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背根节脉冲射频治疗神经根型颈椎病的效果
目的 观察背根节脉冲射频治疗神经根型颈椎病的疗效及安全性.方法 60例神经根型颈椎病患者,随机分为A、B两组,每组30例:A组于数字减影血管造影机(DSA)引导下行选择性神经根阻滞;B组在DSA引导下行背根节脉冲射频治疗.观察两组术前和术后1、7 d及术后1、3、6个月时患者的视觉模拟评分(VAS),术后1、3、6个月随访Odom评分的优良率以及手术相关并发症.结果 两组患者术后疼痛VAS评分均迅速降低,同术前相比差异均有统计学意义(P<0.05);B组患者VAS评分术后3、6个月随访时仍维持在较低水平,与A组相比,差异有统计学意义(P<0.05);同时,两组Odom评分优良率在术后3、6个月随访时差异有统计学意义(P<0.05);两组均未见严重手术相关并发症.结论 背根节脉冲射频能快速减轻神经根型颈椎病患者的症状,并且能维持较长时间,未见明显手术并发症,是治疗神经根型颈椎病的一种快速、安全、有效的方法.
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DSA引导下背根节脉冲射频治疗带状疱疹后神经痛的疗效及安全性
目的:观察DSA引导下背根节脉冲射频治疗带状疱疹后神经痛的疗效及其安全性.方法:60例带状疱疹后神经痛患者(VAS≥4.0),随机分为A、B两组,每组30例:A组使用加巴喷丁、阿米替林、奥施康定等药物治疗;B组在上述药物治疗的基础上.联合DSA引导下背根节脉冲射频进行治疗.观察患者射频治疗前,治疗后1、7、30、90、180 d的疼痛视觉模拟评分(VAS)、奥施康定使用量、药物副作用、治疗并发症等情况.结果:A组患者射频治疗前,治疗后1、7、30、90、180 d VAS分别为:(8.2±1.7)、(6.3±1.8)、(4.1±1.4)、(3.2 ±1.5)、(3.1 ±1.2)和(2.6 ±1.1)分.奥施康定使用量分别为:(28.8±5.5)、(35.6±8.5)、(42.3±8.9)、(18.6 ±4.3)、(10.7 ±2.4)和(8.1 ±1.6)mg.B组患者治疗前,治疗后1、7、30、90、180 d VAS分别为:(8.1 ±1.6)、(4.5 ±1.6)、(3.0 ±1.2)、(2.1±1.1)、(1.8±0.9)和(1.5±0.9)分.奥施康定使用量分别为:(29.1±5.8)、(17.6 ±5.4)、(12.4 ±3.8)、(5.1 ±1.6)、(6.0 ±1.3)和(4.2±0.9)mg,组间比较有显著差异(P<0.05),B组药物副作用减轻,无严重并发症.结论:DSA引导下背根节脉冲射频术能迅速减轻疼痛,降低镇痛药使用量并减少其相关副作用.是带状疱疹后神经痛的一种安全、有效的治疗方法.
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延胡索乙素对大鼠外周镇痛作用的实验研究
目的 观察延胡索乙素(1-THP)对大鼠慢性压迫背根节神经元形成的慢性腰背痛的镇痛作用.方法 采用单纤维记录大鼠慢性压迫背根节神经元自发放电.结果 本次实验中记录到单纤维A类神经元自发放电59根,其中1-THP对67.80%(40/59)自发放电有抑制作用.1-THP对受损背根节神经元自发放电的抑制作用具有剂量依赖性,随着剂量的增大抑制神经元自发放电的起效时间越快,自发放电恢复所需的时间也越长.结论 延胡索乙素对大鼠慢性压迫背根节神经元自发放电有抑制作用.
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鞘内注射右美托咪定对背根结慢性压迫痛大鼠脊髓CaMK Ⅱ表达的影响
目的 观察鞘内注射右美托咪定对背根节慢性受压痛大鼠(CCD)脊髓CaMKⅡ表达的影响,探讨右美托咪定-CaMKⅡ通路在大鼠背根节慢性受压痛中的作用.方法 鞘内置管成功的雄性SD大鼠48只,随机分为6组,每组48只.分别是正常对照组(C组);模型组(CCD组);生理盐水组(NS组);右美托咪定2μg/kg组(Dex2);右美托咪定4 μg/kg组(Dex4);右美托咪定8 μg/kg组(Dex8).分别于鞘内置管前(T1),制备CCD模型前(T2)、CCD模型制备后5d鞘内给药前(T3)、鞘内给药后30 min(T4)、60 min(T5)、120 min(T6)、240 min (T7)检测大鼠机械缩腿阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL).并于鞘内给药后240 min,各组取4只大鼠处死,取脊髓腰膨大,采用免疫印迹法检测CaMKⅡ的表达.结果 与C组比较,CCD组大鼠在T3～T7各时点MWT及TWL均显著降低,CCD组大鼠表现为明显的机械痛敏感和热痛敏感.NS组大鼠鞘内注射NS后对大鼠MWT及TWL无影响,鞘内注射不同剂量的右美托咪定则可显著提高CCD大鼠MWT和TWL.与C组(0.24±0.04)比较,CCD组(0.59±0.09)、NS组(0.61±0.08)大鼠CaMKⅡ蛋白表达均显著增加;鞘内注射不同剂量的右美托咪定后,大鼠脊髓CaMKⅡ蛋白表达(0.45±0.06、0.39±0.05、0.36±0.06)增加幅度显著降低.结论 鞘内注射右美托咪定可减轻CCD大鼠机械痛敏感和热痛敏感,抑制CCD大鼠脊髓CaMKⅡ蛋白表达.
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髓核对背根节的损伤以及与痛觉过敏的关系
目的观测髓核组织对背根节(DRG)的损伤作用,探讨这种损伤作用与痛觉过敏之间的关系.方法从鼠尾椎间盘取髓核组织移植到神经根,使用神经行为学的方法观测痛觉过敏,大体、光镜和电镜相结合观测组织学改变.结果术后实验侧后肢出现明显的痛觉过敏,并且术后1周明显;组织学观察发现髓核组织使DRG出现水肿、炎细胞浸润,DRG神经元出现溶酶体增多、线粒体肿胀等损伤表现,术后1周表现明显.结论髓核组织对DRG有炎性损伤作用,此损伤作用与痛觉过敏可能存在联系.
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益气化瘀补肾方对压迫和减压后大鼠背根节神经元PLA2、PGE2表达影响
目的:观察压迫和减压后大鼠颈神经背根节(DRG)组织中PLA2和PGE2的含量,并进一步探讨益气化瘀补肾方对其影响.方法:选用3月龄SPF级SD雄性大鼠70只,随机分为7组,分别应用生化法和ELISA法检测神经根组织中PLA2和PGE2的含量.结果:压迫损伤可造成大鼠颈神经DRG PLA2和PGE2含量显著升高,与假手术组相比有显著性差异,P＜0.01；在减压组,PLA2和PGE2含量下降,与压迫组相比有显著性差异,P＜0.01,但仍高于假手术组,P＜0.01.对压迫和减压后颈神经背根节PLA2和PGE2的含量,益气化瘀补肾方具有显著的抑制作用,与压迫组相比有显著性差异,P＜0.01,在减压三组,PLA2、PGE2含量与假手术组相比无显著性差异,P＞0.05.结论:益气化瘀补肾方可显著降低压迫损伤后DRG PLA2和PGE2的含量,这种作用在减压手术后,效果更为明显.
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不同结合状态硫酸软骨素多糖链对体外二维三维培养背根节神经突起生长影响研究
目的 构建鸡胚背根节细胞3D生长模型,观察CSPG对不同浓度的琼脂糖水溶胶培养基对鸡胚背根节神经突起生长的影响.方法 ①利用多肽缩合剂1'1羰基二咪唑介导CS-B长链与琼脂糖凝胶共价结合.②分别配制0.5%、0.75%、1%、1.25%、1.5%的SeaPrep琼脂糖凝胶溶液和共价结合了CS-B多糖长链的琼脂糖凝胶溶液.取孵育9～10天后鸡胚背根节加入上述凝胶溶液加培养液培养.③培养24小时之后在24 h、48 h、72 h、96 h进行观察拍照.观察各时间点神经突起生长情况.结果 ①鸡胚背根节神经突起在1.25%的琼脂糖凝胶溶液中开始呈3D生长,在小于1%的琼脂糖溶液中只能2D生长.②在同一时间点,呈2D生长的背根节突起和呈3D生长的背根节突起在突起长度方面没有统计学差异(P＞0.05).③3D生长的DRG神经突起在共价结合了CS-B的琼脂糖凝胶中生长长度明显短于普通琼脂糖水凝胶(P＜0.05),并且可观察到部分突起长出短而直的成束突起.但是对于呈2D生长的DRG突起长度在两种培养基中却未见差异(P＞0.05).结论 鸡胚背根节神经元周围突起生长长度在3D培养中与在2D培养中有没有明显的差异.硫酸软骨素能够有效抑制呈3D生长的神经节突起生长,并且影响到神经突起的生长方式.但是在2D培养基中,未能看到上述的抑制作用.
关键词： 背根节 三维培养 硫酸软骨素1'1-羰基二咪唑(CDI) -
Sema3A及其受体NP-1分别在成年猫脊髓及背根节中的表达
目的探讨正常状态下smea3A在成年猫脊髓,其受体neuropiln-1(NP-1)在背根节(DRG)的分布.方法选取成年雄猫5只,用免疫组织化学方法检测脊髓中sema3A,DRG中NP-1的分布.结果脊髓中sema3A的阳性反应物主要分布于腹角的绝大部分运动神经元的胞浆;背根节中NP-1阳性产物主要分布在部分中小神经元及少量大神经元的胞浆中.结论脊髓中的sema3A可能抑制了背根节神经元在脊髓中的错误出芽,从而保持了脊髓中正常突触联系的稳定性.
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Caspase-3在成年猫脊髓和背根节的分布
目的采用免疫组织化学方法探讨Caspase-3在成年猫脊髓和背根节的分布.结果Caspase-3的阳性反应物主要分布于脊髓前角、中间带(包括背核)、后角深部以及背根节(DRG)的中小神经元.此外在脊髓白质亦有大量胶质细胞着色.结论Caspase-3参与上述部位的细胞凋亡或者其它功能的调控.
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P物质在成年猫脊髓和背根节的分布
目的观察P物质在成年猫脊髓和背根节的表达情况.方法成年健康雄猫5只,取L5脊髓节和随机取一侧L6背根节制作厚20μm冰冻切片,用免疫组织化学ABC法染色,观察SP在正常脊髓和背根节的分布.结果在脊髓,SP阳性膨体主要见于后角I、Ⅱ板层,后角Ⅳ、V、Ⅵ板层及侧角的一些神经元呈弱阳性反应,前角运动神经元胞体和突起呈阳性反应,胞核不着色.在背根节,SP的免疫阳性物主要分布于小细胞的胞浆内,胞核不着色.结论SP在成年猫脊髓和背根节有表达.
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成年猫L1～L7两侧背根节神经元数量的比较
5只正常成年雄性猫双侧L1～L7背根节(DRG)石蜡包埋,连续切片,显微镜观察计数,比较左、右DRG 神经元数量,为神经系统损伤后对神经元的存活和再生影响的研究提供DRG神经元计数资料.结果:1)每只动物各节段左、右DRG神经元数量比较,比率在0.70～1.26 之间,个别节段两侧有显著性差异(P＜0.01),而每只动物左、右DRG神经元总数比较,比率在0.93-1.02(P＞0.5),两侧无显著性差异.2)5只动物L1 ～L7各节段左、右DRG神经元均数比较,两侧无显著性差异(P＞0.5).结论:成年猫L1～L7各节段两侧DRG神经元数量呈对称性分布.
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大鼠坐骨神经切断后IGF-Ⅰ、BDNF和TrkB在背根节表达的实验研究
目的:观察大鼠坐骨神经切断后IGF-Ⅰ、BDNF及TrkB在背根节(DRG)表达变化规律,探讨三者在神经保护和再生中的作用机制.方法:健康成年雄性Wister大鼠随机分为对照组和实验组,实验组切断右侧大腿坐骨神经后存活3～28d,荧光定量RT-PCR方法检测L4-6背根节(DRG)中IGF-Ⅰ、BDNF和TrkB基因mRNA的表达.结果:坐骨神经损伤后3d,L4-6 DRG IGF-Ⅰ、BDNF和TrkB基因mRNA表达均有不同程度的升高,到7-14d达高峰,后逐渐下降到正常水平.结论:坐骨神经损伤后,IGF-Ⅰ、BDNF和TrkB基因mRNA表达同步变化提示它们在外周神经损伤后神经保护及再生中可能存在相互作用.
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眼镜蛇毒NGF对去部分背根后备用背根节内GAP-43表达的影响
目的 探讨从眼镜蛇毒分离纯化出的神经生长因子(NGF)对去部分背根猫备用背根节(DRG)内生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的影响.方法 对45只成年雄性家猫切除一侧L1～L5、L7～S2 DRG,保留L6 DRG及背根,随机分为小剂量蛇毒NGF组(1 μg/kg)、大剂量蛇毒NGF组(2 μg/kg)、生理盐水对照组(0.1 mL/kg),每组15只.术后损伤背髓局部即刻给予蛇毒NGF或生理盐水,分别于术后3、6、12d(存活12d的动物术后第6d再从椎间隙内注射上述剂量蛇毒NGF或生理盐水1次)处死动物.对L6备用DRG作GAP-43免疫组织化学检测,计数各组术侧GAP-43阳性大、中小神经元数量.结果 GAP-43表达主要分布于DRG大神经元的胞核和中小神经元的胞浆.治疗组和对照组术后3d在术侧即可见到GAP-43阳性反应的大、中小神经元,6d达高峰,第12d有所下降;其中,中小神经元的变化尤为明显.治疗组术侧GAP-43阳性中小神经元数量多,反应强,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),其中大剂量蛇毒NGF组在各时间点阳性中小神经元的数量增多更为明显,与小剂量蛇毒NGF组相比差异有统计学意义(P＜0.01); 而不同时相各组术侧GAP-43阳性大神经元数量变化不明显.结论 外源蛇毒NGF可能通过上调备用根DRG内中小神经元GAP-43的表达而发挥促进备用根轴突再生出芽的作用; 其再生的强弱与蛇毒NGF的治疗剂量有关.
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部分背根切断对备用背根节GDNF、FGF-2表达的影响
目的探讨部分背根切断后不同时相备用背根节(DRG)中胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、成纤维细胞神经生长因子(FGF-2)的表达变化.方法 15只猫分正常组、单侧部分背根切断7 d及14 d组,每组5只.分别于术后7 d、14 d处死动物,取正常组一侧、模型组手术侧L6DRG,用兔抗GDNF、FGF-2抗体行免疫组化ABC法染色,计数DRG内两因子阳性总细胞及阳性大、中小细胞的数量.结果 GDNF在正常猫DRG大、中小细胞均有分布;去部分背根后,两时相备用DRG GDNF阳性神经元总数均有下降且呈进行性递减.DRG阳性中小细胞数亦为术后两时相进行性下降,DRG阳性大神经元术后两时相均较正常组显著减少,但术后14 d与术后7 d组无显著性差异. FGF-2在脊髓DRG大、中小细胞亦有分布;去部分背根后7 d,FGF-2阳性神经元总数下降,14 d时又恢复至正常,中小细胞亦表现为先减少后上升的趋势,而大细胞则术后两时相与正常组间无显著差异.结论去部分背根手术可致备用DRG中GDNF阳性神经元总数进行性下降, FGF-2表现为术后7 d下降,14 d时恢复.
关键词： 部分背根切断 背根节 胶质细胞源性神经营养因子 成纤维细胞神经生长因子 -
猫部分背根切断后背根节一氧化氮合酶的表达变化
目的了解一氧化氮合酶(NOS)在背根损伤的背根节及邻近未受损之背根节中表达的变化.方法采用部分去背根传入动物模型,通过免疫组织化学ABC法,观察猫背根节中nNOS及eNOS同工酶阳性免疫产物的分布、阳性神经元的数量及变化.结果猫背根节中nNOS阳性反应物主要分布于小神经元中;背根被切断的L5背根节及邻近完好的L6备用背根节中nNOS阳性小神经元数量较非术侧均有增加; eNOS在成年猫背根节神经元中未见表达.结论在背根节神经元中表达的nNOS及由nNOS催化产生的NO可能与神经损伤和修复的生理病理过程有关.
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部分背根切断及针刺促进备用背根节c-jun的表达
目的探讨部分背根切断术及针刺对背根节(DRG)c-jun表达的影响.方法将成年雄猫15只,分假手术组,手术组和术后针刺组,每组5只.手术组动物行单侧备用根术,术后针刺组动物经单侧备用根术后,针刺后肢手术侧L6脊神经分布区中的两组穴位:足三里和悬中;伏兔和三阴交, 每天一次,每次30 min,连续针刺7 d.通过免疫组化ABC法,用c-jun特异抗体(1∶1000,Santa Cruz) 对切片进行染色,DAB呈色.观察并测量DRG中c-jun阳性神经元的分布、数量及反应强度.结果在假手术组DRG中,只有部分神经元染色.手术组c-jun阳性神经元的数量较假手术组显著增多(P＜0.05),其免疫反应水平较假手术组,显著上升(P<0.05).术后针刺组较手术组的c-jun免疫反应强度增强,而阳性神经元的数量没有显著差异.结论部分背根切断后备用DRG神经元中c-jun的表达增加,针刺促使c-jun的表达进一步上调.
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针刺对备用背根节神经元TrkC表达的影响
目的探讨针刺对备用背根节(DRG)TrkC表达的影响.方法将成年雄猫分为三组,即假手术组、单侧部分背根切除术组、单侧部分背根切除术并针刺组.通过免疫组化ABC法,观察各组L6DRG中TrkC免疫反应(TrkC-IR)神经元数量.结果在假手术组TrkC-IR主要定位于L6 DRG的大神经元及少数中小神经元胞浆内;部分背根切断后,TrkC-IR大神经元数量明显减少,而中小神经元数量则明显增多(P＜0.05);针刺后,TrkC-IR大神经元数量较手术组又明显增多,且反应强度明显增加(P＜0.05),而对中小神经元TrkC阳性细胞数无明显影响.结论针刺促进TrkC在大神经元的表达上调, 提示TrkC可能与脊髓可塑性有关.
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外周支及中枢支切断对背根节BDNF和NT-3表达的影响
目的探讨中枢支和外周支切断对背根节(DRG)脑源性神经营养因子(BDNF)和神经营养因子(NT-3)表达的影响. 方法将成年雄猫15只分为正常组,外周支切断组及中枢支切断组.后两组分别紧贴背根节切断外周支和中枢支.术后动物存活4天,取各组L5 DRG用BDNF和NT-3抗血清行ABC免疫组化染色.计数各组DRG BDNF和NT-3的阳性神经元数. 结果外周支、中枢支切断组DRG BDNF和NT-3的阳性神经元数(24.1±3.5,29.4±5.2、19.4±2.4,20.2±1.9)均较正常组者(12.1±2.2,13.3±2.9)明显增多(P<0.01).外周支切断者亦较中枢支切断组者增多(P<0.05).结论外周支及中枢支切断均可致DRG 神经元BDNF和NT-3表达增加.且外周支切断对DRG 神经元BDNF和NT-3表达的影响亦大于中枢支切断者.
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脑源性神经营养因子在猫备用背根节的表达变化
为探讨脑源性神经营养因子(BDNF)在备用背根节(DRG)的表达变化情况,对20 只成年雄性家猫(其中15只行单侧L6备用根手术后分别存活3、6、12天)L6 DRG行BDNF免疫组化染色.结果:①正常猫L6 DRG神经元以胞体直径32μm和44μm为分界划分出大中小三类;②正常L6 DRG内有50.87%的神经元呈BDNF阳性反应,备用根手术侧其BDNF阳性神经元数量增多,反应增强,以术后6天变化显著(76.7%).正常及术后BDNF阳性神经元均以小神经元为主.去部分背根后备用L6 DRG神经元BDNF表达的增多、增强可能参与促进其神经元 ( 尤其是小神经元)中枢支在脊髓背角的侧支出芽,并可能参与营救一些失去部分神经支配的背角神经元.
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大鼠损伤脊髓提取液对新生大鼠DRNGs体外培养的影响
目的:探讨损伤脊髓提取液对新生大鼠DRGNs(Dorsal Root Ganglion neuron,背根节神经元)轴突生长和延长的影响.方法:将正常、假手术及全瘫脊髓提取液同新生大鼠DRGsN共同培养,观察神经轴突平均长度和轴突远端微管(TubulinβⅢ)荧光表达.结果:全瘫组DRGNs平均轴突长度明显缩短,生长锥塌陷,轴突远端和生长锥的TubulinβⅢ表达明显减弱,与空白组比较有显著统计学差异;假手术组DRGNs平均轴突长度比空白组略缩短,但生长锥无塌陷,轴突远端和生长锥TubulinβⅢ表达强;正常组DRGNs平均轴突长度与空白组比较无差异,轴突远端TubulinβⅢ表达明显.结论:完全瘫痪脊髓提取液能明显抑制DRGNs轴突生长,导致生长锥塌陷;假手术脊髓提取液能轻度抑制轴突生长,但生长锥无明显塌陷;正常脊髓提取液不影响轴突生长.
