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痰标本中产超广谱β-内酰胺酶菌株的检测
目的了解下呼吸道感染患者痰标本中产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)细菌的检出率及分布情况.方法用纸片确证试验对住院患者痰标本中革兰阴性杆菌进行ESBL的测定.结果共检出产ESBL细菌5个属、10个种,其中,肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和阴沟肠杆菌的ESBL检出率为32.2%、14.6%和12.0%;各病区产ESBL细菌的分离率以神经内科和神经外科的重症监护病房(ICU)高,分别为34.4%和24.5%,其次为保健病房和呼吸病房,为17.5%和6.3%,其他病房为5.1%.结论神经科ICU病房是产ESBL细菌高发区.
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临床分离大肠埃希菌耐药性监测
目的了解临床分离大肠埃希菌的耐药性,为临床合理应用抗菌药物提供实验室依据. 方法采用微量稀释法对1 414例临床分离大肠埃希菌进行药物敏感性测定;超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum beta-lactamases, ESBLs)检测用微量稀释法初筛,纸片法做确证试验. 结果大肠埃希菌对18种抗菌药物的药敏结果中,耐药率＞30%的抗菌药物多达10种;其中以氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻吩、哌拉西林、环丙沙星、复方新诺明、庆大霉素、妥布霉素的耐药率高达＞50%.亚胺培南耐药率低(2.1%),其次为哌拉西林/他唑巴坦(5.2%).头孢菌素类耐药率有一定的上升趋势;产ESBLs菌株的发生率为25.5%～39.8%,平均为32.7%;产ESBLs菌株对多种抗菌药物的耐药率显著高于非产ESBLs菌株(P<0.05). 结论临床分离大肠埃希菌对多种抗菌药物的耐药率较高,尤其是产ESBLs菌株的高耐药率及多重耐药性更为明显,临床应加强对大肠埃希菌耐药性的监测并防治耐药菌株的传播流行.
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产超广谱β-内酰胺酶菌株的调查及体外药敏监测
目的监测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的耐药现状,指导临床抗感染化疗.方法采用纸片协同法检测ESBLs菌株,并对67株ESBL s菌株药敏进行分析.结果产ESBLs菌株主要为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对多种抗生素耐药,仅亚胺培南尚未发现耐药株.结论实验室应注重ESBLs的监测和报告,指导临床合理应用抗生素,进行抗感染化疗,有效地控制ESBLs菌株在医院内的播散和流行.
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ICU大肠埃希菌的感染现状及耐药性分析
目的 探讨重症监护病房(ICU)中大肠埃希菌的感染现状及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 对ICU2008年1月-2010年7月医院感染的233株大肠埃希菌(ECO)及其耐药性进行回顾性分析.结果 大肠埃希菌产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)率为88.8％；ECO对常用抗菌药物产生了耐药性,其中对氨苄西林耐药率高,达98.2％～100.0％,对亚胺培南和美罗培南敏感率高,为99.5％.结论 ICU中ECO的感染及耐药问题日益严重,需要加强ICU耐药菌监控,预防医院感染暴发流行.
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肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药分析
为了指导临床合理使用抗菌药物,防止高耐药菌株的流行和传播,尤其是控制产ESBLs菌株的流行,我们对来自不同标本中分离的178株肺炎克雷伯菌产ESBLs的情况及药敏进行分析,现报道如下.
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产超超广谱β-内酰酰胺酶大肠埃希菌的检测及耐药性分析
目的 研究产超超广谱β-内酰胺酶(SSBLs)大肠埃希菌的耐药表型与医院感染的临床特征,以指导临床合理用药.方法 收集2003年1月-2007年6月医院大肠埃希菌945株,采用API微生物鉴定系统进行鉴定;用K-B法进行药敏试验;用改良三维试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与AmpC酶,用WHONET5.3软件对药物敏感试验数据进行统计分析.结果 945株大肠埃希菌中共检测出18株产SSBLs株;ESBLs阳性与阴性株大肠埃希菌相比较,其对喹诺酮类、氨基糖苷类、磺胺类的耐药率差异有统计学意义(P＜0.05);产SSBLs株与仅产ESBLs株者相比较对以上3类抗菌药物的耐药率差异无统计学意义(P>0.05),但两者对青霉素类加酶抑制剂、头孢三代加酶抑制剂的耐药性进行比较,则差异有统计学意义(P＜0.05).结论 产SSBLs菌株及其耐药性监测,可指导临床合理使用抗菌药物,减缓细菌耐药性的产生.
关键词： 大肠埃希菌 超超广谱β-内酰胺酶 AmpC酶 超广谱β-内酰胺酶 -
大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌产ESBLs表型与基因型分析
目的 了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌发生率及主要基因型分布特点.方法 采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的纸片扩散法对临床标本中分离的110株大肠埃希菌和94株肺炎克雷伯菌进行ESBLs的表型确定试验,同时分别用聚合酶链反应(PCR)扩增法检测TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-9耐药基因,并对其产物进行序列分析.结果 产ESBLs阳性菌株的检出率分别为:肺炎克雷伯菌占36.2%,大肠埃希菌占42.7%,总检出率为39.7%;ESBLs检出模式以头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸单组为底物阳性率高,占阳性菌株的66.7%;单用头孢他啶,头孢他啶/克拉维酸一组为底物,会造成大肠埃希菌68.1%和肺炎克雷伯菌64.7%的漏检;耐药基因型分析显示,TEM、SHV、CTX-M-I、CTX-M-2、CTX-M-9基因检出率分别为54.3%、38.3%、21.O%、24.7%、70.4%,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均以CTX-M型为主要基因型,占91.4%;同时携带>2种耐药基因菌株占71.6%.结论 医院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株携带多种耐药基因严重,需引起临床的高度重视.
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肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的基因分型及耐药性变迁
目的 研究近3年分离的肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因分型及耐药性变迁.方法 选取用双纸片协同试验确认产ESBLs肺炎克雷伯菌145株,纸片扩散法(K-B)法检测对常用抗菌药物的耐药性,PCR法检测ESBLs基因并对阳性产物进行DNA测序及比对确认具体基因型别.结果 145株产ESBLs肺炎克雷伯菌,对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南耐药率逐年升高;对PCR阳性产物进行DNA测序及比对确定基因型分别为TEM、SHV型酶基因检测变化不大,而CTX-M型由以CTX-M-14型为主变迁为以CTX-M-28型为主,3年均未检测到OXA、LAP、PER、GES、SFO、VEB型ESBLs.结论 近3年分离出的产ESBLs肺炎克雷伯菌基因中CTX-M型发生明显变迁,对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南耐药率明显升高,临床应结合耐药菌株的药物敏感试验和地方流行病学特征选择佳的抗菌药物.
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产ESBLs大肠埃希菌β-内酰胺酶基因检测与耐药性分析
目的 了解临床分离的产ESBLs大肠埃希菌耐药基因存在状况和菌株的耐药性关系.方法 自临床分离20株产ESBLs大肠埃希菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测β-内酰胺酶基因TEM、SHV、LEN、CTX-M-1、CTX-M-9、VEB、GES、PER.结果 20株大肠埃希菌中β-内酰胺酶基因TEM、SHV、LEN、CTX-M-1、CTX-M-9、VEB、GES、PER阳性率分别为75.0%、20.0%、95.0%、15.0%、70.0%、5.0%、85.0%、70.0%,β-内酰胺类药物及含酶抑制剂药物的耐药率较高.结论 临床分离的产ESBLs大肠埃希菌TEM、LEN、CTX-M-9、GES、PER基因携带率高,β-内酰胺类药物耐药率较高可能与细菌携带β-内酰胺酶耐药基因有关,产ESBLs大肠埃希菌可导致克隆传播医院感染,并存在暴发性流行.
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肺炎克雷伯菌质粒β-内酰胺酶的筛选及其耐药性
目的了解头孢类耐药肺炎克雷伯菌(KPN)质粒β-内酰胺酶的分布及耐药性,寻求佳的检测方法. 方法双纸片协同试验和三维试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),表型筛选法和三维试验检测质粒AmpC酶. 结果 182株KPN中,ESBLs检出率双纸片协同试验为42.85%、三维试验为45.05%,两法总符合率为95.12%;表型筛选法显示9株(4.9%)产AmpC酶,三维试验则为7株(3.8%);4株(2.2%)同时产两种酶;产酶株对三代头孢高度耐药,对喹诺酮类、复方新诺明交叉耐药率也很高,对氨基糖苷类有一定敏感性,尚未发现亚胺培南耐药株. 结论 KPN质粒β-内酰胺酶以ESBLs为主;双纸片协同试验操作简便,为检测ESBLs常用方法;AmpC酶表型筛选法只能作为初筛,确证还需用三维试验证实.
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合肥市产超广谱β-内酰胺酶菌株CTX-M型耐药基因的初步分布
目的了解1999～2000年合肥市多所医院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中CTX-M-型耐药基因的初步分布情况. 方法根据GenBank的基本序列(CTX-M-1、 CTX-M-9和CTX-M-8)而设计3对引物,分别用这些引物对表型确认试验证实产ESBLs的细菌进行PCR扩增. 结果 98株产ESBLs细菌中,56株产CTX-M-型β-内酰胺酶,其中CTX-M-1、 CTX-M-9和CTX-M-8来源的分别为30、29和0株. 结论合肥市有产CTX-M-型β-内酰胺酶流行.
关键词： 超广谱β-内酰胺酶 CTX-M型β-内酰胺酶 聚合酶链反应 -
19株产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌同源性分析
目的 通过对19株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌进行同源性鉴定,分析产ESBLs大肠埃希菌在医院的分布及传播.方法 收集医院1个月内检出的产ESBLs大肠埃希菌菌株,采用rep-PCR法对其同源性 进行鉴定,根据检出病例是否为院内获得,分析其在医院的分布及传播.结果 共收集19株产ESBLs大肠埃希菌,其中10株为医院感染,2株为定植病例,7株为院外获得感染.19株菌均非同源.结论 医院产ESBLs大肠埃希菌为非同源菌株,医院控制措施有力,未引起产ESBLs大肠埃希菌的广泛院内传播.
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肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶表型及β-内酰胺酶基因型检测
目的 了解临床分离的肺炎克雷伯菌(KPN)产超广谱β-内酰胺酶(ESBIs)及β-内酰胺酶(BLA)基因型存在状况.方法 在2005年9月-2006年4月从住院患者中分离25株KPN,采用美国CLSI推荐的表型确证试验方法检测ESBLs,用PCR及序列分析的方法分析21种(群、簇)BLA基因bla_(TEM)、bla_(SHV)、bla_(LEN)、bla_(OKP)、bla_(CTX-M-1)群、bla_(CTX-M-2)群、bla(CTX_M_9)群、bla_(OXA-1)群、bla_(OXA-2)群、bla_(CARB)、bla_(PER)、bla_(VEB)、bla_(GES)、bla_(LAP)、bla_(DHA)、bla_(ACT/MIR)、bla_(CMY/MOX)、bla_(FOX)、bla_(CMY/LAT)、bla_(ACC).结果 25株KPN中,ESBLs阳性14株(56.0%)、阴性5株(20.0%)、"不确定"6株(24.0%);bla_(TEM)、bla_(SHV)、bla_(CTX-M-1)群、bla_(OXA-10)群、bla_(LAP)和bla_(DHA)基因阳性株数(%)分别为20株(80.0%)、1株(4.0%)、1株(4.0%)、20株(80.0%)、1株(4.0%)、8株(32.0%),而其余15种(群、簇)基因均阴性;21种(群、簇)BLA基因总阳性率为92.0%;其中HZ12593号菌株bla_(LAP-2)基因序列已登录GenBank,注册号为EU529981.结论 临床分离的KPN产ESBIs比例较高,至少存在6种BLA基因,BLA基因型以bla_(TEM)和bla_(OXA-10)群为主,KPN携带bla_(DHA)基因可以影响ESBLs表型确证试验结果.
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近4年产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌基因型分布及耐药性变化
目的了解我院近4年产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的基因型分布及耐药性性变化. 方法采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的表型确证试验,筛选出我院2000年6月～2003年8月产ESBLs肺炎克雷伯菌64株;应用PCR及DNA测序方法检测所有产酶株的TEM、SHV及CTX-M基因.应用琼脂稀释法测定11种抗菌药物对所有产酶株低抑菌浓度(MIC). 结果 64株肺炎克雷伯菌产生的ESBLs 以SHV-12和CTX-M-14为主要基因型,在产酶株中的检出率分别51.6%和46.9%,2000年只检出SHV-12基因,2001年共检出9种基因型, 2002年共检出10种基因型, 2003年共检出8种基因型;2000年未发现携带多个基因的菌株,2001年多基因携带率达50%, 2002年多基因携带率达51.6%, 2003年多基因携带率达63.6%,2001～2003年3年间多基因携带率差异无显著性;2000年的6株菌均对头孢他啶和氨曲南的耐药,对氨苄西林/舒巴坦也有较高耐药性,对其他药物很敏感,2001～2003年间的产ESBLs肺炎克雷伯菌除对亚胺培南100%敏感外,对其余10种抗菌药物出现不同程度的耐药. 结论我院肺炎克雷伯菌临床分离株中的ESBLs基因型主要为SHV-12和CTX-M-14,且携带多种β-内酰胺基因产酶株检出率高,所有产酶株均对亚胺培南敏感.
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产AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性分析与耐药基因检测
目的 了解浙江省温州、台州地区的肺炎克雷伯菌耐药性及存在状况.方法 采用VITEK 60型和VITEK 32型、肉汤稀释法测定56株产C类头孢菌素酶(AmpC)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的药敏结果;采用聚合酶链反应(PCR)分析ESBLs、质粒介导的AmpC酶和AMEs基因型.结果 产AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌首选亚胺培南(100%敏感),对其他抗菌药物均有不同程度的耐药;20株菌株100%检出TEM基因,90%检出CTX-MⅠ基因,100%检出SHV基因,85%检出DHA基因,15%检出MIR基因,90%检出不同的氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因.结论 产AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌表现多药耐药,碳青酶烯类药物亚胺培南是治疗效果好的药物,同时存在2～6种不同类型的耐药基因.
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嘉兴地区志贺菌属血清型分布及耐药性分析
目的 了解嘉兴地区志贺菌属临床分离株的分布及耐药表型特征,为临床治疗提供依据.方法 收集2006年11月-2012年10月嘉兴地区7所医院共113株志贺菌属,用ATB-EXPRESSION细菌鉴定仪及志贺菌属诊断血清鉴定到种,K-B药敏试验检测志贺菌属耐药表型,并分析其耐药性;ESBLs确认试验采用双纸片扩散对比法;试验结果采用WHONET5.3软件进行耐药性分析.结果 113株志贺菌属感染≤5岁患儿占40.7％;其中福氏志贺菌占63.7％,宋内志贺菌占36.3％;其中2006-2009年福氏志贺菌占80.0％,宋内志贺菌占20.0％;2010-2012年福氏志贺菌占45.3％,宋内志贺菌占54.7％;志贺菌属亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星、耐药率均为o;对氨苄西林和磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药率较高,分别为95.6％、71.7％;产ESBLs志贺菌检出率61.1％,69株产ESBLs志贺菌采用CLSI 2010年版和2009年版分别对头孢曲松、头孢他啶、头孢噻肟的耐药性进行判定,其耐药率分别为98.6％和84.1％、34.8％和20.3％、34.8％和88.4％,差异有统计学意义.结论 嘉兴地区志贺菌属感染者以5岁以下的患儿为主,2009年后宋内志贺菌呈上升趋势,产ESBLs志贺菌呈多药耐药性,采用2010年CLSI折点,有利于临床合理选用抗菌药物.
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ICU血液中大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶基因分型及与整合子之间的关系
目的 对医院ICU住院患者血液中分离的大肠埃希菌进行检测及药敏分析,同时测定ESBLs型别及整合子,为指导和治疗大肠埃希菌引起的败血症感染提供依据.方法 收集医院2007年5月—2010年5月ICU患者血液中分离的142株大肠埃希菌,采用VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定仪对菌株进行鉴定及药敏试验,采用WHONET 5.4软件进行药敏结果分析,PCR法检测ESBLs基因型别及其整合子携带率,比较分析各种基因型比率特征和差异.结果 142株大肠埃希菌中ESBLs阳性菌占58.45％,ESBLs阳性菌株中CTX-M基因检出比例大,检出率为50.6％,其中CTX-M-1基因22株阳性,CTX-M-8基因15株阳性,CTX-M-9基因10株阳性；TEM基因和SHV基因检出率其次,分别占22.7％与16.9％；有8株产≥2种ESBLs,有10株未能确定ESBLs基因型；83株大肠埃希菌中检出49株携带有intl 1基因,携带率达59.03％,未检测到intI 2和int I 3基因.结论 ICU患者血液中分离的大肠埃希菌产ESBLs率比例高,基因型以CTX-M型为主,携带多种ESBLs基因的菌株也逐渐增多,多伴随携带intⅠ 1基因.
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泌尿系统感染大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌产酶及耐药趋势研究
目的 分析泌尿系感染大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的产酶状况以及耐药性的变化,以指导临床医师合理使用抗菌药物.方法 收集2010年1月1日-2012年12月31日医院1 974例住院及门诊患者送检的中段尿标本中培养分离出的菌株,采用法国生物梅里埃公司ATB型细菌分析系统对菌株进行鉴定和药敏分析;应用WHONET5.6软件进行结果统计分析.结果 3年从泌尿系统感染标本中分离出大肠埃希菌242株,其中产ESBLs菌158株,占65.3％;分离出肺炎克雷伯菌224株,其中产ESBLs菌88株,占39.3％;大肠埃希菌对环丙沙星及二、三代头孢菌素耐药率均＞53.6％,肺炎克雷伯菌对环丙沙星及二、三代头孢菌素耐药率均＞35.7％;两种菌均未发现耐碳青霉烯类药物的菌株.结论 泌尿系感染的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌具有多药耐药性,临床医师应重视细菌学培养,用药敏试验结果指导临床合理地应用抗菌药物,以减少产ESBLs菌的产生.
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腹腔和胆道分离产ESBLs大肠埃希菌的酶基因型及分子流行病学检测
目的 了解腹腔和胆道分离的大肠埃希菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型及产酶菌株的流行情况.方法 采用聚合酶链反应扩增TEM、SHV、CTX-M型ESBLs基因并测序,用ERIC-PCR方法进行分子流行病学研究.结果 产ESBLs大肠埃细菌中,TEM-1+CTX-M-1组+CTX-M-8组、CTX-M-2组+CTX-M-9组各3株,CTX-M-8组+CTX-M-9组2株,TEM-1型为5株,TEM-1+CTX-M-1组、TEM-1+CTX-M-8组、TEM-1+CTX-M-9组、CTX-M-2组+CTX-M-9组、CTX-M-8组、SHV-5+TEM-1、SHV-1、TEM-1+CTX-M-2组+CTX-M-8组+CTX-M-9组各1株,4株细菌PCR检测为阴性,3株产CTX-M-2组+CTX-M-9菌株中.两株ERIC-PCR谱型相近.结论 腹腔和胆道分离的大肠埃希菌中,ESBLs基因型以CTX-M型为主;少数产酶菌株间存在克隆传播现象.
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大肠埃希菌耐药性分析及生物被膜形成能力研究
目的 探讨医院产ESBLs大肠埃希菌(ECO)临床分离株的流行现状、耐药性及其生物被膜形成能力,为医院感染控制和临床诊疗感染性疾病提供依据.方法 采用法国生物梅里埃公司的VITEK-2 Compact全自动微生物分析仪对菌株进行鉴定和药物敏感性分析,采用结晶紫半定量方法检测菌株的生物被膜形成能力.结果 医院ECO检出前3位病区分别为普外病区、肾脏病区和呼吸病区；检出前3位标本分别为痰、尿和血液；466株ECO临床分离菌株中,产ESBLs菌株297株占63.73％,非产ESBLs菌株169株占36.27％；对＞3类抗菌药物耐药ECO 357株占76.61％,其中,产ESBLs菌株287株占61.59％,耐药率高的为氨苄西林,其次为头孢唑林和头孢曲松；环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率均＞60.0％；已出现耐亚胺培南ECO;对于临床常用的青霉素类、头孢菌素类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类和单酰胺类抗菌药物,与非产ESBLs菌株相比,产ESBLs菌株的MIC值与耐药率显著升高；而对头霉素类、呋喃类、含酶抑制剂的哌拉西林/他唑巴坦和碳青霉烯类药物的敏感性产ESBLs组与非产ESBLs组比较差异无统计学意义；＞90.00％的ECO具有生物被膜形成能力,生物被膜形成量以中量为主,不同标本来源的菌株之间生物被膜形成能力差异无统计学意义.结论 医院ECO产ESBLs比例高,生物被膜形成能力强,呈现多药耐药的特征,医院应加强产ESBLs菌株的分子流行病学调查和感染控制,避免医院感染的暴发流行.
