首页 > 文献资料
-
食品中伤寒沙门氏菌TaqMan探针实时PCR检测方法
建立实时荧光PCR快速鉴定伤寒沙门氏菌（Salmonella Typhi）的方法。根据GenBank公布的伤寒沙门氏菌基因序列，设计引物和Taqman探针，采用实时荧光PCR进行特异性、灵敏性及模拟样品的检测实验。结果表明，特异性引物和探针可从31株伤寒沙门氏菌菌株、27株其他血清型沙门氏菌和7株非沙门氏菌菌株中鉴定出全部的31株伤寒沙门氏菌。以伤寒沙门氏菌梯度稀释菌液DNA为模板进行实时荧光PCR扩增，菌株模板浓度与Ct值呈良好线性关系，线性系数为0.994，扩增效率为94.5%，低检测浓度为4cfu/mL的添加浓度。实时荧光PCR检测与传统方法相比较，两者结果一致。该方法特异性好、灵敏度高，可以快速鉴定伤寒沙门氏菌。
-
PCR技术快速检测血培养阳性标本中大肠埃希菌方法的建立
目的：初步建立PCR技术直接快速检测血培养阳性瓶中大肠埃希菌的方法。方法采用美国BiOstic? Bacteremia DNA Isolation Kit（血培养液DNA提取试剂盒），提取102份经革兰染色确定为革兰阴性杆菌的血培养阳性标本细菌DNA，用自行设计的大肠埃希菌特异性引物进行PCR扩增，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳进行细菌鉴定，结果与VITEK-Ⅱ微生物全自动分析仪鉴定结果进行比较。结果102株革兰阴性杆菌经VITEK-Ⅱ微生物全自动分析仪鉴定出33株大肠埃希菌，PCR方法鉴定出31株，两者进行配对χ2检验，P>0.01，两种检测方法无差别。结论该PCR技术可用于快速检测血培养标本中大肠埃希菌，耗时3～4小时；该技术也可为其他病原菌的PCR检测方法的建立奠定基础。
-
吡咯烷酮芳胺酶在细菌快速鉴定中的应用
吡咯烷酮芳胺酶(Pyrrolidonyl βaminopeptidase,pYR)初用于肠球菌的鉴定,应用含底物的液体培养基,24-48h观察结果.
