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人乳头瘤病毒16型E7蛋白的原核表达与鉴定
本研究在大肠杆菌BL21中融合表达人乳头瘤病毒16型E7蛋白,并初步评价其应用价值.采用PCR技术扩增出HPV16 E7基因,将其克隆进原核表达载体pGEX6p-1,转化至大肠杆菌BL21,利用IPTG进行诱导表达.以纯化的融合蛋白作为检测抗原建立间接ELISA方法,用于检测重组李斯特菌(Lm1-2-E7)免疫小鼠后的E7血清抗体水平.在25℃,0.5mM IPTG诱导下,HPV16 E7蛋白在大肠杆菌BL21中获得表达,融合蛋白以可溶性形式存在,Western blot结果显示其与HPV16 E7单克隆抗体发生特异性反应.二次免疫后小鼠血清经间接ELISA结果表明E7特异性抗体滴度为1:200.结果表明GST-E7融合蛋白具有较强的免疫活性.
关键词： 人乳头状瘤病毒16型 E7蛋白 原核表达 蛋白质印迹 ELISA -
人乳头瘤病毒16型E7蛋白的生物信息学分析
目的 应用生物信息学预测分析人乳头瘤16型病毒(human papillomavirus type 16,HPV16) E7蛋白的结构特征与抗原表位. 方法 自NCBI GENE BANK获取HPV16E7蛋白的基因信息,应用ProtParam分析其编码的E7蛋白理化性质和一级结构;利用SO)PMA分析E7蛋白的二级结构;应用 SWISS MODEL的Automated mode预测E7蛋白的三维空间结构;使用NetNGlyc 1.0 Server、NetPhos3.1Server、MotifyScan、SignalP及TMHMM预测蛋白质的翻译后修饰位点、信号肽切割位点和跨膜区;利用CLUSTALX将HPV16 E7蛋白同其他高危型HPV E7蛋白进行同源性对比;应用ABCpred、BepiPred、IEDB、SYFPEITHI和NetMHCIIpan 3.1 Server预测E7蛋白的优势抗原表位. 结果 生物信息学预测E7蛋白无规卷曲占52.04％,结构较松散,为不稳定性蛋白.该蛋白存在多个磷酸化位点.利用序列匹配度为46％的HPV45E7蛋白为模板得到同型二聚体三级预测结构.E7蛋白高度保守,且具有潜在的B细胞抗原表位1-8、15-22、33-46,CD8+T细胞抗原表位82-90、11-19、7-11、85-93、13-21和CD4+T细胞抗原表位9-23、73-87、10-24、7-21、21-35. 结论 HPV16 E7蛋白为不稳定蛋白.该蛋白高度保守,且具有潜在的B、T细胞抗原表位.
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5种高危型HPVE7蛋白B细胞表位的预测
目的 预测并分析我国人群常见人乳头瘤病毒HPV16、18、33、52与58亚型E7蛋白的线性B细胞表位.方法 在NCBI数据库中获取5种高危型HPVE7蛋白氨基酸序列,采用ClustalX2软件进行多序列比对;运用ExPASY服务器SOPMA和GOR4法预测二级结构,采用Kyte-Doolittle方案和Hopp-Wood方案预测亲水性;运用Bepipred和ABCpred软件预测B细胞表位,辅以抗原性指数,综合评判几率较大的B细胞优势表位. 结果 综合多参数分析,5种HPV亚型的B细胞表位均集中在蛋白质的N端2-50位附近,其中预测的HPV16与52亚型的第16-21位氨基酸序列一致性为100％,均为QPETTD;HPV16型第28-41位(LNDSSEEEDEIDGP)与HPV52型第28-38位(LGDSS-DEEDTD)的氨基酸序列一致性为78％;HPV16型第42-50位(AGQADEPRA),HPV33型第31-46位(SSDEDE-GLDRP),HPV52型第36-46位(DTDGVDRPDGQ)和HPV58型第73-78位(TTTDVR)为各自的特异B细胞表位.结论 生物信息学方法预测5种HPV的B细胞表位均集中在蛋白质的N端2-50位附近,同时具有特异的B细胞表位(18型除外),可为宫颈癌的诊断、预防和新型疫苗的研制提供参考.
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人乳头瘤病毒E7蛋白检测子宫颈上皮内病变的价值
目的 探讨人乳头瘤病毒(HPV) E7蛋白检测宫颈病变的临床应用价值.方法 选取180例高危型HPV阳性妇女,采用免疫细胞化学方法检测宫颈脱落细胞HPV E7蛋白.结果 ①病理高级别宫颈上皮内病变(HSIL)及浸润癌组HPV E7蛋白阳性率(77.8％,56/72)显著高于低级别宫颈上皮内病变(LSIL)组(52.1％,25/48;P=0.003),病理LSIL组阳性率显著高于宫颈炎组(26.7％,16/60;P=0.007);②对于细胞学为ASCUS和LSIL的妇女,HPV E7蛋白诊断HSIL及宫颈癌的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为97.1％、52.1％、58.9％和96.2％;③HPV E7蛋白和TCT诊断LSIL及以上病变的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为67.5％ vs 51.7％、73.3％ vs 58.3％、83.5％ vs 71.3％、53.0％ vs 37.6％,除特异度外,E7蛋白诊断的价值优于TCT (P＜0.05).结论 HPV E7蛋白在检测宫颈病变,尤其是在细胞学轻度异常患者的分流中,具有一定的临床应用价值.
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HPV E6、E7与端粒酶激活研究进展
人乳头状瘤病毒(HPV)感染和人子宫颈癌的发生密切相关,HPV致癌作用的主要基因为E6、E7.癌蛋白E6和E7通过与细胞抑癌基因p53和Rb蛋白产物作用并使之失活,导致细胞周期调节紊乱.近几年的一些研究结果表明,端粒酶是癌变过程诸多环节中关键一环,端粒酶活性可能成为临床检测宫颈癌一个重要的肿瘤标志物,E6、E7对端粒酶的表达调控也具有重要的影响.综述HPV E6、E7与端粒酶激活以及相互之间关系的相关机理研究.
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人乳头状瘤病毒86E7重组蛋白的高效表达、纯化和表征
[目的]基因工程法构建谷胱甘肤S-转移酶(GST)-人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus)HPV86 E7融合蛋白表达质粒,高效表达、纯化、鉴定蛋白质和分析蛋白质的存在形式.[方法]GST-HPV86 E7融合蛋白基因与pGEX-6P-1载体连接成重组表达质粒pGEX-6P-1-GST-HPV86 E7,重组质粒转入BL21大肠杆菌,经IPTG诱导表达融合蛋白GST-HPV86 E7,柱上切除GST标签,Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化蛋白,SDS-PAGE、MALDI-TOF和色谱质谱联用系统分别用于蛋白质纯度分析、分子量测定和蛋白鉴定;非变性电泳和分子筛排阻色谱用于蛋白质四级结构的分析.[结果]HPV86 E7大肠杆菌中正确表达,基质辅助激光解析飞行时间质谱测得的HPV86 E7精确分子量为(11319.76±5.66)Da.反相高压液相色谱-电喷雾串联质谱鉴定的匹配肽段有11个肽段,氨基酸的覆盖率为90%.非变性PAGE和凝胶过滤层析实验观察到了HPV86 E7的单聚体、二聚体及多聚体.[结论]重组质粒pGEX-6P-1-GST-HPV86 E7成功构建,诱导后高效表达GST-HPV86 E7融合蛋白,HPV86 E7得到纯化,质谱分析证实表达蛋白为86E7蛋白,以多聚体形式存在.
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人乳头瘤病毒致癌特性及其E6和E7蛋白致癌机制的研究进展
人乳头瘤病毒(HPV)是一种感染人的乳头瘤病毒科病毒,主要感染上皮细胞,其高危型别(主要是16和18型)可引起恶性肿瘤.高危型HPV感染上皮细胞后,其DNA能整合入细胞基因组,并由于其E2基因表达障碍不能有效抑制E6、E7基因转录而持续高表达E6和E7 2种癌蛋白.E6和E7蛋白可分别抑制P53蛋白和pRb蛋白的作用而使细胞周期失控,在细胞基因组受到损伤时细胞周期仍然向前进展;E6蛋白能通过影响多种凋亡调节蛋白或因子的表达而抑制细胞凋亡;E6蛋白和E7蛋白能协同作用上调端粒酶的表达而使细胞永生化;以上机制终导致受感染细胞发生恶性转化或癌变.本文对HPV的致癌特性及其所表达的E6蛋白和E7蛋白扰乱细胞周期、抑制细胞凋亡并活化端粒酶使细胞永生化的致癌机制的研究进展进行了综述.
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人乳头瘤病毒16型E7蛋白的表达、纯化及抗血清制备
目的 建立人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型E7蛋白的原核表达系统,表达HPV16 E7蛋白,制备小鼠抗HPV16 E7血清.方法 采用PCR方法扩增HPV16 E7基因,构建入pET21b质粒,重组表达载体经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3).诱导表达后经十二烷基硫酸钠(so-dium dodecyl sulphate,SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)和Western blot鉴定表达产物.提取包涵体进行变性复性处理后纯化,纯化后的可溶性蛋白免疫Balb/C小鼠,检测小鼠体内 γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)水平、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化.结果 PCR扩增片段为0.3 Kb,酶切和序列测定证实重组质粒构建正确.SDS-PAGE在11 KD处出现蛋白条带.蛋白表达以包涵体为主.免疫后小鼠抗体效价升高,CD4/CD8比值无升高,IFN-γ无反应.结论 成功制备可溶性HPV16E7蛋白和小鼠抗HPV16E7高效价抗血清.
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HPV16型E7蛋白在喉癌组织中的表达
Syrjanen[1]首次提出人乳头瘤病毒(HPV)感染与喉癌有关,但其致癌机制还不完全清楚.我们用免疫组化方法检测了42例喉癌组织及26例声带息肉中的HPV16型E7蛋白表达,探讨其在喉癌发病过程中的生物学意义,为喉癌的防治提供依据.
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人乳头瘤病毒6型E7与结核杆菌热休克蛋白70融合基因的构建及原核表达
目的:构建结核杆菌热休克蛋白(HSP)70与人乳头瘤病毒(HPV)6型E7抗原的融合基因,在大肠杆菌中进行表达和纯化.方法:利用PCR方法扩增结核杆菌HSP70基因,插入原核表达载体pGEX-4T-1;经测序后,再通过PCR方法扩增HPV6型E7基因片段,测序后插入HSP70基因的5'端,构建HPV6 E7与结核杆菌HSP70的N端融合基因原核表达质粒pGEX-E7-HSP70;在含有该质粒的大肠杆菌DH5α中,进行诱导表达和分离纯化.结果:成功地构建了pGEX-E7-HSP70原核表达质粒;在含有该质粒的大肠杆菌DH5α中,经异丙醇-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后表达相对分子质量约为108000的蛋白;经谷胱甘肽硫转移酶(GST)融合蛋白表达系统纯化,得到E7与结核杆菌HSP70的可溶性融合蛋白.结论:成功获得HPV6型E7与结核杆菌HSP70的融合蛋白,为研究该融合蛋白疫苗在尖锐湿疣治疗中的作用奠定了基础.
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人乳头瘤病毒16型E7基因的原核克隆与表达
目的:研究人乳头瘤病毒(Human papillomavirus HPV)16型E7在原核表达系统中的表达情况和活性,为制备HPV16型E7蛋白疫苗奠定实验基础.方法:通过聚合酶联反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)从HPV16 DNA阳性的宫颈癌组织中扩增HPV16 E7全长基因,进一步将其克隆入原核表达载体pET32a(+),并构建重组质粒pET32a(+)/HPV16 E7,经测序鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达的融合蛋白,用镍螯合亲和层析胶体(Ni-NTA Agarose)纯化,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹法(Western blot,WB)分析鉴定.结果:测序证明成功构建重组质粒pET32a/HPV16E7,IPTG诱导下HPV16E7融合蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,重组蛋白的表达量占菌体总蛋白的16%,蛋白质印迹鉴定重组E7蛋白与表达载体的标签蛋白形成相对分子质量约30×103的可溶性融合蛋白.结论:重组质粒pET32a/HPV16E7在大肠杆菌BL21中高效表达目的蛋白.
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HPV16E6、E7蛋白在肺癌组织中的表达及意义
目的 研究漯河周边地区非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)病变组织中HPV16E6、E7蛋白表达情况及与临床病理参数之间的关系,探讨HPV16E6和E7蛋白在NSCLC发病机制中的作用.方法2010年3月—2011年6月采用免疫组织化学技术分别检测80例NSCLC标本和55例癌周对照组织中HPV16E6和E7蛋白的表达,并进行对比,计数资料采用x2检验或确切概率法,P ＜0.05为差异有统计学意义.结果 80例NSCLC组织中,HPV16 E6、E7、E6/E7蛋白的表达率分别为31.3％、33.8％和28.8％,55例癌旁组织中,HPV16E6、E7、E6/E7蛋白表达阳性率分别为14.5％、9.2％、7.3％.NSCLC组织中E6、E7和E6/E7蛋白共表达阳性率均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),与患者年龄、性别以及肿瘤组织学类型无关,但与肿瘤分化以及淋巴结转移有关.结论 HPV16E6和E7蛋白在NSCLC发生发展中具有重要作用.
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干扰素诱导蛋白IFI16与HPV16E6、E7蛋白相互作用的研究
目的:研究人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型E6、E7蛋白与干扰素诱导蛋白IFI16的相互作用,初步揭示IFI16拮抗HPV16E6、E7致瘤活性的分子机制.方法:(1)体外GST阻滞分析:克隆、表达及纯化GST-HPV16E6和GST-HPV16E7融合蛋白,将含有IFI16蛋白的EB病毒阴性伯基特淋巴瘤(BJAB)细胞提取物与上述纯化蛋白孵育,通过Western B1otting分析蛋白质的体外相互作用;(2)免疫共沉淀分析:构建表达His-HPV16E6蛋白的真核表达载体,将表达有IFI16和HIs-HPV16E6蛋白的293T细胞裂解物与抗His抗体孵育,用IFI16抗体检测共沉淀蛋白复合物中IFI16蛋白的存在;将表达有IFI16和HPV16E7蛋白的CaSki和SiHa细胞裂解物与HPV16E7抗体孵育,检测共沉淀蛋白复合物中E7与IFI16是否结合.结果:成功构建了原核表达质粒pGEX4T/HPV16E6及pGEX-4T/HPV16E7,并表达、纯化获得GST-HPV16E6及GST-HPV16E7融合蛋白.体外GST阻滞分析结果表明,用IFI16单抗做Western B1otting分析可检测到复合物中IFI16蛋白,表明GST-HPV16E6和GST-HPV16E7均可与IFI16蛋白结合.免疫共沉淀分析进一步证实,共沉淀蛋白复合物中也可检测到IFI16蛋白,证明在细胞中HPV16E6和E7蛋白也能与IFI16蛋白结合.结论:无论在体外还是在细胞中,抑瘤因子IFI16蛋白均能特异性地结合HPV16 E6和E7蛋白.为进一步揭示IFI16拮抗HPV主要癌蛋白E6、E7的分子机制奠定了基础.
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植酸酮对宫颈癌细胞株中 HPV16／18 E6／E7 mRNA 及蛋白表达的影响
目的：观察植酸酮对宫颈癌细胞株中HPV16／18 E6／E7 mRNA及蛋白表达的影响。方法体外培养Caski细胞株（含HPV16）与Hela细胞株（含HPV18），将所有细胞分成实验1、2、3、4组和对照组，每组均包含Caski细胞和Hela细胞。实验1、2、3、4组分别加入含58．6、117、586、5860 mg／L植酸酮的培养液，对照组加入不含植酸酮的培养液。各组培养72 h后，采用real-time PCR法分别检测HPV16／18 E6／E7 mRNA，采用Western blotting法检测E6／E7蛋白。结果实验1、2、3、4组同一型别细胞中E6／E7 mRNA及蛋白相对表达量低于对照组，且实验1、2、3、4组E6／E7 mRNA及蛋白相对表达量依次降低（P均＜0．05）。各实验组内，Caski细胞中E6／E7 mRNA相对表达量低于Hela细胞（P均＜0．05）。各实验组内同一型别细胞中，E6 mRNA相对表达量低于E7 mRNA（P均＜0．05）。结论植酸酮可下调人宫颈癌细胞株中HPV16／18 E6／E7 mRNA及蛋白表达，且作用呈剂量依赖性；植酸酮对HPV16 E6／E7 mRNA的抑制作用强于HPV18 E6／E7 mRNA，并可能以抑制E6 mRNA表达为主导。
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喉鳞癌组织中HPV16、18E6和HPV16E7蛋白表达及其相关性研究
目的： 探讨人乳头瘤病毒(HPV)16、18型E6和E7蛋白与喉鳞癌发生的关系以及两种蛋白在致病过程中的相互关系。方法： 采用免疫组化SABC方法对58例喉鳞癌，30例癌旁组织和30例声带息肉进行检测。结果： 在喉鳞癌和癌旁组织中的E6蛋白的表达率分别为31.0%(18/58)和20.0%(6/30)；E7蛋白的表达率分别为32.7%(19/58)和20.3%(7/30)。声带息肉组中未见E6和E7蛋白阳性表达。E6和E7蛋白表达率在喉癌组与息肉组之间，有颈淋巴结转移组与无颈淋巴结转移组之间均有显著性差异(P＜0．01)。E6和E7蛋白在喉鳞癌中的表达结果具有明显的相关性。结论： HPV16、18E6和HPV16E7蛋白与喉鳞癌发生、发展关系密切，E6与E7蛋白在致癌过程中有协同作用。
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HPV16型-E6、E7在食管鳞癌组织与非癌组织中的表达
背景与目的:越来越多的证据表明高危型人乳头状瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV),特别是HPV16型与多种肿瘤发生、发展密切相关.本研究旨在分析人乳头状瘤病毒HPV16型E6、E7在食管正常组织、不典型增生组织和癌组织中的表达,以探讨HPV16型在食管鳞癌发生、发展中的生物学意义.方法:采用PicTureTM免疫组织化学方法对70例食管癌切除标本上、下切缘的正常粘膜上皮组织、43例不典型增生组织以及18例癌组织中的HPV16型E6、E7蛋白表达情况进行研究.结果:E6蛋白阳性率在正常食管粘膜上皮组织中为59.3%,在上皮不典型增生组织中为88.4%,在癌组织中为83.3%;E7蛋白在上述3种组织中的阳性率分别为62.1%、90.7%和88.9%.与正常食管粘膜上皮相比,上皮不典型增生组织和癌组织中E6、E7蛋白表达均有显著性差异(P＜0.05).HPV16型E6、E7蛋白在正常食管粘膜组织中同时表达即同步率为25.7%,而在上皮不典型增生组织和癌组织中二者同步率分别为88.3%和83.3%.结论:HPV16型E6、E7蛋白与食管鳞癌发生、发展密切相关,二者协同作用可能是食管鳞癌发生、发展的重要因素之一.
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HPV16E6和E7蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义
目的 研究漯河周边地区HPV16 DNA阳性的非小细胞肺癌(NSCLC)病变组织中E6、E7蛋白表达情况及与临床病理参数之间的关系,探讨HPV16 E6和E7蛋白在NSCLC 发病机制中的作用.方法 以核酸分子快速导流杂交基因芯片技术(HybrMax)检测证实的HPV16 DNA阳性的52例新鲜NSCLC和40例癌周肺组织为研究对象,采用Western blot方法检测HPV16 E6和E7蛋白的表达.结果 HPV16 DNA阳性NSCLC组织中,HPV16 E6、E7、E6/E7蛋白的表达率分别为48.1%、51.9%、44.2%; 40例癌周肺组织中,HPV16 E6、E7、E6/E7蛋白表达阳性率分别为20.0%、15.0%、29.3%.HPV16 DNA阳性NSCLC组织中E6、E7和E6/E7蛋白共表达阳性率均高于癌周肺组织(P<0.05),与患者年龄、性别以及肿瘤组织学类型无关(P>0.05),但与肿瘤分化以及淋巴结转移有关(P<0.05).结论 HPV16 E6和E7蛋白在NSCLC发生发展中具有重要作用,并可能参与NSCLC的淋巴道转移.
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E7蛋白在HPV16变异体持续感染患者宫颈组织中的表达
目的:探索HPV16亚洲变异体E6 T178G及欧洲变异体E6 T350G,A442C与其他变异体致宫颈病变及机制的异同.方法:选取浦东新区人民医院门诊或住院患者中HPV16型单一阳性、宫颈细胞学正常的300例研究对象,予宫颈液基薄层细胞学检查(Thinprep cytologic test,TCT)采集宫颈脱落细胞,对其E2、E6、E7基因序列进行检测;1年后复查TCT、HPV,持续感染者再次基因测序明确HPV16变异体分型,并对持续感染者进行阴道镜活检后病理检查,对所有患者均用SP免疫组化法检测E7蛋白表达水平.结果:HPV16变异体持续感染1年后,292例成功测序的患者中,259例慢性宫颈炎,32例宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(CINI),1例宫颈上皮内瘤变I级(CINII).E7蛋白在各种变异体感染的患者宫颈组织中均有表达,其在亚洲变异体及欧洲变异体感染组与其他变异体感染组之间表达无明显差异(P>0.05).结论:E7蛋白可能在HPV16变异体致宫颈病变的早期阶段即发挥作用,但E7蛋白可能并不是HPV16不同变异体致宫颈病变机制不同的参考指标.
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结直肠癌组织HPV16 E7 DNA及蛋白表达的研究
目的分析不同部位、分期的结直肠癌及正常黏膜组织中人乳头状瘤病毒(human papilloma virus,HPV)16型 E7的表达状况.方法应用PCR及免疫组化方法检测82例手术切除的结直肠癌新鲜标本及距肿瘤近端10 cm以远的正常黏膜组织中HPV16 E7 DNA及蛋白的表达.结果结直肠癌组织HPV16 E7 DNA表达阳性率为51.22%(42/82),明显高于正常黏膜组织的4.88%(4/82),P＜0.01;直肠癌组织中HPV16 E7 DNA表达阳性率为64.10%(25/39),明显高于升结肠癌的18.18%(2/11),P＜0.05;HPV16 E7 DNA表达阳性率与Dukes分期有关(P＜0.01),与癌组织分化程度无关.免疫组化染色显示,HPV16 E7蛋白主要为细胞核表达,胞浆也可见少量表达,进一步确认了HPV16的感染,且HPV16 E7蛋白与HPV16 E7基因的表达具有相关性,免疫组化敏感性较PCR方法为低.结论结直肠癌组织HPV16 E7 DNA及蛋白的表达阳性率明显高于正常黏膜组织,提示部分结直肠癌存在HPV16感染.癌灶部位距肛门越近,感染率越高;Dukes分期越晚感染率越高.
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11型HPV E7蛋白的表达及其多克隆抗体的制备
目的 构建人11型乳头瘤病毒(HPV 11)E7蛋白的原核表达载体,表达纯化后制备抗HPV 11 E7蛋白的多克隆抗体.方法 构建pGEX-4T2-HPV11 E7原核表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导大肠杆菌表达可溶性融合蛋白GST-HPV11 E7,纯化获取11型HPVE7蛋白.将HPV11 E7蛋白免疫新西兰大白兔获得抗HPV11E7的多克隆抗体,用蛋白G琼脂糖纯化获得IgG型多克隆抗体.Western blot法及免疫荧光染色检测该抗体的效价及特异性.结果 SDS-PAGE结果显示,经IPTG诱导6h后可表达出高水平可溶性GST-HPV11 E7融合蛋白.纯化后免疫新西兰大白兔获得抗HPV11 E7的血清,纯化获得了IgG型多克隆抗体.Western blot及免疫荧光染色结果显示,兔抗HPV11E7 IgG具有效价高和特异性强的特点.结论 成功表达了HPV11 E7蛋白并制备了效价较高、特异性较好的IgG型兔抗HPV11 E7蛋白多克隆抗体.
