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恙虫病伴血液系统损害68例骨髓象分析
2002年1月-2005年12月笔者共收治恙虫病患者412例,发现有血液系统损害101例(24.51%),其中68例做了骨髓检查,现分析总结如下.
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广州市613例恙虫病病例的流行病学和临床特征分析
目的 探讨2015年广州市613例恙虫病病例的流行病学和临床特征.方法 采用临床流行病学研究方法,收集2015年广州市多家医疗机构收治的恙虫病病例613例,分析其流行病学特征、临床表现、辅助检查及治疗转归情况.结果 广州地区恙虫病全年均有发病,以5～9月为发病高峰,6月发病稍有下降.农民、家政家务及待业者为主要患病人群.常见症状为高热96.9％ (592/613),皮肤焦痂或溃疡77.4％ (467/603)、淋巴结肿大30.0％(181/603)及皮疹27.8％ (168/605).伴有肝功能受损者占60.o％(355/592),肾脏功能受损者占27.2％ (62/228).初诊时误诊率达10.3％(63/613).氯霉素、四环素、大环内酯类抗生素的治疗效果较好.恙虫病及时诊断恢复良好,仅1例疴情进展迅速,导致多器官功能衰竭死亡.结论 广州市2015年恙虫病以夏季高发,以农民多见,临床表现复杂多样,容易误诊.
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某战区部分驻地秋冬型恙虫病临床与流行病学特征分析
目的 了解某战区驻地恙虫病的临床与流行病学特征,为指导部队做好防治工作提供科学依据.方法 选择临床确诊恙虫病患者进行个案调查,并填写流行病学调查表.同时采集患者静脉血液,分离血清,做血清学检验,并结合课题组的文献和相关资料进行整理统计分析.结果 某战区部分驻地恙虫病的临床与流行病学特征与我国南方的夏季型不尽相同,主要具有以下特点:①患者临床表现以发热和全身中毒症状为主,溃疡焦痂约占54.81%;⑦合并器官损害发生率为45.93%,其中有多个器官损害(multi-organs lesion,MOL)者占26.67%;③流行季节9~12月,占发病数85.19%(115/135)以上,属秋冬型;④病例以散发为主,偶见局部小暴发;⑤患者以青壮年农民居多,占84.44%;⑥流行血清型以Gilllam为主,并可能伴有其他型混合感染.结论 基本模清某战区部分驻地秋冬型恙虫病临床与流行病学特征,提示当地军民应重视本病的防治工作.
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PCR/SSCP在恙虫病东方体基因分型中的应用
目的采用优化聚合酶链反应/单链构象多态性分析(PCR/SSCP)方法分析恙虫病东方体(Orientia tsutsugamushi,Ot)基因型的各项条件.方法对恙虫病东方体山东分离株、小盾纤恙螨匀浆及恙虫病人全血中提取的Ot Sta56基因进行分析.采用PCR/SSCP检测,并与Nested PCR基因分型的结果进行比较.结果山东地区35份标本提取的Ot-DNA群引物扩增产物呈现出2种不同的单链构象图谱,其中33份与国际参考株Gilliam,Karp,Kato均不相同,应属这3型以外的一种基因型,经Nested PCR分型证实为Kawasaki型;2份与Karp株相同.表明山东地区恙虫病东方体至少存在2种型别.检测结果与Nested-PCR基因分型结果相符.条件优化以8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,常温下,200V电泳3 h获得的电泳结果较为理想,并易于操作.结论PCR/SSCP条件优化后可用于快速分析恙虫病东方体基因型,且操作简便,结果准确.
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应用PCR/SsCP分析恙虫病东方体分离株基因型的研究
目的对分离自辽宁、吉林地区的6株恙虫病东方体目的基因进行分析研究,并与国际参考株进行比较.方法经PCR/SSCP检测,呈现出2种不同的单链构象图谱:HCAa9202株、HCAp9203株及HCM9501株图谱与Gilliam参考株相同,而KDCt9402株、KDCp9403株及KDCt9404株的图谱则与Karp参考株相同.结果辽宁、吉林地区恙虫病东方体分离株至少存在2种型别.结论应用PCR/SSCP方法分析恙虫病东方体基因型,简便、经济、省时、结果准确.
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恙虫病东方体黑龙江分离株的PCR/RFLP分析
目的鉴定恙虫病东方体黑龙江分离株的基因型.方法采用PCR/RFLP技术对恙虫病东方体黑龙江分离株的sta56基因及其酶切图谱进行分析研究,并与国际参考株进行比较.结果 6株分离株的PCR特异性产物经Hinf Ⅰ、Hha Ⅰ、Rsa Ⅰ酶切后呈现3种不同的RFLP图谱;MSAa9301株、MSAa9303株、MSAa9304株及MSAp9305株与Gilliam参考株具有相似的酶切图谱,但缺乏Hinf Ⅰ的酶切位点,属于Gilliam型;MSAa9306株与Karp参考株具有相同的酶切图谱,属于Karp型;MSAp9302株与Kato参考株具有相同的酶切图谱,属于Kato型.结论黑龙江密山地区恙虫病东方体分离株存在Gilliam、Karp和Kato 3种型别.
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山东省泰安市鼠类自然感染恙虫病东方体调查
目的 了解山东省泰安地区鼠类自然感染恙虫病东方体(Ot)的情况.方法 应用巢式PCR对山东省泰安地区采集的鼠类标本Ot-Sta56kDa基因片段进行检测,对阳性标本进行序列分析.结果 在泰安地区秋冬季捕获类鼠68只,阳性率为5.88%;不同鼠种间阳性率差异无统计学意义(Fisher X2=4.714,P=0.062).其中3只鼠胚胎标本均未检出Ot.序列同源性分析显示,2只鼠脾标本(08P,53P)的核苷酸序列与Sdu-1型的核苷酸序列同源性高,为99.77%;其次,与Taguchi和Oishi型的同源性均为95.98%,与Kanda和Kawasaki型的同源性均为95.74%.而另2只鼠类标本(55P,56P)的核苷酸序列与TA686型的同源性高,分别为86.27%和77.11%.系统发生树分析也显示.08P和53P与Sdu-1型在同一分支,它们又与Kawasaki、Kanda、Tagnchi和Oishi型共处于同一分支;而55P和56P与TA686型在同一分支.结论 山东省泰安地区鼠类存在Ot自然感染.该地区Ot的基因型较为复杂.不仅存在与临沂地区相同的Ot型,该型与日本的Kawasaki型相似;同时还存在与泰国的TA686型相似的Ot型.
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恙虫病23例误诊分析
恙虫病是由恙虫病立克次体(又称恙虫病东方体)引起的一种急性自然疫源性传染病,流行有地域性.确诊病例治疗过程一般较顺利,但本病误诊率较高,往往会延误治疗,临床应给予重视.现就笔者诊治过的误诊病例23例进行回顾分析,探讨误诊原因.
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恙虫病的实验室诊断技术及新进展
恙虫病的实验室诊断对恙虫病的防治工作有着重要的实际意义.该文主要介绍了多种实验室常用的恙虫病诊断技术及研究进展.
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高湖纤恙螨叮刺和经卵传递恙虫病东方体的研究
目的 研究高湖纤恙螨叮刺和传播恙虫病东方体(Ot)的能力.方法 螨叮人传病试验是将2只未食高湖纤恙螨幼虫放在受试者(笔者本人)的前臂屈侧上,罩上透明塑料小盖,在解剖镜下观察螨的活动.经卵传递Ot试验是将20 ～ 40只高湖纤恙螨未食幼虫放在1只小白鼠耳中3～5d,每天观察鼠的情况,病鼠或死鼠予以解剖,镜检Ot.结果 恙螨叮人20 d后使人患恙虫病并从血中分离到Ot.鼠体经卵传递Ot试验亦获得成功.阳性鼠均有典型症状、显著病变,并检出Ot.结论 结果表明高湖纤恙螨可作为恙虫病的传播媒介.
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浙江中部地区啮齿动物恙虫病东方体分子流行病学调查
目的 了解浙江中部啮齿动物中恙虫病东方体的自然感染状况及其分子生物学特性.方法 2015年3—11月在义乌地区3个自然村的野外和居住地捕获啮齿动物687只;取肝脾行PCR检测恙虫病东方体groEL基因并测序;采用MEGA7.0软件大似然法进行系统发生聚类分析,采用RelTime方法生成的时间树比较义乌菌株序列与祖先分歧的发生时间.结果 687只啮齿动物检出恙虫病东方体感染26只,总体感染率为3.78％,其中3—7月捕获的352只groEL基因均阴性,8—11月份捕获的335只中有26只阳性.9—10月份感染率较高,分别为11.32％(6/53)和10.00％(9/90).感染率总体呈上升趋势(x2趋势=25.85,P<0.01).4个优势鼠种黑线姬鼠、黑腹绒鼠、针毛鼠和臭鼩鼱存在恙虫病东方体感染,黑线姬鼠感染率高为8.67％(13/150).26只阳性动物中,25只捕获于野外,25只捕获于大陈镇.系统发生分析表明义乌地区啮齿动物中恙虫病东方体groEL基因变异较大,可能存在Kato、Boryong、O3和其他尚不能确定的基因型,时间树分析显示义乌不同菌株出现的时间不一致.结论 浙江中部啮齿动物中存在恙虫病东方体感染,其groEL基因分布在不同支系.
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3例恙虫病临床报告
恙虫病是恙虫病东方体所致的自然疫源性疾病,临床上以突然发病、高热、淋巴结肿大、皮疹及恙螨叮咬部位焦痂或溃疡为主要表现,全身各脏器、系统也可能受到损害,表现多种多样,容易误诊.该病多发于我国东南、西南沿海地区,浙江省也是该病的自然疫源地之一.遂昌县是恙虫病低流行区,恙虫病较少发生.我们对3例恙虫病病例临床资料进行分析,了解该病在遂昌县的发病特点、治疗方法及预防措施,现报告如下.
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6例恙虫病临床特点及误诊分析
恙虫病(又称丛林斑疹伤寒)是由恙虫病东方体感染引起的一种急性自然疫源性传染病,临床表现为叮咬部位的焦痂或溃疡形成,发热、头痛、结膜充血、皮疹、淋巴结肿大、肝脾大及周围血白细胞减少为主要特征,间或引起多脏器损害[1,2].恙虫病主要分布在亚太地区的热带和亚热带国家[3],在我国主要分布在东南沿海的省市和地区,近年来疫区有进一步扩大趋势,江苏省1984年报告发现有恙虫病[4],本组病例则为常州地区首次报告恙虫病,现就2011年11月下旬本院收治的6例恙虫病患者临床资料整理报告如下.
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一起恙虫病爆发的流行病学调查
恙虫病是由恙虫病东方体(Orientia tsutsuga-mushi)引起的自然疫源性疾病,又名丛林斑疹伤寒,在我国主要以东南、西南地区及沿海岛屿发病率较高[1].近年随着全球气候变暖,恙虫病疫区迅速扩展至东北、华北等地.恙虫病疫区在我国北方的界限已从北纬30°扩展为北纬40°[2].2008年10月21日,安徽怀远县疾病预防控制中心接到疑似恙虫病报告,经流行病学调查和实验室证实为一起恙虫病流行,现将调查情况报告如下.
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安徽省阜阳市恙虫病流行病学和临床特点分析及防治对策研究
目的 探讨2008年安徽省阜阳市恙虫病疫情的流行病学和临床特点及防治措施,为恙虫病的防治提供理论依据.方法 采用回顾性分析的方法对2008年10～11月收治的156例恙虫病病例的相天信息进行分析.结果 156例均于10月27日至11月15日收治,男女比为1:1.26,农民139例(89.10%),发病前参加过秋收秋种119例(76.28%).全部患者有发热(38.90±0.56)℃,有焦痂或溃疡104例(66.67%),皮疹74例(47.44%),淋巴结肿大46例(29.48%).血白细胞计数正常116例(74.36%),转氨酶异常92例(58.97%),乳酸脱氧酶增高56例,肌酸激酶增高52例.心电图异常28例(17.95%),B超提示脾肿大27例(17.31%),肝肿大13例(8.33%).X线胸片表现为支气管肺炎32例(20.51%).所有患者均在入院时采血做外斐试验,49例患者OXK效价在1:160或以上,阳性率为31.4%.结论 恙虫病主要流行于秋收秋种季节,以农民发病为主.临床多急性起病,有发热和特异性焦痂和溃疡,可合并有多脏器功能损害.多四环素治疗有特效.在流行季节,遇到发热伴皮疹/淋巴结肿大的患者,应注意有无特异性焦痂/溃疡,以提高恙虫病诊断警惕性,避免漏诊或误诊.
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宁德市恙虫病自然疫源地调查
[目的]了解宁德市恙虫病自然疫源地情况.[方法]捕抓农田活鼠检恙螨,用PCR技术检测病原体;采取人和鼠血清检测恙虫病抗体.[结果]地里纤恙螨出现在5～10月,高峰为9月,是夏秋季鼠体外绝对优势种;小板纤恙螨10月至翌年4月,高峰在11月,是冬春季鼠体外优势种.鼠血清抗体阳性率11.8%(43/363),小板纤恙螨PCR扩增阳性率4.2%(2/48).[结论]宁德市存在恙虫病的疫源地,夏秋季流行的恙虫病,地里纤螨为主要传播媒介;冬春季以小板纤恙螨为主要传播媒介.
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福建恙虫病东方体型别的调查
[目的] 调查福建省恙虫病东方体流行毒株的型别. [方法] 分别用不同抗原型、型特异性抗体的间接免疫荧光技术及补体结合试验进行型别调查. [结果] 闽东南沿海地区人群恙虫病感染率高.在192份抗体阳性的血清标本中,Gilliam型多,占42.7%,其次为Karp型及Karp-Gilliam的混合感染,分别占28.1%和29.1%.从病人血液、鼠类宿主及恙螨媒介共分离出126株恙虫病东方体,其中Gilliam占24.6%,Karp占23.0%,Karp-Gilliam占49.2%,并分离出1株TA716型.血清抗体分型及病原体特异性分析结果基本一致. [结论] Gilliam 和Karp型为福建恙虫病流行的主要型别.
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基于GroEL基因的实时荧光定量PCR检测恙虫病东方体方法的建立及评价
目的 建立一种敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,用于检测临床标本中的恙虫病东方体.方法 根据恙虫病东方体GroEL蛋白基因序列设计引物和探针,建立实时荧光定量PCR检测方法.并从灵敏度、特异度、重复性及临床标本的检测能力等方面对本方法进行综合评价.结果 建立的实时荧光定量PCR方法具有良好的特异性,可检测出恙虫病东方体Gilliam、Karp、Kato和Kawasaki株.建立的标准曲线循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈现良好的线性关系(r=0.99),灵敏度分析显示样品低检出浓度为21.8拷贝/μL.批内及批间重复性实验变异系数均小于1.5％,显示本方法具有良好的重复性.对本实验室保存的82份临床标本进行检测,并与常规巢式PCR方法比较,本方法检测出26份阳性标本中的25份,检出率为96.15％.结论 本研究建立的实时荧光定量PCR方法具有较高的敏感性、特异性和稳定性,可用于临床病人及暴发疫情的实验室快速检测.
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云南大理地区恙虫病血清学诊断及病原体基因序列分析
目的 对云南大理地区恙虫病做血清学诊断及病原体基因序列分析.方法 采用间接免疫荧光方法(IFA)检测不明原因发热患者血清中的恙虫病东方体(Ot) IgG抗体,用巢式PCR(nPCR)法扩增患者血液中的Ot groEL与sta56基因并对扩增基因做序列分析.结果 19例不明原因发热病例中恙虫病患者8例,其中血清Karp型4例、Kato型3例、Karp和Kato混合型1例;3例确认恙虫病的血样本扩增到groEL基因片段,其序列同源性为100%,基因序列做系统进化树显示该Ot与Karp和Kato株在同一分支上.从Karp和Kato混合血清型病例血样本扩得sta56基因片断,序列分析显示该Ot与台湾分离株在同一分支上.结论 这些云南大理的恙虫病患者由恙虫病东方体Karp或Kato血清型感染;个别患者可能Karp+Kato混合血清型感染,Karp+Kato混合血清型菌株可能在遗传进化上与某些台湾Ot株关系密切.
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应用PCR/RFLP对山东地区恙虫病东方体的基因型分析
目的鉴定山东地区恙虫病东方体的基因型.方法采用聚合酶链反应/限制性片段长度多态性分析(PCR/RFLP)技术对恙虫病东方体山东分离株、小盾纤恙螨匀浆及恙虫病病人全血中提取的DNA Sta56基因进行分析研究,并与Nested PCR基因分型的结果进行比较.结果山东地区35份标本(23株恙虫病东方体山东分离株、2份采自黑线姬鼠体外的小盾纤恙螨匀浆及10份恙虫病人全血)提取的DNA群引物扩增产物经HinfⅠ、HhaⅠ、SnaBⅠ酶切后呈现2种不同的RFLP图谱,经与已知序列的Ot内切酶图谱相比:33份Ot内切酶图谱与文献报告的日本地方株-Kawasaki株具有相似的酶切图谱,但缺乏HhaⅠ的酶切位点;另2份与Karp参考株具有相同的酶切图谱.该结果与Nested PCR基因分型的结果相一致.结论山东地区恙虫病东方体流行株主要基因型与日本地方株Kawasaki 型类似,但与日本地方株存在遗传差异;同时还有Karp型Ot存在.采用PCR/RFLP方法可以准确对Ot- Sta56基因分型.
