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基于药效筛选乌鳖颗粒中间体的醇沉工艺
目的:优选乌鳖颗粒中间体的醇沉工艺,降低该制剂的日服用量.方法:通过考察卵巢摘除大鼠雌二醇(E2),卵泡刺激素(FSH),黄体生成素(LH)的活性和幼鼠子宫、卵巢发育情况,评价乌鳘颗粒中间体醇沉工艺的合理性.以二苯乙烯苷、川续断皂苷Ⅵ和固含物转移率为指标,通过单因素试验确定佳醇沉工艺.采用HPLC测定二苯乙烯苷、川续断皂苷Ⅵ含量.结果:乌鳖颗粒中间体醇沉前后对药效试验无显著性差异.佳醇沉工艺为何首乌组提取液浓缩至相对密度1.10(60℃),加乙醇使含醇量达60％,静置时间＞12 h,上清液减压浓缩至相对密度1.20～1.23(60℃).结论:药效评价结合单因素试验确定的何首乌组醇沉工艺更加合理、可靠,降低乌鳖颗粒日服用量的同时,还保证了该制剂的有效性.
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乌鳖颗粒拮抗D半乳糖致小鼠卵巢早衰的实验研究
目的:探讨D半乳糖致雌性小鼠卵巢早衰动物模型的可行性和乌鳖颗粒的作用机理.方法:选取有正常动情周期的雌性小鼠,随机分为7组,每组10只,分别为正常组、模型组、己烯雌酚组、六味地黄丸组、乌鳖颗粒大、中、小剂量组.除正常组外,其余各组按每天0.5mL/只的剂量颈背部皮下注射5%D半乳糖溶液.第11天开始,灌胃给予治疗药,连续给药32天.每天定时观察阴道细胞,确定动情周期变化.实验末取血清测E_2血清水平,取子宫和卵巢称湿重,计算子宫指数和卵巢指数,卵巢、子宫作组织形态学观察.结果:模型组小鼠动情周期紊乱,动情间期延长,乌鳖颗粒各剂量组小鼠在给药2周左右出现动情期延长.乌鳖颗粒各剂量组的卵巢指数、子宫指数与模型组小鼠比较具有显著性差异(P<0.01).模型组小鼠的血清E_2水平明显下降,与正常组比较具有显著性差异(P<0.01).乌鳖颗粒大、中剂量组血清E_2水平比模型组有明显的升高,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05,P<0.01).乌鳖颗粒各剂童组的卵巢、子宫组织形态学明显改善.结论:乌鳖颗粒能促进子宫、卵巢的生长发育,改善卵巢、子宫的组织形态,调节卵巢内分泌的激素水平.
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乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠CD4+/CD8及Fas、FasL蛋白表达的实验研究
目的:观察乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠CD4+/CD8+及Fas、FasL蛋白表达的影响.方法:采用雌性BALB/c小鼠皮下多点注射小鼠透明带多肽,建立免疫性卵巢早衰模型.将造模成功的小鼠随机分为模型组、己烯雌酚组、六味地黄丸组、乌鳖颗粒大、中、小剂量组.另设正常组和佐剂组,共灌胃给药4周.实验末应用免疫组化法测定脾脏CD+4、CD8+,计算CD4+/CD8+的比值.应用免疫组化法测定卵巢Fas、FasL蛋白的表达.结果:模型组小鼠脾脏CD4+/CD8+比值明显高于正常组和佐剂组(P＜0.05).乌鳖颗粒各剂量组小鼠脾脏CD4+/CD8+比值明显低于模型组(P＜0.05,P＜0.01).模型组小鼠卵巢Fas蛋白表达低于正常组,Fas -L蛋白表达明显高于正常组,卵巢Fas、Fas -L蛋白表达和Fas/Fas -L比值与正常组比较具有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01).乌鳖颗粒大剂量组和中剂量组小鼠Fas蛋白表达明显高于模型组,(P＜0.05,P＜0.01).乌鳖颗粒各剂量组Fas -L蛋白表达明显低于模型组(P＜0.05,P＜0.01).乌鳖颗粒大剂量组、中剂量组小鼠Fas/Fas -L比值与模型组比较具有显著性差异(P＜0 01).结论:乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠具有调节CD4+/CD8+比值和Fas/FasL系统的作用.
关键词： 乌鳖颗粒 卵巢早衰 CD4+/CD8+ Fas/FasL表达 -
乌鳖颗粒定性定量方法研究
目的:建立乌鳖颗粒的定性定量方法.方法:采用薄层色谱法对处方中的制何首乌、白术、续断和枸杞子进行定性鉴别；采用高效液相色谱法测定制剂中2,3,5,4 ’ -四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷和川续断皂苷Ⅵ含量.HPLC色谱条件:采用Hedera ODS -3 C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长212 nm,柱温30℃；结果:薄层色谱鉴别方法专属性强,阴性对照无干扰；含量测定结果表明,2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2 -O-β-D-葡萄糖苷进样量在0.04462～0.4462μg范围内呈良好的线性关系(r=1.000),平均回收率为97.33%( RSD= 1.3%,n=6)；川续断皂苷Ⅵ进样量在0.6636～ 6.636μg范围内呈良好的线性关系(r=1.000),平均回收率为100.3% (RSD =2.7%,n=6).结论:本方法简便、准确,重复性好,可用于乌鳖颗粒的质量控制.
