首页 > 文献资料
-
DPPH法测定九州虫草不同极性部位抗氧化活性
目的:研究九州虫草体外不同极性部位的抗氧化作用.方法:采用DPPH法测定九州虫草石油醚(EVP)、乙酸乙酯(EVE)、正丁醇(EVB)和水(EVW)不同提取部位的抗氧化活性.结果:EVP,EVE,EVB,EVW均有DPPH自由基的清除能力,测得EVP,EVE,EVB和EVW清除DPPH的EC50值分别为190.2,141.4,151.6,195.4 mg·L-1.结论:九州虫草具有很强的抗氧化性,为进一步研究其抗氧化活性成分提供了科学依据.
关键词： 九州虫草 1 1-二苯基-2-苦基苯肼自由基法 体外抗氧化作用 -
超声提取九州虫草子座黄酮类成分的研究
虫草是昆虫病原真菌侵袭寄主昆虫所形成的一种特殊形态,以冬虫夏草为代表的虫草属真菌其药用价值受到世人广泛的关注.九州虫草Cordycepskyushuensis是国内新纪录种[1],其寄主为豆天蛾Clanis bclineata walker幼虫,无性型为九州轮枝菌[2].前期研究表明,九州虫草具有良好的药用前景和开发价值[3-6].本研究首次采用超声技术提取九州虫草子座黄酮类物质,考察了佳提取工艺,以期完善对九州虫草黄酮类药效组分的认识,对其进一步药理、毒理作用研究有所助谊.
-
九州虫草的核苷类成分及不同部位两种活性成分含量的分布
目的快速测定九州虫草中的部分核苷类成分及其主要活性成分虫草素与腺苷的含量,并考察九州虫草不同部位虫草素和腺苷含量的分布.方法用高效毛细管区带电泳法确定野生和人工九州虫草中的核苷类成分,测定虫草素和腺苷的含量,并比较它们在九州虫草不同部位含量的分布.结果蒙山九州虫草中含有至少8种核苷或碱基,其中抗肿瘤活性成分虫草素的含量远高于冬虫夏草和蛹虫草,且人工栽培九州虫草中虫草素的含量又显著高于野生九州虫草.腺苷主要存在于九州虫草子座中,而虫草素则不仅在九州虫草子座中含量甚高,人工栽培九州虫草虫体中虫草素含量也较高.结论天然和人工九州虫草及其不同部位的核苷和碱基成分存在一定差异,九州虫草中的虫草素含量高,具有良好的栽培、药用与开发前景.
-
九州虫草Zn2+胁迫下金属硫蛋白的诱导产生规律及性质研究
目的 探讨Zn2+胁迫下九州虫草Cordyceps kyusyuensis金属硫蛋白(MT)的产生及性质.方法 以培养基中添加ZnSO4的方式,研究九州虫草在Zn2+胁迫下MT的产生规律.通过超声波细胞破碎、提取和凝胶柱色谱法对MT进行分离纯化,利用考马斯亮蓝法进行纯度鉴定.用电喷雾质谱法测定MT的相对分子质量,以Ellman's方法测定巯基的量,以原子火焰吸收法测定Zn的量,以Ag饱和分析法结合原子吸收光谱(AAS)测定MT的量,用氨基酸自动分析仪对Zn-MT进行氨基酸组成分析.通过对羟基自由基(HO·)、DPPH自由基(DPPH·)和超氧阴离子自由基(O2-·)的清除率实验探讨九州虫草MT的抗氧化活性.结果 菌丝体中Zn和MT的量随着培养基中Zn2质量浓度(0～15 g/L)的增加而增加.在10L发酵罐培养时,培养基中Zn2+质量浓度为15g/L,培养时间为56 h,金属硫蛋白的量为14.335 mg/g菌丝体(湿质量).对九州虫草的菌体蛋白通过2次凝胶柱色谱,冷冻干燥得到九州虫草MT,电喷雾质谱法测得其相对分子质量为6750,每分子Zn-MT氨基酸总量为56个,含有20个半胱氨酸,含极少量的芳香族氨基酸,可结合6个Zn原子.九州虫草Zn-MT对于HO·、DPPH·、O2-·有较好的清除作用,清除效果依次为O2-· ＞DPPH·＞HO·,其半数清除率质量浓度(IC50)分别为71.49、80.58、100.65mg/L.结论 通过紫外扫描图谱分析、蛋白柱色谱图谱分析、九州虫草Zn-MT理化性质以及抗氧化活性的测定,可以判断其与标准的兔肝MT非常相似,进一步可以确定通过九州虫草菌丝体液态发酵法可生产MT,以期为工业生产提供可靠的理论依据.
-
九州虫草中核苷类成分的HPLC法测定
虫草属[Cordyceps(Fr.)Link]真菌是一大类昆虫病原真菌,迄今记载的已有360多种,在我国分布的有70多种[1].冬虫夏草为我国传统的名贵药材,具有很好的强壮滋补功效和多种医疗保健作用.由于其生长环境独特,加之人们盲目挖采,资源已临近枯竭.因此寻找冬虫夏草的替代品以满足市场需求已刻不容缓.九州虫草Cordyceps kyushuensis Kob.采自山东蒙山,现已通过无性型菌株回接天然寄主获得了人工栽培成功[2].根据现有的对该虫草与冬虫夏草的化学成分监测、生物药效、体外抑瘤试验及抗氧化性能研究,表明其具有较高的药用价值,有望替代价格昂贵的冬虫夏草应用于临床[3,4].
-
九州虫草中黄酮类化合物的提取及定性研究
目的提取九州虫草中黄酮类化合物,并对提取物进行初步的定性和定量分析.方法通过正交实验探索乙醇回流法提取九州虫草中黄酮类化合物的佳工艺条件,在此基础上对九州虫草和冬虫夏草中黄酮类化合物进行分离提取,并进行定性研究,采用紫外分光光度法检测提取物中总黄酮类化合物的含量.结果九州虫草中黄酮类化合物佳提取工艺条件为:乙醇浓度80%,料液比1:40(g/ml),回流时间3 h,提取温度80℃,高得率为3.730mg/g.九州虫草和冬虫夏草全草干粉的黄酮类化合物提取得率分别为3.730 mg/g、1.895 mg/g.结论乙醇回流法提取九州虫草中黄酮类化合物的佳提取工艺,数据可靠,具有良好的重复性,且定性研究方法简便易行.首次报道了九州虫草较冬虫夏草含有更多的黄酮类化合物,从而为寻找冬虫夏草的替代品提供数据参考.
-
九州虫草中金属硫蛋白的诱导、提纯及性质研究
目的 以生物发酵工程为手段,探寻一种经济,高效,简易的金属硫蛋白生产工艺,并用正交试验法优选出适的生产提取条件及验证所提取的金属硫蛋白性质.方法 以经过基因工程改良的九州虫草真菌为菌种,采用液态深层发酵增殖菌丝体并用ZnSO4刺激诱导其合成金属硫蛋白,后经细胞破碎,粗提取和层析等步骤,得到锌金属硫蛋白,同时初步研究硫酸锌诱导虫草金属硫蛋白的佳条件,提纯后所得金属硫蛋白的相对分子质量,巯基含量及金属锌的含量.结果 较传统动物肝脏提取方法,九州虫草菌株发酵法可快速高效的制得金属硫蛋白,发酵过程中培养基中锌原子浓度达15 g·L-1时金属硫蛋白达到高产率,可达10.86mg·g-1菌丝体(湿重).该种锌金属硫蛋白分子量约为7 kD,每分子金属硫蛋白含有由21个半胱氨酸和7个锌原子.结论 通过蛋白柱层析图谱,紫外光扫描图谱分析,证明所提取蛋白符合金属硫蛋白的相应特征.
-
九州虫草中黄酮类化合物提取工艺研究
目的:探索九州虫草中黄酮的佳提取工艺条件.方法:利用微波提取技术,通过单因子实验、正交实验进行实验条件的优化.结果:在佳条件140W、料液比为1:25(g/ml)、1.5 min、pH值为10时九州虫草中总黄酮得率高为9.35 mg/g、冬虫夏草为6.85 mg/g.结论:微波提取技术具有提取工艺简单,提取效率高等优点较适合于实验室条件下使用.
-
九州虫草子座挥发油的超临界CO2流体萃取及GC-MS分析
目的:探讨超临界CO2萃取法提取虫草活性成分的可行性,报道九州虫草子座挥发油的组成,推测其可能的生理作用.方法:用正交实验法确定超临界CO2流体萃取九州虫草挥发油的佳条件,考察萃取压力、温度、动态萃取时间及CO2流量对挥发油收率的影响;利用GC-MS联用技术分析佳萃取条件下所得挥发油的化学成分,面积归一化法测定其百分含量.结果:超临界CO2萃取佳条件为:萃取压力20 MPa,温度50℃,萃取时间75 min,CO2流量1.0 L·min-1;所提取的挥发油共鉴定了44种成分,占挥发油总成分的88%以上,占色谱总流出组分的98.2%.结论:九州虫草挥发油中富含不饱和脂肪酸、饱和脂肪酸、烯、酯等组分,为九州虫草的药用、开发奠定了良好的研究基础.
