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甘松中甘松新酮的含量测定
目的:建立甘松中甘松新酮含量的测定方法.方法:采用反相高效液相色谱法,以Promosil C18柱(250mm× 4.6mm,5μ m)为色谱柱;以乙腈-水(70∶30)为流动相;流速为1mL/min;检测波长为250n m;柱温30℃;进样量10μL.结果:甘松新酮的进样量与峰面积呈良好的线性关系,线性范围是0.0431-0.8642μg,平均回收率为97.84％,RSD为1.57％.结论:该方法简便、快速、精密度好,可用于测定甘松中甘松新酮的含量.
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甘松新酮对缺糖缺氧损伤原代培养神经元的保护作用
观察甘松新酮对缺糖缺氧损伤原代培养神经元的保护作用.采用孕14天小鼠胚胎皮层制备原代培养神经元;MTT法确定甘松新酮对原代培养神经细胞的安全剂量,并观察其对缺糖缺氧神经元的保护作用；采用Western blotting法观察药物对缺糖缺氧损伤神经元以及正常培养神经元蛋白激酶A(PKA)和细胞外信号调节激酶(ERK)通路关键蛋白表达的影响.结果显示,甘松新酮(50和100 μmol·L-1)能够增加缺糖缺氧损伤神经元的存活率(P＜0.01,与OGD组比较)；同时,能增加缺糖缺氧神经元PKA、小分子G蛋白Ras的相关蛋白1(Rap1)、丝裂原激活的蛋白激酶的激酶1(MEK1)及磷酸化的ERK 1/2 (p-ERK 1/2)的表达,且此作用呈剂量依赖趋势.对正常培养神经元研究结果显示,甘松新酮(50、100和200 μmol·L-1)也能增加其PKA、Rap1、MEK1及p-ERK1/2的表达(P＜ 0.01).以上结果表明,甘松新酮对缺糖缺氧损伤的原代培养神经元有明确保护作用,该作用可能与药物激活PKA和ERK通路有关.
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甘松新酮对快速性心律失常大鼠心肌细胞抑制作用的实验研究
目的 研究甘松新酮对快速性心律失常大鼠心肌细胞的抑制作用. 方法用数字表法将60只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组及甘松新酮组,各20 只. 模型组、甘松新酮组大鼠舌下静脉注射0.002%乌头碱1 mL·kg-1 ,建立快速性心律失常动物模型. 甘松新酮组大鼠腹腔注射甘松新酮100 μg·g-1 (约0.5 mL);正常组、模型组大鼠腹腔注射等量生理盐水. 用多导电生理记录仪测量各组大鼠的心率、血流动力学及心系数指标,用激光共聚焦显微镜测量心肌细胞钙离子,放免法、凝胶成像法检测环磷酸腺苷( cAMP)及蛋白激酶A( PKA)变化.结果 正常组,心率、左心室终末舒张压( LVEDP)、心系数及 Ca2+水平显著低于模型组( P <0.05 ) ,其左心室收缩压( LVSP )、+dp/dtmax、-dp/dtmax均显著高于模型组(P<0.05);甘松新酮组,上述指标较模型组有明显改善( P<0.05).正常组,心肌组织cAMP、PKA水平显著低于模型组(P<0.05);正常组与甘松新酮组的依赖蛋白激酶(cAMP)、激酶A(PKA)水平无明显差异( P>0.05). 结论 甘松新酮可通过影响cAMP-PKA细胞信号转导通路,促进心功能的恢复,抑制心肌细胞钙超载,能够明显改善快速性心律失常大鼠心律.
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甘松属植物化学成分与药理作用
甘松属药用植物中含有萜类、黄酮类、香豆素类和木脂素类等主要化学成分.该属植物及其提取物具有镇静、抗癫痫、抗惊厥、抗抑郁、抗帕金森症、抗心律失常、抗心肌缺血、保护心肌细胞、降血压等药理活性.综述了甘松属3种药用植物甘松、匙叶甘松、大花甘松的生药学研究、化学成分与药理作用,并介绍了目前的资源利用与保护情况.
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HPLC同时测定不同产地甘松中绿原酸和甘松新酮的含量
目的:建立同时测定甘松中绿原酸、甘松新酮含量的测定方法,测定不同产地甘松中绿原酸和甘松新酮的含量,以控制其质量.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse Plus C18(250mm ×4.6mm,5μm),以乙腈-水(含0.1%磷酸)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0mL/min,柱温为25℃,进样量为10μL,检测波长为274nm.结果:绿原酸、甘松新酮的浓度与峰面积呈良好的线性关系,其线性范围分别是0.1278~3.1954μg(r=0.9993,n=6)、0.3546~8.8654μg(r=1,n=6),平均回收率分别为99.2%,101.1%,RSD分别为1.73%,1.10%.结论:本法方便、准确、重现性好,可用于甘松药材中绿原酸和甘松新酮的含量测定.
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甘松药材高效液相色谱指纹图谱及甘松新酮含量测定
目的 研究甘松药材的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,测定甘松新酮含量,以建立药材有效的质量评价方法 .方法通过建立HPLC指纹图谱和有效成分含量测定方法,对10批甘松药材进行分析.HPLC色谱条件:色谱柱为Phenomenex-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-水(60:40);流速:0.8 mL·min-1;检测波长:250 nm;柱温:25℃.指纹图谱流动相为梯度洗脱.结果 得到分离度、重复性很好的甘松药材HPLC指纹图谱,对10批不同甘松药材的色谱指纹图谱进行相似度评价,不同产地甘松药材指纹图谱差异不大,但4个代表性峰含量有所区别.HPLC-DAD法测定10批甘松样品中甘松新酮的含量,结果显示不同产地甘松药材中甘松新酮含量差异较大.结论 该方法简便、准确、重复性好,可作为甘松药材的质量控制方法.
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HPLC法同时测定失眠花草药枕中4种有效成分的含量
目的:建立同时测定失眠花草药枕中4种有效成分女贞苷、甘松新酮、蔓荆子黄素和苍术素含量的HPLC测定方法.方法:采用HPLC法,色谱柱为SunFireTM C18(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温:30℃;流速:1.0 ml·min-1;检测波长为254nm;以甲醇-0.1％磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱.结果:在45 min内花草药枕药粉中的女贞苷、甘松新酮、蔓荆子黄素、苍术素4种有效成分色谱分离度良好;4个被测成分在各自测定的线性范围内线性关系良好(r女贞苷=0.999 8;r甘松新酮=0.998 9;r蔓荆子素 =0.999 7;r苍术素=0.999 8);平均加样回收率为97.4％～103.7％,RSD均小于2.4％(n=9).结论:本方法简便易行、稳定可靠、专属性强,可用于失眠花草药枕的质量控制.
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甘松新酮的稳定性研究
目的:考察甘松新酮及其溶液的稳定性,为对照品研制提供参考.方法:将甘松新酮固体放置高温、高湿以及光照条件下10 d,分别于第5天和第10天用HPLC法测定其含量变化;在室温下将甘松新酮乙醇溶液分别用氢氧化钠溶液或盐酸调节pH至设定值,放置72 h,考察pH对其醇溶液稳定性的影响;采用经典恒温法预测甘松新酮醇溶液在室温下和4℃条件下的稳定性.结果:甘松新酮固体在高温(60℃)以及高湿条件下稳定,在10 d内光照条件下降解到92.19％;甘松新酮乙醇溶液在碱性环境下基本稳定,在酸性以及高温环境中则迅速降解,且温度越高,降解速率越快;甘松新酮醇溶液在室温下的有效期(t90)为73.18 h,4℃下为1 621.22 h.结论:甘松新酮对光以及高温敏感,应避光保存;在提取分离以及给药过程中应注意控制温度低于40℃以及溶液pH在7～12范围内.
