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正交设计法优选敷胸膏的提取工艺
目的：采用正交设计优选敷胸膏中有效成分的提取工艺。方法采用L9（34）正交实验，以大黄素、大黄酸和出膏率为考察指标，利用HPLC法测定大黄素、大黄酸的含量，考察乙醇浓度、乙醇用量、提取次数及提取时间等因素的影响，优选敷胸膏的佳提取条件。结果佳提取工艺为：50%乙醇2倍量回流提取2次，每次提取1 h。结论优选提取工艺多种有效成分的提取率均较高，适用于生产。
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敷胸膏对流感病毒肺炎大鼠肺组织JNK,MKK4表达的影响
目的:探讨清肺通络敷胸膏对流感病毒肺炎大鼠肺组织中c-Jun氨基末端激酶(JNK),丝裂原活化蛋白激酶激酶4(MKK4)表达的影响,并探讨其作用机制.方法:幼龄Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、敷胸膏高、中、低剂量组(21.0,10.5,5.25g·kg-1),每组10只.除正常组外,其余各组采用甲型流感病毒鼠肺适应株A/FM/47(H1N1)0.1 mL滴鼻建立流感病毒肺炎模型,造模成功后各治疗组给予不同剂量敷胸膏治疗5d.苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肺组织病理变化,免疫组化检测大鼠肺组织中JNK及MKK4的蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)进一步检测肺组织中JNK及MKK4 mRNA表达水平.结果:HE染色结果提示,与模型组比较,敷胸膏高、中、低剂量组能明显改善流感病毒肺炎大鼠肺组织损伤程度,随剂量增大而逐渐增强.免疫组化与Resl-time PCR结果显示,与正常组比较,模型组JNK,MKK4蛋白及mRNA表达显著增强(P＜0.05);与模型组比较,敷胸膏高、中、低剂量组JNK,MKK4蛋白及mRNA表达均显著减弱(P＜0.05).结论:敷胸膏对流感病毒肺炎大鼠的保护作用机制可能与下调MAPKs信号通路中JNK,MKK4的表达有关.
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HPLC法测定敷胸膏中6种药效成分的含量
目的:建立HPLC法测定敷胸膏中黄芩苷、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酸的含量.方法:采用高效液相色谱法.色谱条件为Agilent TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈--0.05％磷酸水溶液为流动相:检测波长:254 nm.柱温:30℃;流速:1.0 mL/min.结果:黄芩苷、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酸分别在0.1700 ～4.2500 μg、0.0180 ～0.4500 μg、0.0255 ～ 0.6375μg、0.0387 ～0.9675μg、0.0052～0.1308μg、0.0205～0.5125 μg范围内线性关系良好(r分别为0.9998、0.9999、0.9999、0.9999、0.9997、0.9998);平均加样回收率分别为97.57％、98.29％、98.08％、98.01％、97.78％、97.44％;RSD分别为2.01％、1.37％、1.86％、1.63％、1.35％、1.53％.结论:该方法可用于测定黄芩苷、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酸的含量,方法操作简便、准确、重复性好,为复方质量标准评价提供了依据.
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外敷敷胸膏对RSV肺炎大鼠肺组织TLR4及NF-κB p65的影响
目的 观察敷胸膏对RSV肺炎大鼠组织NF-κB p65及TLR4的表达的影响.方法 Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、君臣组(敷胸膏中君臣药组成)、敷胸膏组,每组10只,除正常组外,均采用鼻腔接种RSV Long株法诱导幼龄大鼠肺炎,正常组用不合病毒的生理盐水滴鼻.于感染当天,君臣组和敷胸膏组分别于大鼠背部外敷进行干预.观察各组大鼠的一般状态、肺组织形态学,各组大鼠在感染7天后处死,采用免疫组化染色法检测各组大鼠肺组织中NFB p65和TLR4的表达.结果 与正常组相比,模型组大鼠的肺组织中NF-κB p65、TLR4的表达显著增高(P＜0.01),敷胸膏组和君臣组中NF-κB p65、TLR4的表达与模型组比较均明显降低(P＜0.05),敷胸膏组作用较君臣组明显,具有显著的差异性(P＜0.05).结论 敷胸膏干预RSV肺炎大鼠的作用机制可能与抑制大鼠肺组织中NF-κB p65、TLR4表达有关.
关键词： 敷胸膏 呼吸道合胞病毒性肺炎 NF-κB P65 TLR4 实验研究
