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抗纤软肝冲剂抗大鼠肝纤维化的实验研究
采用四氯化碳(CCl4)高脂低蛋白等复合因素诱导的大鼠肝纤维化模型,以秋水仙碱作对照,观察抗纤软肝冲剂对肝功能、免疫学、肝纤维化相关指标、肝组织羟脯氨酸(Hyp)及肝组织病理学的影响.结果:抗纤软肝冲剂和秋水仙碱有良好的抗肝纤维化效果,其中抗纤软肝冲剂有显著改善肝功能、调节免疫功能、降低免疫复合物(IC)、降低肝纤维化相关指标和Hyp含量的作用.
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抗纤软肝冲剂药物血清对激活肝星状细胞表达Ⅰ型前胶原及TGF-β1 mRNA的影响
目的:探讨抗纤软肝冲剂抗肝纤维化的作用机理.方法:分离正常大鼠肝星状细胞,并传代培养.用抗纤软肝冲剂给正常大鼠灌胃,制备药物血清,温育培养细胞72h,提取细胞总RNA,RT-PCR法分析Ⅰ型前胶原、TGF-β1mRNA的表达.结果:抗纤软肝冲剂药物血清能显著抑制肝星状细胞的Ⅰ型前胶原及TGF-β1mRNA的表达.结论:抗纤软肝冲剂抗肝纤维化的机理之一是调控肝星状细胞的Ⅰ型前胶原及TGF-β1mRNAA的表达.
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抗纤软肝冲剂对肝星状细胞自分泌转化生长因子β1的影响
目的:从细胞分子水平研究抗纤软肝冲剂对肝星状细胞(HSC)表达转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法:抗纤软肝冲剂药物血清温育传一代HSC,以生理盐水和秋水仙碱为对照.免疫细胞化学分析TGF-β1的蛋白合成;半定量RT-PCR法检测TGF-β1的mRNA表达量.结果:抗纤软肝冲剂能明显抑制HSC的自分泌TGF-β1及其mRNA表达(P＜0.01).结论:抗纤软肝冲剂能抑制HSC的TGF-β1的基因和蛋白表达,阻断其自分泌放大活化效应,这可能是该方抗肝纤维化的细胞分子学机制之一.
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抗纤软肝冲剂抗肝纤维化的实验研究
目的:通过抗纤软肝冲剂对肝纤维化动物防治作用的研究,探讨该方抗肝纤维化的作用机理.方法:四氯化碳、高脂、高胆固醇、低蛋白等复合因素诱导大鼠肝纤维化动物模型,同时给予抗纤软肝冲剂,以秋水仙碱为对照.检测肝组织羟脯氨酸Hyp、超氧化物歧化酶S()D及丙二醛MDA,观察血清肝纤维化指标(透明质酸HA、层粘蛋白LN、Ⅲ型前胶原PCⅢ、Ⅳ型胶原Ⅳ-C)及肝功能(白蛋白Alb、球蛋白G、谷丙转氨酶ALT).结果:抗纤软肝冲剂对肝纤维化大鼠有升高A1b,降低ALT和G的作用;显著提高肝SOD活性,降低MDA含量;显著降低HA,LN,PCⅢ,Ⅳ-C;减轻肝脏Hyp的作用.结论:抗纤软肝冲剂具有确切的防治肝纤维化的作用,其机理在于抗脂质过氧化和保护肝细胞,对胶原代谢也有直接作用.
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抗纤软肝中剂药物血清对肝星状细胞胶原代谢及其相关基因表达的影响
目的:从细胞分子学水平探讨抗纤软肝中剂抗肝纤维化的作用机制.方法:抗纤软肝中剂药物血清温育传一代HSC,以生理盐水和秋水仙碱为对照.ELISA测定细胞上清Ⅰ型胶原,并测定细胞层总蛋白以校正胶原含量;半定量法RT-PCR法检测Ⅰ型胶原、间质胶原酶(MMP1)的mRNA表达.结果:抗纤软肝冲剂组细胞上清中的Ⅰ型胶原含量明显低于其它两组(P＜0.01);能明显抑制细胞的Ⅰ型胶原mRNA表达(P＜0.01),且能促进MMP1的mRNA表达(P＜0.01).结论:抗纤软肝冲剂能明显抑制HSC的胶原基因表达和促进间质胶原酶基因表达,从而可达到抑制胶原合成,促进胶原降解,这可能是抗纤软肝冲剂抗肝纤维化的细胞分子学机制之一.
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抗纤软肝冲剂的制备及质量研究
目的:介绍抗纤软肝冲剂的制备方法并对其进行定性定量研究.方法:用水提醇沉法制备抗纤软肝冲剂;对方中山楂进行薄层定性鉴别;对方中主药丹参所含主要有效成份原儿茶醛的含量进行了双波长薄层扫描测定.检测波长为λs=280nm,参比波长为λs400nm;采用硅胶G薄层板,展开剂为氯仿-丙酮-甲酸(8:1 :1).结果:山楂薄层鉴别结果显示供试品色谱与对照品及对照药材色谱在相应的位置上,显示相同颜色斑点;双波长薄层扫描测定结果显示原儿茶醛在0.509～5.599μg/μl浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数r=0.9995,其平均加样回收率为96.74%,RSD为3.2%.结论:抗纤软肝冲剂制剂稳定,检测方法可靠,结果准确.丹参中原儿茶醛含量应控制在大于0.090mg/10g的范围.该冲剂可作为治疗肝硬变患者的常用药物.
