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化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠相关炎性因子的影响
目的:探讨化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠相关炎性因子抗炎的作用机制.方法:72只大鼠随机分为空白组、模型组、对照组和化痰祛湿活血方高、中、低剂量组.取肝组织观察HE染色变化及肝组织匀浆;检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)水平;运用ELISA法测血清及肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-1α、IL-6、IL-10的蛋白表达.结果:与模型组比较,对照组和化痰祛湿活血方组治疗后血清ALT、AST、TG水平均显著下降(P＜0.05),其中化高组降低为显著(P＜0.05),血清及组织中TNF-α、IL-1 α、IL-6的表达明显下降,IL-10的表达则显著上升(P＜0.01,P＜0.05).结论:化痰祛湿活血方用于抗大鼠NASH有显著效果,其机制可能与下调TNF-α、IL-1 α、IL-6及上调IL-10表达有关.
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化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂联素及其受体的干预研究
目的:探讨脂联素(ADPN)及其脂联素受体2(AdipoR2)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)病理影响及化痰祛湿活血方干预作用.方法:采用高脂饲料联合四环素腹腔注射建立大鼠NASH模型.造模第2周采用化痰祛湿活血方高、中、低剂量和多烯磷脂酰胆碱(易善复)胶囊干预观察高脂模型.实验结束时,进行肝组织HE染色,ADPN、AdipoR2免疫组化染色,观察病理改变及ADPN、AdipoR2表达.结果:与对照组比较,化痰祛湿活血方高剂量能明显升高ADPN、AdipoR2蛋白表达(P＜0.01),减轻肝脂肪变性及炎症程度.结论:化痰祛湿活血方可能通过上调ADPN、AdipoR2表达,减轻肝脏炎症,改善肝细胞脂肪沉积.
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化痰祛湿活血方干预非酒精性脂肪性肝炎大鼠ADPN/AKT/NF-κB通路的研究
目的 探讨化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠ADPN/AKT/NF-κB信号通路中关键蛋白ADPN、AdipoR2、p-AKT(ser473)、p-NF-κBp65(ser536)表达的影响及抗炎作用.方法 72只雄性SD大鼠,随机分为空白组、模型组、对照组及化痰祛湿活血方高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组12只;空白组予普通饲料、不给药,其余5组予高脂饲料;模型组予生理盐水1 mL/100 g灌胃,对照组予多烯磷脂酰胆碱28.5 mg/100 g灌胃,高剂量、中剂量、低剂量组分别予化痰祛湿活血方5.04、2.52、1.26 g/100 g灌胃,连续7周.检测肝功能(ALT、AST、ALP)、血脂(TC、TG)、血糖(GLU)水平,HE染色观察肝组织病理学变化,免疫组化测定ADPN、AdipoR2、p-AKT(ser473)、p-NF-κBp65(ser536)蛋白表达.结果 (1)与空白组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、ALP、TC、TG、GLU水平明显升高(P＜0.01);与模型组比较,各用药组大鼠血清ALT、AST、ALP、TC、TG、GLU水平均明显下降(P＜0.05,P＜0.01);与化痰祛湿活血方高剂量组比较,化痰祛湿活血方中、低剂量组及对照组大鼠血清ALT、AST、ALP、TC、TG、GLU水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01).化痰祛湿活血方高剂量组少数肝细胞胞内有细小脂滴,小叶分界清晰,肝索呈放射状排列;中剂量组部分肝细胞存在大小不等的脂滴,少数汇管区有炎症细胞浸润.(2)与空白组比较,模型组大鼠肝组织ADPN、AdipoR2、p-AKT(ser473)蛋白表达明显下降,p-N F-κB p65(ser536)蛋白表达明显升高(均P＜0.01);与模型组比较,各用药组大鼠肝组织AdipoR2、p-A KT(ser473)蛋白表达明显升高,p-NF-κBp65蛋白表达明显下降(均P＜0.01),化痰祛湿活血方高、中剂量组及对照组大鼠肝组织ADPN蛋白表达明显升高(P＜0.01);与高剂量组比较,化痰祛湿活血方中、低剂量组及对照组大鼠肝组织ADPN、AdipoR2蛋白表达明显下降,p-NF-κBp65蛋白表达明显升高(P＜0.05,P＜0.01).结论 化痰祛湿活血方能通过上调肝组织中ADPN、AdipoR2、p-AKT(ser473)的蛋白表达,抑制p-NF-κB p65 (ser536)的蛋白表达,而有效改善肝功能、血脂、GLU,改善NASH大鼠肝组织脂肪变程度,减轻肝脏炎症.
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化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏病理的影响
目的 探讨化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织病理学的影响.方法 72只SD大鼠随机分为空白组、模型组、对照组和中药高、中、低剂量组,每组12只.空白组给予普通饲料,剩余各组均给予高脂饲料联合盐酸四环素腹腔注射建立NASH大鼠模型.从造模第2周起,对照组给予多烯磷脂酰胆碱胶囊混悬液28.5 mg/ (100g·d)灌胃;中药高、中、低剂量组分别给予化痰祛湿活血方混悬液5.0、2.52、1.26 g/ (100g·d)灌胃;正常组、模型组给予等剂量生理盐水灌胃.5周后测定各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平,肝组织切片行HE及油红O染色,观察肝组织病理及脂肪沉积面积变化.结果 与模型组比较,对照组和中药高、中、低剂量组治疗后血清ALT、AST、TG、TC水平均显著下降(P＜0.01),且中药高剂量组降低血清ALT、AST、TG、TC水平更显著(P＜0.05或P＜0.01).给药各组与模型组比较,肝细胞脂肪沉积的面积显著缩小或减少(P＜0.01),并且以中药高剂量组效果优(P＜0.01). 结论 化痰祛湿活血方能有效减轻肝脏损伤,改善肝细胞脂肪沉积,且以高剂量效果优.
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化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠炎症损伤及纤维化的干预作用
目的:探讨化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠肝组织炎症损伤及纤维化的影响.方法:雄性SD大鼠72只,随机分为空白组,模型组,多烯磷脂酰胆碱胶囊对照组,化痰祛湿活血方高(50.4 g/kg)、中(25.2 g/kg)、低剂量(12.6 g/kg)组.采用化学发光法检测化痰祛湿活血方对NASH大鼠谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT)、谷草转氨酶(millet straw transaminase,AST)、碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)、甘油三酯(triglycerides,TG)、胆固醇(cholesterol,TC)、葡萄糖(glucose,GLU)的影响,制作石蜡切片行苏木素-伊红染色(HE)检测化痰祛湿活血方对NASH大鼠肝组织炎症损伤的影响,行淀粉酶预处理-过碘酸雪夫氏染色(DPAS)检测化痰祛湿活血方对NASH大鼠肝组织中库普弗细胞的影响,行马松三色染色(Masson)检测化痰祛湿活血方对NASH大鼠肝组织纤维化的影响.结果:与模型组相比,各用药组ALT、AST、ALP、TG、TC、GLU均有不同程度下降(P＜0.05);高剂量组改善显著(P＜0.05);高剂量组在改善NASH大鼠炎症损伤及纤维化方面优于其他用药组(P＜0.05).结论:化痰祛湿活血方能够改善NASH大鼠肝组织炎症及纤维化程度,高剂量组疗效显著.
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化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠ADPN/AMPK/ACC通路的影响
目的 研究化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠脂联素(ADPN)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/乙酰辅酶A羧化酶(ACC)通路的影响.方法 72只SD大鼠随机分为空白组、模型组、对照组及高、中、低剂量组,除空白组外,其余5组以高脂饲料联合四环素腹腔注射建立NASH模型,造模第2周分别给予化痰祛湿活血方高、中、低剂量和多烯磷脂酰胆碱(易善复)胶囊对照治疗.实验结束时,观察肝匀浆游离脂肪酸(FFA)含量,ELISA及RT-qPCR法测肝组织ADPN、脂联素受体2(AdipoR2)、AMPK、ACC、肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT-1)的基因与蛋白表达.多组间数据比较采用方差分析,方差齐者进一步两组间比较采用LSD-t检验,方差不齐者采用Dunnett's T3法.结果 与对照组比较,高剂量组能明显降低肝匀浆FFA[(229.07±46.62)μmol/gprot vs(382.75±30.93) μmol/gprot]、肝组织ACC的基因(1.66±0.04vs2.40±0.37)、蛋白[(512.20±60.70) pg/gvs(756.72 ±61.21) pg/g]表达(P值均＜0.01),升高ADPN、AdipoR2、AMPK、CPT-1的基因[1.53±0.31 vs0.75 ±0.11,1.38±0.33 vs 0.61 ±0.09,1.43 ±0.39 vs 0.78 ±0.04,1.39 ±0.31 vs 0.52 ±0.04]、蛋白[(22.23±2.75) μg/gvs (14.01 ±2.17) μg/g,(128.41±10.46) ng/g vs(94.62±6.88) ng/g,(1353.79±59.52) μg/g vs(1107.19±56.78) μg/g,(175.54±9.91) U/g vs(128.74±12.74) U/g]表达(P值均＜0.01).结论 化痰祛湿活血方能够有效激活ADPN/AMPK/ACC信号通路,影响脂肪酸的β氧化及合成,减少肝细胞脂肪沉积.
