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掌叶半夏提取物的有效部位对宫颈癌细胞株HPVE6和P53基因表达的影响
目的:观察中药掌叶半夏提取物的有效部位(PE)对CaSki和HeLa细胞人乳头瘤病毒(HPV) E6基因和P53基因表达的影响,进一步阐明PE的抑癌机制.方法:0.15mg/mL的PE作用于CaSki和HeLa细胞24h后,采用RT-PCR方法检测两种细胞HPVE6和P53 mRNA表达的变化,采用Western Blot检测CaSki和HeLa细胞HPVE6、P53蛋白表达的变化.结果:0.15mg/mL的PE作用24h后CaSki和HeLa细胞HPVE6 mRNA和蛋白的表达均明显下降,而P53mRNA和蛋白的表达均明显上升(P＜0.05,P＜0.01).结论:PE可以明显抑制CaSki和HeLa宫颈癌细胞株HPVE6基因的表达、促进其P53基因的表达,这可能是PE抗宫颈癌作用的关键环节.
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掌叶半夏提取物的有效部位不同给药途径对人宫颈癌细胞株CaSki裸小鼠移植瘤的抑制作用
目的:观察不同给药途径下掌叶半夏提取物的有效部位(PE)对CaSki裸小鼠皮下移植瘤的抑制作用,以探索PE的体内佳给药途径.方法:建立CaSki裸小鼠皮下移植瘤模型,待移植瘤体积增至大约100mm3,将裸小鼠随机分为阴性对照组、灌胃组、腹腔注射组、皮下注射组、顺铂阳性对照组.测量肿瘤径线,计算肿瘤体积并描绘肿瘤生长曲线.药物处理21d,第22天颈椎脱臼处死裸小鼠,称取瘤重,计算抑瘤率.HE染色观察移植瘤组织形态,免疫组化检测移植瘤组织中Ki-67的表达情况.结果:灌胃组、腹腔注射组、顺铂阳性对照组裸小鼠移植瘤重量明显小于阴性对照组和皮下注射组(P＜0.05),抑瘤率分别为38.71％,31.86％,45.92％.且灌胃组、腹腔注射组移植瘤组织K i-67表达明显低于阴性对照组和皮下注射组(P＜0.05).结论:PE能够抑制CaSki裸小鼠皮下移植瘤的生长,其体内实验的佳给药途径可以是灌胃或者腹腔注射,推荐实验中采取灌胃方式.抑制Ki-67的表达可能是PE体内抑瘤作用机制之一.
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掌叶半夏提取物的有效部位对CaSki的促凋亡作用机制研究
目的:前期的研究已证实中药掌叶半夏提取物的有效部位(pinellia extract fraction,PE)对体外培养的宫颈癌细胞株CaSki和HeLa有促凋亡作用,通过本次研究进一步明确PE对CaSki的促凋亡作用机制.方法:采用RT-PCR方法检测0.15g/L的PE作用24h后CaSki细胞Bcl-2和Bax mRNA表达的变化.采用Western Blot检测0.15g/L PE作用24h后CaSki细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的变化.结果:0.15g/L的PE作用24h后CaSki细胞Bcl-2 mRNA和蛋白的表达均明显下降,而Bax mRNA和蛋白的表达均明显上升.结论:PE对CaSki宫颈癌细胞株促凋亡作用之一是抑制Bcl-2基因的表达、促进Bax基因的表达.这为进一步研究PE的抗宫颈癌作用机制以及新药的研制开发奠定了一定的实验基础.
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植酸酮对宫颈癌细胞株中 HPV16／18 E6／E7 mRNA 及蛋白表达的影响
目的：观察植酸酮对宫颈癌细胞株中HPV16／18 E6／E7 mRNA及蛋白表达的影响。方法体外培养Caski细胞株（含HPV16）与Hela细胞株（含HPV18），将所有细胞分成实验1、2、3、4组和对照组，每组均包含Caski细胞和Hela细胞。实验1、2、3、4组分别加入含58．6、117、586、5860 mg／L植酸酮的培养液，对照组加入不含植酸酮的培养液。各组培养72 h后，采用real-time PCR法分别检测HPV16／18 E6／E7 mRNA，采用Western blotting法检测E6／E7蛋白。结果实验1、2、3、4组同一型别细胞中E6／E7 mRNA及蛋白相对表达量低于对照组，且实验1、2、3、4组E6／E7 mRNA及蛋白相对表达量依次降低（P均＜0．05）。各实验组内，Caski细胞中E6／E7 mRNA相对表达量低于Hela细胞（P均＜0．05）。各实验组内同一型别细胞中，E6 mRNA相对表达量低于E7 mRNA（P均＜0．05）。结论植酸酮可下调人宫颈癌细胞株中HPV16／18 E6／E7 mRNA及蛋白表达，且作用呈剂量依赖性；植酸酮对HPV16 E6／E7 mRNA的抑制作用强于HPV18 E6／E7 mRNA，并可能以抑制E6 mRNA表达为主导。
