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  • 电针“足三里”对慢性疲劳综合征大鼠骨骼肌腺苷酸活化蛋白激酶/过氧化物酶体增殖物活化受体γ共激活因子α信号通路基因表达的影响

    作者:董佳梓;魏云涛;许环宇;张妤;勇入琳;薛亚楠;张立德

    目的:基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增殖物活化受体γ共激活因子α(PGC-1 α)信号通路,观察针刺“足三里”对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠骨骼肌细胞线粒体氧化应激的影响,阐释针刺“足三里”防治CFS的部分作用机制.方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、足三里组、非经非穴组,每组10只.采用多因素造模法复制CFS模型.足三里组电针双侧“足三里”,非经非穴组电针双侧非经非穴,每日1次,每次20 min,持续10d.检测造模前后、治疗后大鼠抓力变化;Western blot法检测大鼠骨骼肌三磷酸腺苷(ATP)合酶、AMPK、磷酸化AMPK(p-AMPK)、沉默信息调节因子2相关酶I(SIRT 1)以及PGC-1 α蛋白的表达;荧光定量PCR技术检测大鼠骨骼肌ATP合酶、SIRT 1以及PGC-1 αmRNA的表达.结果:造模后,模型组、足三里组、非经非穴组大鼠抓力较正常对照组明显下降(P<0.05),治疗后足三里组大鼠抓力较模型组明显升高(P<0.05).与正常对照组比较,模型组大鼠骨骼肌ATP合酶蛋白表达、ATP舍酶mRNA表达明显下调(P<0.05,P<0.01),p-AMPK/AMPK差异无统计学意义(P>0.05),SIRT 1蛋白表达明显升高(P<0.01),PGC-1 α蛋白及mRNA的表达明显降低(P<0.01).与模型组相比,足三里组大鼠骨骼肌ATP合酶mRNA表达明显上调(P<0.01),p-AMPK/AMPK上调(P<0.05),SIRT 1蛋白及mRNA、PGC-1 α蛋白及mRNA的表达明显上调(P<0.01).结论:针刺“足三里”可使CFS大鼠骨骼肌AMPK表达明显增加,提高SIRT 1的表达,进一步直接或间接激活PGC-1 α,提高线粒体的ATP合成,改善机体线粒体氧化应激反应,维持机体能量代谢,从而起到对CFS的治疗作用.

  • 人参皂苷Rb1对术后疲劳综合征大鼠骨骼肌氧化应激的影响

    作者:谈善军;余震;董千铜;章晓东;陈必成;周锋;郭健;裘益辉

    目的 观察人参皂苷Rb1对术后疲劳综合征(POFS)大鼠骨骼肌氧化应激的影响,探讨其抗疲劳机制.方法 采用70%中段小肠切除法建立POFS大鼠模型.通过抓力测试筛选出96只SD大鼠,按体重随机分为对照组、模型组和人参皂苷Rb1干预组(GRb1组,10 mg/kg).分别在术后第1、3、7、10天检测大鼠大抓力,并检测骨骼肌内丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性.结果 GRb1组较模型组大抓力在术后第7、10天明显增强(P<0.05),MDA含量在术后第3、7天明显降低(P<0.05),SOD活性同时明显升高 (P<0.05).3组间CAT、GSH-PX活性各时间点无明显变化(P>0.05).结论 人参皂苷Rb1能减轻骨骼肌的氧化应激性损伤,提高骨骼肌抗氧化酶活性,增强骨骼肌功能.这可能是其抗术后疲劳的重要途径.

  • Myostatin重组蛋白疫苗对小鼠骨骼肌质量和力量的影响

    作者:唐量;张万金;王园丽;张英起

    目的:探讨Myostatin重组蛋白疫苗(His-Ms)对小鼠骨骼肌质量和力量的影响及其相关机制.方法:实验动物分为正常对照组和His-Ms组,每组10只.采用基因工程技术表达并纯化的Myostatin无活性蛋白作为疫苗,按100μg/只剂量对His-Ms组小鼠进行免疫,每隔14d免疫1次,免疫4次,共62d.在His-Ms组小鼠进行免疫时,正常对照组腹腔注射相等体积生理盐水.后一次免疫后20d对照组和His-Ms组动物取血样和组织样本,检测血清Myostatin抗体水平及胆固醇(CHO)、甘油三脂(TG)、尿素氮(BUN)、血糖(GLU)、肌酸激酶(CK)等血液指标,检测骨骼肌质量和细胞形态等指标.结果:利用高纯度His-Ms重组蛋白作为疫苗免疫小鼠,可诱导小鼠产生特异性抗体,平均抗体滴度在2×102以上.血清中CHO、TG、BUN、GLU和CK等指标两组小鼠间无显著性差别.与正常对照组比较,His-Ms组免疫小鼠体重平均增加了3.6%;股四头肌、腓肠肌和胸大肌重量分别增加了11.2%、3.2%和15.8%,股四头肌横断面积增加了5.6%,而每束肌纤维平均细胞数两组之间无明显差别.His-Ms组免疫小鼠前肢抓力与正常对照组比较平均增加了26.6%,增加显著(P<0.05).结论:Myostatin重组蛋白疫苗免疫使小鼠体重和肌肉质量不同程度增加,抓力明显增强.

  • 美索巴莫磷酸钠对小鼠抗惊厥和肌松作用的研究

    作者:庄俊雪;黄琛;尚曼;焦建杰;庄布军;高卫真

    目的 研究美索巴莫磷酸钠对小鼠的抗惊厥作用及肌肉松弛作用.方法 将小鼠按照体重随机分组,每组10只,雌雄各半,将美索巴莫磷酸钠(Me-Na)制备成质量分数为231,462,924,1848 mg· kg-1的系列溶液,采用灌胃(给药后30 min实验)和注射(给药后10 min实验)两种途径给予小鼠,并与美索巴莫(650 mg·kg-1)作用效果对比.抗惊厥实验:分别研究不同浓度美索巴莫磷酸钠抗电惊厥及抗士的宁惊厥作用,给药后记录小鼠的惊厥发生率和惊厥出现时间,研究其抗惊厥效果.肌肉松弛实验:给药后通过检测小鼠的抓力和转杆时间,研究美索巴莫磷酸钠对小鼠的肌肉松弛作用.结果 抗电惊厥实验:灌胃组中的空白组、对照组、实验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组发生例数为10,0,6,4,0例;注射组中的空白组、对照组、实验Ⅲ组发生例数为10,3,5例,与空白组相比,对照组和实验组的差异有统计学意义(P<0.05).抗士的宁惊厥实验:灌胃组中的空白组和实验Ⅱ组惊厥出现的时间为(8.89±1.69),(14.60±3.81) min,注射组中的空白组、对照组和实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组惊厥出现的时间为(6.44±1.86),(12.31±2.34),(19.88±3.79),(12.73±1.72),(13.22±1.67) min,与空白组相比,对照组和实验组的差异有统计学意义(P<0.01).抓力实验:灌胃组中的空白组、对照组和实验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组的抓力与体重的比值分别为(6.44±0.54),(3.14±0.97),(4.18±1.31),(3.51±1.65),(2.93±1.06)N·g-1,注射组中的空白组、对照组和实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的抓力与体重的比值为(6.67±0.69),(1.54±0.33),(2.84±0.53),(3.83±0.92),(3.22±1.09) N·g-1,与空白组相比,对照组和实验组的差异有统计学意义(P<0.01).转杆实验:灌胃组中的空白组、对照组和实验Ⅲ、Ⅳ组的转杆持续时间为(175.24±7.08),(5.96±4.84),(10.83±6.27),(3.73±1.66)s,注射组中的空白组、对照组和实验Ⅱ、Ⅲ组转杆持续时间为(174.71±7.29),(2.33土0.58),(7.06±4.45),(1.56±0.62)s,与空白组相比,对照组和实验组的差异有统计学意义(P<0.001).结论 美索巴莫磷酸钠对小鼠具有抗惊厥作用和肌肉松弛作用,且与临床应用的美索巴莫效果相当.

  • 三七及其不同炮制品对小鼠行为学指标的影响

    作者:万晓青;彭芸崧;楼招欢;夏伯侯

    目的 考察三七及其不同炮制品的补益作用.方法 小鼠ig给予三七及其不同炮制品的水、醇提取物,每日1次,连续25 d,观察试药对小鼠抓力、悬尾时间、力竭游泳时间、记忆能力及耐缺氧时间的影响.结果 生三七及不同炮制品水、醇提取物均能显著增加小鼠的抓力,延长悬尾活动时间及耐缺氧时间,缩短小鼠水迷宫游泳持续时间;蒸三七水提物及油炒制三七水、醇提取物能显著缩短第4象限游泳时间.结论 三七及其不同炮制品均具有增强小鼠体力、改善记忆能力及提高耐缺氧能力的作用;生品与炮制品之间在各作用上存在一定的差异,在益智方面,油炒制三七的作用较其他品种明显.

  • 融合Th细胞表位序列Myostatin重组基因疫苗的构建及其对免疫动物肌肉力量的影响

    作者:唐量;刘晨涛;王园丽;罗凯;王旭丹

    目的:本实验利用基因重组技术,构建融合Tn细胞TT830-844表位序列的人重组Myostatin基因疫苗真核表达载体pVAC-TT-Ms,检测该基因疫苗对免疫小鼠前肢抓力的影响,为后续以Myostatin作为靶分子来改善废用性肌肉萎缩等病症的研究提供实验基础.方法:化学耦联方法合成Myostatin C-末端成熟肽(330 bp)基因序列及其N-端融合TT表位序列的DNA片段,重组质粒pVAC-TT-Ms的构建、纯化及瞬时转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)按该类研究中的常规实验操作,并检测重组基因疫苗pVAC-TT-Ms免疫小鼠骨骼肌前肢抓力的变化.结果:酶切和测序结果表明,重组Myostatin基因疫苗表达载体pVAC-TT-Ms构建成功.重组质粒pVAC-TT-Ms OD260/280比值和电泳结果显示,该质粒作为基因疫苗符合免疫动物的质量要求.细胞荧光免疫检测结果表明,瞬时转染的CHO细胞中目的蛋白明显表达.动物免疫实验初步证明,重组Myostatin基因疫苗可显著提高免疫小鼠的前肢抓力,与正常对照组比较,免疫小鼠前肢抓力平均增加了29.88%.结论:本实验成功构建了在真核细胞中能有效表达融合TT表位序列人重组Myostatin基因疫苗表达载体,初步证明了重组Myostatin基因疫苗可显著增加免疫小鼠前肢抓力.

  • 白藜芦醇对老年大鼠骨骼肌力量及肌原纤维结构的影响

    作者:廖芷吟;赵柯湘;肖谦

    目的 观察白藜芦醇对老年大鼠骨骼肌质量、抓力、肌原纤维超微结构以及AMPK/sirt1通路的影响.方法20只25月龄SD大鼠随机分为老年对照组(OC组,10只)和老年白藜芦醇组(OR组,10只),另外10只6月龄SD大鼠作为青年对照组(YC组).OR组给予连续6周白藜芦醇干预.电子抓力仪测量大鼠前肢抓力,分析天平称量大鼠腓肠肌质量,用腓肠肌质量(mg)/体质量(g)得出肌肉减少症指数(SI),透射电子显微镜观察大鼠肌原纤维肌小节、明带、暗带以及H带长度的改变.Western blot方法检测AMPK、P-AMPK、sirt1的蛋白表达量.结果 OC组腓肠肌SI值低于YC组(P<0.05),抓力低于YC组(P<0.05),肌小节长度、暗带长度、明带长度和H带长度均高于YC组(P<0.05),AMPK、P-AMPK、sirt1的蛋白表达量均低于YC组(P<0.05);与OC组相比,OR组SI值未见显著性差异(P>0.05),抓力升高(P<0.05),肌小节长度、明带长度和H带长度均降低(P<0.05),暗带长度未见统计学差异(P>0.05),P-AMPK、sirt1的蛋白表达量均显著增高(P<0.05).结论 白藜芦醇不能减缓肌肉质量的减少,但是可以增加老年大鼠的抓力.这种作用可能跟白藜芦醇激活AMPK/sirt1通路,改善肌原纤维结构的老化有关.

  • 独活寄生汤对SD大鼠自主活动和抓力的影响

    作者:李敏;应航;杨国平;汤小康

    [目的]探讨独活寄生汤对SD大鼠自主活动和抓力的影响.[方法]将40只雌雄各半的SD大鼠随机分成空白对照组和独活寄生汤组.独活寄生汤组采用每天2次,连续5天灌胃,空白对照组进行等量生理盐水灌胃,然后比较两组大鼠自主活动次数和抓力大小.[结果]独活寄生汤组的自主活动次数和抓力相比空白对照组都有显著性增加,经过t检验,P<0.001.[结论]独活寄生汤对SD大鼠的有强壮筋骨作用并促进其中枢神经兴奋.

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