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荭草药材指纹图谱的研究
目的:采用反相高效液相色谱法建立荭草药材的指纹图谱.方法:用InersilODS-3色谱柱,乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱;流速1.0ml·min-1;检测波长300nm.结果:以梯度洗脱得到的色谱图各色谱峰分离较好,达到指纹图谱的技术要求.结论:采用HPLC指纹图谱检测技术可有效控制荭草药材的质量.
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HPLC测定不同采收期荭草中荭草素、异荭草素的含量
目的:建立高效液相色谱法同时测定不同采收期荭草中荭草素、异荭草素含量的方法.方法:色谱柱为AgilentC18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈-0.1％磷酸水梯度洗脱,检测波长350 nm,流速1.0 mL· min -1.结果:荭草素在0.068 2 ～0.682 μg(r=0.999 7)线性关系良好,平均回收率为99.94％,RSD 1.08％；异荭草素在0.386～3.860 μg(r=0.999 3)线性关系良好,平均回收率为99.67％,RSD 1.09％.结论:方法简便、快捷、准确的特点,可用于荭草药材的质量控制.
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薄层色谱法鉴别荭草中的黄酮类化学成分
目的:建立荭草中黄酮类化学成分的鉴别方法.方法:利用酸水解得到黄酮苷元的提取条件,以槲皮素和山奈酚为对照品,增加了荭草中黄酮类化学成分的薄层色谱鉴别.结果:在供试品色谱与两种对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的清晰荧光斑点,分离度高.结论:所建立的方法 能很好地对荭草中的黄酮类成分进行质量控制.
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荭叶心通软胶囊中主要活性成分的大孔吸附树脂分离纯化工艺研究
目的:采用大孔吸附树脂法,探讨荭叶心通软胶囊中荭草、山楂叶活性成分的提取纯化工艺条件.方法:以荭草素、异荭草素和金丝桃苷为指标,对5种树脂进行了筛选,并对选定的D101大孔树脂富集纯化荭草素、异荭草素及金丝桃苷的工艺条件进行考察.结果:D101型树脂对荭草、山楂叶中荭草素、异荭草素及金丝桃苷的吸附性能良好,在所确定的工艺条件下,荭草素、异荭草素和金丝桃苷转移率均大于91%,总固体物较树脂处理前减少60%以上.结论:D101大孔吸附树脂能有效富集纯化荭草、山楂叶中的活性成分.
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荭草药材的质量研究
目的:建立荭草药材的定性、定量检测方法.方法:采用TLC鉴定荭草药材中荭草素、异荭草素、原儿茶酸和没食子酸,HPLC测定荭草中荭草素、异荭草素的质量分数.结果:采用Diamonsil C18色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液(18∶82)为流动相,可使异荭草素、荭草素达到基线分离,异荭草素进样量在0.075～0.90μg、荭草素在0.041～0.49μg呈良好的线性关系,异荭草素和荭草素的平均回收率分别为98.8%,99.5%,RSD分别为2.1%,1.7%(n=9).结论:本方法可以作为荭草药材的定性、定量检测方法.
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荭草花化学成分的研究
目的:研究荭草Polygonum orientale花活性部位的化学成分.方法:应用色谱技术分离纯化,根据化合物理化性质和波谱数据鉴定其结构.结果:分离并鉴定了个化合物,分别为高朦胧木素(alphitonin,1),3,4-二羟基苯甲酸甲酯(methyl 3,4-d.hydmxybenzoate,2),罗布麻宁(apocynin,3),山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷(kaempferol-3-O-β-D-glucoside,4),1,3,5-三羟基苯(1,3,5-trihydroxybenzene,5),3,3'-三甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-葡萄糖苷(3,3'-dimethoxyellagic-acid-4-O-β-D-glucoside,6),山柰素-3-O-β-L-鼠李糖苷(kaempferol-3-O-α-L-rhamnoside,7),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(quercetin-3-O-α-L-rhamnoside,8),山柰素(kaempferol,9).结论:化合物2,4,5为首次从该种植物中分离得到,化合物1,3为首次从该属植物中分离得到.
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荭草化学成分的研究
目的:研究荭草Polygonum orientale有效部位的化学成分.方法:采用硅胶和聚酰胺柱色谱进行分离,根据化合物理化性质和光谱数据鉴定其结构.结果:分离得到6个化合物,分别为杨梅苷(myricitrin Ⅰ)、木犀草素(luteolin Ⅱ)、没食子酸(gallic acid Ⅲ)、儿茶素(catechin Ⅳ)、原儿茶酸(protocatechuic acid Ⅴ)、对-羟基桂皮酸(p-hydroxycinnamic acid Ⅵ).结论:6个化合物均为首次从该种植物中分离得到.
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荭草对H2O2诱导的心肌细胞氧化损伤保护作用的谱效关系研究
目的:研究荭草中花穗、带叶嫩枝和粗茎对H2O2诱导H9c2心肌细胞氧化损伤的保护作用,探讨其抗心肌缺血的药效物质基础.方法:建立荭草中花穗、带叶嫩枝和粗茎的UPLC指纹图谱,对色谱峰进行归属确认,同时观测荭草中花穗、带叶嫩枝和粗茎不同配比组合物对心肌细胞氧化损伤的保护作用(应用MTF法作为浓度筛选和细胞存活率判定指标,并检测丙二醛含量),将各组合物活性信息与其相应的UPLC指纹图谱化学信息进行相关性分析研究,推测药效物质基础.结果:荭草中带叶嫩枝和花穗对H2O2诱导H9c2心肌细胞氧化损伤具有明显的保护作用,谱效相关性研究发现,3～5,11 ～14,18 ～ 19,21 ～ 25号色谱峰与抗氧化活性呈正相关.结论:通过谱效研究,推测了荭草抗氧化损伤的活性成分,为荭草药材深层次研究开发奠定一定的实验基础.
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荭草提取物的肠外翻吸收研究
利用肠外翻模型研究荭草提取物不同剂量在大鼠不同肠段的体外肠吸收特征.采用UPLC-MS/MS检测不同肠段中原儿茶酸,异荭草素,荭草素,牡荆素,木犀草苷,槲皮苷及山柰素鼠李糖苷含量,比较荭草提取物中各化学成分在各肠段的吸收情况,并计算提取物中各成分的吸收参数,用SPSS 13.0统计学软件对数据进行分析处理,分析考察对吸收参数影响的显著性,进一步分析其在不同部位的吸收特征.荭草提取物不同浓度时原儿茶酸等7种成分在不同肠段的吸收均为线性吸收,其回归相关系数(R2)均大于0.95,符合零级吸收速率,肠吸收速率(Ka)随着荭草提取物浓度增加呈线性增加(R2＞0.95),表明各成分以被动扩散机制吸收;所考察成分在不同肠段肠囊的吸收速率存在不同程度的差异,各成分在各肠道的吸收趋势为十二指肠、空肠、回肠大于结肠.肠囊对荭草中化学成分的吸收透过有选择性,外翻肠囊法可评价其多成分的肠吸收特性.
关键词： 荭草 肠外翻 吸收 UPLC-MS/MS 吸收速率常数 -
荭草提取物抗炎镇痛作用实验研究
目的 探讨荭草提取物的抗炎镇痛作用.方法 采用二甲苯致小鼠耳肿胀、蛋清致大鼠足跖肿胀2种急性炎症模型以及大鼠棉球肉芽肿慢性炎症模型,研究荭草水提物和醇提物ig给药的抗炎作用.采用热板法和醋酸扭体法致痛,研究荭草水提物和醇提物ig给药的镇痛作用.结果 与模型组相比,荭草水提物和醇提物高、低剂量(生药7.5、3.75 g/kg)组显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀(P＜0.01),明显抑制蛋清所致大鼠足跖肿胀(P＜0.05、0.01),明显抑制大鼠棉球肉芽肿(P＜0.01).荭草水提物和醇提物高、低剂量组给药后明显延长热板所致小鼠的痛阈值,与模型组比较差异显著(P＜0.01);荭草水提物和醇提物高、低剂量组明显减少醋酸所致小鼠扭体反应次数,与模型组比较差异显著(P＜0.01).荭草水提物高、低剂量组给药后与相同剂量醇提物相比,各项指标差异显著(P＜0.05、0.01).结论 荭草提取物ig给药具有抗炎、镇痛作用,且水提物作用强于醇提物.
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黔产辣蓼及其混淆品高效液相指纹图谱研究
目的 研究并建立黔产辣蓼Polygonum hydropiper药材指纹图谱.方法 采用HPLC法,Hypersil ODS2 C18柱,以乙腈-0.2％磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为260 nm,柱温25℃,对22批不同产地辣蓼药材及其混淆品进行检测.结果 建立辣蓼药材HPLC指纹图谱共有模式,标定12个共有峰.并对15批不同产地辣蓼药材及其7批混淆品进行了相似度比较.15批辣蓼药材相似度均大于0.95,7批混淆品均小于0.50.结论 辣蓼药材HPLC指纹图谱具有重复性好、特征性强、方法简便等特点,可作为黔产辣蓼药材的识别方法.
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注射用复方荭草冻干粉针与常用输液配伍稳定性研究
目的 研究注射用复方荭草冻干粉针与0.9％氯化钠注射液和5％葡萄糖注射液的配伍稳定性.方法 测定室温下6h内配伍溶液的外观性状、色泽、pH值、不溶性微粒,以及异荭草素、荭草素和野黄芩苷的含有量及指纹图谱的变化.结果 注射用复方荭草冻干粉针在室温条件下,6h内与0.9％氯化钠注射液和5％葡萄糖注射液配伍具有良好的稳定性,各检查项目均无明显变化.结论 注射用复方荭草冻干粉针在室温条件下6h内可与上述两种输液配伍使用.
关键词： 注射用复方荭草冻干粉针 荭草 配伍稳定性 氯化钠注射液、葡萄糖注射液 -
贵州产荭草药材指纹图谱的模式识别研究
目的:研究贵州产荭草药材指纹图谱的模式识别方法.方法:利用HPLC-DAD方法,以贵州不同产地、不同采收期荭草药材为研究对象,对20批药材进行了指纹图谱分析,并通过对照品与药材样品的色谱峰保留时间一致性和紫外光谱相似性比较,对其主要色谱峰进行初步归属,同时运用聚类分析及主成分分析对其进行模式识别研究.结果:20批荭草药材的指纹图谱有12个特征共有峰,并指认了9个色谱峰.通过聚类分析和主成分分析将20批药材按采收期不同分为3类.结论:贵州产荭草质量较为稳定,荭草指纹图谱的模式识别直观、可行,为荭草的生产和质量控制提供了依据.
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荭草药材指纹图谱的研究
目的:采用反相高效液相色谱法建立荭草药材的指纹图谱.方法:用Inersil-ODS-3色谱柱,乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱;流速1.0 mL·min-1;检测波长300 nm.结果:以梯度洗脱得到的色谱图各色谱峰分离较好,达到指纹图谱的技术要求,10批样品相似度大于0.9.结论:采用HPLC指纹图谱检测技术可有效控制荭草药材的质量.
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荭草DNA提取方法实验研究
目的 利用不同方法对荭草DNA提取,比较提取质量的差异,为研究药材的遗传多样性、种类鉴定和基因指纹图谱的构建等提供优质基础.方法 采用改进的CTAB法和SDS法提取荭草叶片基因组DNA,利用琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法测定样品OD260/OD280的比值,检测所提DNA的纯度和质量.结果 采用CTAB法提取的荭草基因组DNA样品的纯度和浓度均高于SDS法,其DNA的OD260/OD280值为1.801～1.993,CTAB法所提的DNA泳带分布较集中,无拖尾现象,其DNA浓度能够满足RAPD、SSR/ISSR扩增模板的需求.结论 改良CTAB法是提取荭草基因组DNA的佳方法.
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荭草花水溶性化学成分的研究
目的 研究荭草Polygonum orientale花活性部位的化学成分.方法 采用溶剂提取,应用色谱技术分离纯化,根据化合物理化性质和光谱数据鉴定其结构.结果 分离并鉴定了6个化合物,分别为N-顺式-对羟基苯乙基阿魏酰胺(N-cis-feruloyltyramine,1);N-反式-对羟基苯乙基阿魏酰胺(N-trans-feruloyltyramine,2);N-p-香豆酰酪胺(paprazine,3);5,7-二羟基色原酮(5,7-dihydroxychromone,4);3,5,7-三羟基色原酮(3,5,7-trihydroxychromone,5);5,7,4'-三羟基二氢黄酮醇(5,7,4'-trihydroxy-dihydroflavonol,6).结论 化合物1～3为首次从该种植物中分离得到.
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荭草的血清药物化学初步研究
目的:建立对荭草提取物血清药物化学研究方法,探讨荭草提取物的药效物质基础.方法:采用血清药物化学研究方法,在建立荭草提取物超高效液相(UPLC)指纹图谱的基础上,通过比较荭草提取物、荭草给药后含药血清、空白血清UPLC指纹图谱,找到大鼠灌胃荭草提取物后不经代谢的原型物质.结果:大鼠灌胃荭草提取物后,从含药血清中发现了18个代谢产物,其中1个为大鼠空白血清中存在的内源性物质,5个为荭草提取物中原型吸收入血的成分,其余成分可能为原型成分在体内的代谢产物.结论:应用UPLC建立快速测定大鼠灌胃荭草提取物后血清药物成分,其中17个代谢产物可能为荭草口服吸收后在体内的代谢产物,对其深入研究将为建立荭草谱效关系模型,确定荭草的药效物质与代谢作用机制奠定基础.
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荭草煎剂对小鼠抗炎镇痛作用初探
目的 探讨荭草的抗炎、镇痛作用.方法 采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀,观察高、中、低剂量荭草水煎剂的抗炎作用；采用热板法致痛,观察高、中、低剂量荭草水煎剂的镇痛作用.结果 高、中、低剂量荭草水煎剂明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓的肿胀度,与生理盐水对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),与赖氨匹林组比较差异无统计学意义(P＞0.05).高剂量荭草水煎剂显著提高热板法所致小鼠的痛阈值,与生理盐水对照组比较和自身给药前比较差异有统计学意义(P＜0.05)；中剂量荭草水煎剂给药后30、60 min显著提高热板法所致小鼠的痛阈值,与生理盐水对照组比较和自身给药前比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 荭草水煎剂具有抗炎、镇痛作用.
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反向高效液相色谱法测定荭草中原儿茶酸的含量
荭草(Herba Polygonl Orientalis)别名水荭草、红蓼、东方蓼,为蓼科植物荭草Polygonum orientale L.的干燥果穗及带叶茎枝,是贵州少数民族用药之一[1].
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基于耐缺氧能力的注射用复方荭草冻干粉生物活性测定方法
目的:建立可用于注射用复方荭草冻干粉针生物活性质量控制测定的方法.方法:将小鼠随机分为正常对照组、盐酸异丙肾上腺素组、盐酸川芎嗪组及注射用复方荭草冻干粉针高、中、低剂量组,每组10只.除对照组外,其余各组小鼠均皮下注射盐酸异丙肾上腺素建立心肌缺氧模型,再分别给予盐酸川芎嗪和不同剂量的注射用复方荭草冻干粉针,测定小鼠的存活时间.并对10批注射用复方荭草冻干粉针生物活性进行测定.结果:与盐酸异丙肾上腺素组比较,注射用复方荭草冻干粉针连续给药3d,可明显延长缺氧小鼠的存活时间,且10批注射用复方荭草冻干粉针样品均显示出较好的生物活性.结论:小鼠耐缺氧测定法准确、可靠,可通过小鼠耐缺氧测定法有效控制注射用复方荭草冻干粉针的质量.
