量检测与评价
目的：保证金槐药材质量的安全、有效、稳定、可控。方法：对种植基地的大气、土壤及水质进行采样和检测分析，评价广西金槐种植基地的环境质量。结果：种植基地的大气环境达到国家第一级标准要求，土壤环境达到国家第二级标准要求，灌溉水质达到国家标准要求。结论：广西金槐种植基地环境质量良好，符合中药材规范化种植（GAP）的要求。
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响应面法优化超声波辅助提取桂北金槐槐米中槲皮素工艺研究
目的 以桂北金槐Sophora japonica cv.jinhuai为原材料,优选出槲皮素的提取工艺,为该药材的资源利用提供依据.方法 选取槲皮素含量为因变量,在单因素试验的基础上,选取超声时间,料液比,超声功率为自变量,通过响应面法优化超声波辅助提取槲皮素工艺并进行预测分析.结果 采用HPLC测定槲皮素含量,流动相甲醇(A)-0.5％磷酸水(B)梯度洗脱(1～12min,10％ ～75％A,12～ 24min,75％ ～ 88％A,24～ 35min,88％～95％A),检测波长为360nm.佳提取工艺条件为超声时间60min,料液比为1∶10,超声功率为350W.在此条件下槲皮素的提取率预测值为9.6215％,验证值为9.97％,与预测值接近.结论 优选的提取工艺稳定可行、预测性良好,提高了金槐槐米的合理应用,为槐米槲皮素的制剂开发提供参考.
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高效液相色谱法测定不同产地和采收期对槐米中芦丁含量的影响
目的 对药用植物金槐花蕾和枝叶中的芦丁含量进行系统的测定,分析金槐不同采收期和产地对其花蕾中芦丁含量的影响.方法 采用高效液相色谱法.色谱柱:ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(4.6mm×150 mm,5μm);柱温:30℃;流动相:甲醇-0.4％磷酸水溶液(体积比40:60);流速:1mL/min;检测波长:254 nm.结果 该方法标准曲线良好,线性方程为Y =865.71X+2.54,r=0.9992.平均回收率为99.04％,RSD为2.02％符合相关规定.全州地区槐米芦丁含量一般在20％ ～40％之间,质量佳.金槐的不同器官中以槐米的芦丁含量高,枝叶的含量次之具有相应价值.不同采收期对槐米质量影响较大,含量在18.024％±3.550％之间.结论 全州产槐米芦丁含量普遍较高.不同产地和不同采收期对金槐枝叶和花蕾中的芦丁含量影响比较显著,金槐不同器官中:槐米＞枝叶＞茎＞根中的芦丁含量.槐米的佳采收期为7月22 ～27日.
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金槐ISSR-PCR反应体系的优化和引物筛选
目的 优化和建立稳定的金槐ISSR-PCR反应体系并筛选出稳定的ISSR-PCR引物.方法 采用L16(45)正交设计方法,以dNTP、Tap酶、ISSR引物、Mg2+浓度和模版DNA 5个影响因素进行4水平优化试验,并对反应体系进行验证;采用优化所得的佳反应体系进行引物筛选.结果 确立了金槐的佳ISSR-PCR反应体系:即在25μl总体积反应体系中包含10×Buffer2.5μl,MgCl2 2.5mmol·L-1,ISSR引物0.6μmol·L-1,dNTPs0.25mmol·L-1,Taq酶1.0U,模板DNA约50ng.通过佳体系进行引物筛选,获得11条适宜金槐扩增的ISSR引物.结论 经过12份金槐样品的验证,证明所建立的体系稳定可靠,可用于金槐遗传多样性、指纹图谱和标记辅助育种等方面的研究.
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金槐ISSR-PCR反应体系的优化研究
目的:优化金槐快速品种鉴定的ISSR-PCR反应体系.方法:选用UBC840[(GA)8YT]和UBC843[(CT)8RA]2套引物,比较ISSR-PCR传统扩增方法和PCR Master MIX扩增方法在鉴定金槐品种的应用效果.结果:与常规PCR扩增方法相比,采用PCR Master MIX进行金槐DNA-PCR扩增效果稳定,分析结果更加可靠,扩增效率高.结论:采用PCR Master MIX进行金槐DNA-PCR扩增的方法可做为金槐品种快速鉴定的一种分子标记技术.
关键词： 金槐 ISSR-PCR PCR Master MIX
