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SYBR Green Ⅰ RT-PCR定量检测葛根芩连方对Wa株轮状病毒感染乳鼠小肠上皮SLC5A1 mRNA表达的影响
目的:探讨葛根芩连方(GGQL)治疗Wa株轮状病毒(RV)感染性腹泻的作用机制.方法:建立RV-Wa感染4天龄昆明小鼠乳鼠的腹泻模型,采用实时SYBR Green Ⅰ嵌合荧光定量RT-PCR方法,检测GGQL对乳鼠小肠组织钠离子葡萄糖联合转运子(SLC5A1) mRNA的表达差异变化.结果:RV感染乳鼠小肠SLC5A1 mRNA表达降低；GGQL组小肠组织SLC5A1 mRNA表达明显升高.结论:GGQL对感染RV感染性乳鼠腹泻的治疗作用可能与上调小肠SLC5A1 mRNA的表达有关.
关键词： 葛根芩连方 Wa株轮状病毒 腹泻 钠离子葡萄糖联合转运子mRNA -
葛根芩连方抗Wa株轮状病毒的药效学研究
目的观察葛根芩连方对Wa株轮状病毒感染乳鼠腹泻的治疗作用，为深入研究开发葛根芩连方提供实验依据。方法建立Wa株轮状病毒感染昆明小鼠乳鼠腹泻模型和空白对照模型，以葛根芩连方提取物0.78 g/kg进行干预治疗，比较用药前后Wa株轮状病毒感染乳鼠的体征、腹泻率、腹泻程度、小肠及肺的病理形态学等指标变化。结果葛根芩连方提取物0.78 g/kg能够降低乳鼠的腹泻率，减轻腹泻程度，改善感染乳鼠体征及小肠病理形态学变化。结论葛根芩连方具有抗Wa株轮状病毒作用。
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葛根芩连方中多成分肠渗透性的原药材归属研究
中药生物药剂学分类系统(biopharmaceutics classification system of Chinese materia medica,CMMBCS)构建的复杂层面为中药复方研究,在坚持多成分同时测定的前提下,开展渗透性研究时,其首要任务是明确透过肠壁而被吸收的成分来源,即具体归属于中药复方中的哪味药材.该研究利用化学成分指纹图谱技术(chemical fingerprint),采用离体翻转肠囊实验技术对经典名方葛根芩连方中的肠渗透多成分进行直观来源归属,为下一步的肠渗透性定性及定量研究奠定基础.
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葛根芩连方对Wa株轮状病毒感染乳鼠结肠上皮AQP4表达的影响
目的 探讨葛根芩连方(GGQL)对Wa株轮状病毒(RV-Wa)感染性腹泻的乳鼠结肠上皮水通道蛋白4(AQP4)表达的影响.方法 建立RV-Wa感染4d龄乳鼠的腹泻模型,采用实时SYBR green Ⅰ嵌合荧光定量RT-PCR和免疫组化方法,检测GGQL对乳鼠结肠AQP4表达变化.结果 模型组结肠组织AQP4 mRNA较正常对照组表达升高(P＜0.01); GGQL组较模型组结肠组织AQP4mRNA表达降低(P＜0.01).免疫组化显示GGQL组结肠组织AQP4表达阳性细胞减少.结论 GGQL对RV-Wa的感染性乳鼠腹泻有一定的治疗作用.其作用机理可能与下调结肠AQP4的表达有关.
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葛根芩连方药中黄连总生物碱的含量测定
目的建立葛根芩连汤及其制剂中黄连总生物碱的含量测定方法.方法氧化铝柱纯化,紫外分光光度法350nm处测定含量.结果葛根芩连汤水提物中总生物碱含量为32.4mg/g,加样回收率为98.1%(RSD=2.9%).葛根芩连微丸中总生物碱含量为19.6 mg/g.结论该法测定黄连总生物碱方法简单、结果准确,可为葛根芩连微丸质量标准、葛根芩连方及其他含黄连的方剂中生物碱的含量测定提供参考.
