顶空气相色谱法快速鉴定大米中油漆异味成分

2001年3月19日我站卫生科接樟木头车站粮食仓库的紧急电话,内容是:有二个车皮的大米怀疑受到油漆异味的污染,要求尽快进行检测,以确定污染物的成分及污染的程度.我科分别于3月19日、3月26日运用顶空气相色谱法对污染的大米进行了快速鉴定,确定异味成分分别为:苯、甲苯、二甲苯和松节油,并进行了定量,当天即完成了分析,有力地支持了污染事故的分析和处理.

应用MUG-Indole试剂盒快速鉴定药品中大肠杆菌

MUG-Indole法(简称M-I法)是高度专一快速鉴定大肠杆菌新技术.MUG-Indole试剂盒是我们根据M-I法对其培养基装置进行改进.即把专用的培养基密封在安瓿中,并配有专用试剂.试剂盒克服了原培养基分装在小试管中,因密封不严,存放后培养基量减少,色泽变深或被污染,以致影响结果等缺点,具有灵敏快速(5～24h内即可出结果),准确、无主观性,携带及使用方便并可较长期存放等优点.

伊文思蓝染色技术快速鉴定新型隐球菌

目的:探讨伊文思蓝染色技术快速鉴定新型隐球菌在临床检验医学诊断工作中的应用.方法:配制伊文思蓝染色液,评估伊文思蓝染色液的稳定性及其;用伊文思蓝染色液对新型隐球菌、白色念珠菌等常见真菌及白细胞染色,综合评价其染色效果,进一步比较伊文思蓝染色液、阿利新蓝染色液、墨汁对新型隐球菌的染色效果.结果:新型隐球菌被伊文思蓝染色液染成蓝色或深蓝色,白细胞及其他常见真菌不着色,易于将新型隐球菌与自细胞及其他常见真菌区分;伊文思蓝染色液稳定性好,染色效果稳定,优于阿利新蓝染色和墨汁染色,伊文思蓝染色能在计数板中计数新型隐球菌,阿利新蓝染色易凝集对计数有一定的影响,而墨汁染色则无法计数.结论:伊文思蓝染色技术快速鉴定新型隐球菌设备要求简单、方法快速敏感,有很好的和稳定性,适用各类医院推广应用.

用于白色念珠菌快速鉴定的两种培养基

白色念珠菌为临床上为常见、致病力也强的酵母样真菌,近年来由其引起的感染逐渐增加,成为当前较棘手的医学问题之一,因而从食品、环境及各种临床标本中进行白色念珠菌的快速分离和鉴定显得甚为重要.

双歧杆菌基因组DNA提取几种方法的比较

双歧杆菌的保健功能现已为人们广泛认可,随着双歧制品微生态制剂普及,人们对相关产品内在质量投诉也相应增多,因此快速鉴定产品中双歧杆菌是当务之急,由于双歧杆菌目前检测缺乏有效的选择培养基和鉴别培养基,依据其形态和生理特性进行鉴别程序复杂,结果不稳定,因此双歧杆菌的分子生物学检测一直是近年研究热点,目前报道较多的有PCR法,RAPD法,RFLP法,而在PCR和RAPD扩增中,都对DNA纯度有较高要求,特别是干扰PCR扩增的多糖和蛋白质要清除掉,由于双歧杆菌细胞壁有类似真菌的特性,因此其DNA提取不同于革兰氏阴性菌(溶菌酶-煮沸法),据文献报到目前双歧杆菌DNA提取有几种方法,溶菌酶-SDS-醋酸钾法[1],溶菌酶-SDS-酚/氯仿法[2],溶菌酶-煮沸法,改良氯化苄法[3].本实验对该四种方法做了比较,认为醋酸钾法和氯化苄法提取DNA效果较好.

高分辨溶解曲线技术鉴定常见致病分枝杆菌研究

目的 建立快速、准确鉴定临床常见分枝杆菌菌种的聚合酶链高分辨溶解曲线(polymerase chain reaction high resolution melting,PCR-HRM)分析方法,为临床分枝杆菌感染的早期诊断和治疗提供新帮助.方法 收集传统罗氏培养法的81株分枝杆菌.以16S-23S rRNA内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)为靶基因合成引物,建立PCR-HRM方法.以测序结果为金标准,将PCR-HRM法和传统罗氏培养法鉴定的结果进行对比.结果 81株分枝杆菌中,PCR-HRM法和罗氏培养法的正确鉴定率分别为100％、95.1％,PCR-HRM法和罗氏培养法的正确鉴定率无统计学差异(P＞0.05).两种方法检测结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)的符合率均为100％,PCR-HRM方法检测非结核分枝杆菌(nontuberculosis mycobacteria,NTM)的符合率为100％,罗氏培养法检测NTM的符合率为92.9％.结论 初步建立了分枝杆菌PCR-HRM鉴定方法,该方法可准确鉴定常见的MTB和NTM,可能成为临床分枝杆菌感染的快速鉴定方法.

微生物快速鉴定方法进展

微生物鉴定在药品质量控制方面起着举足轻重的作用,终将达到有效预防微生物污染的目的.微生物快速鉴定方法包括细菌微菌落技术、血清学鉴定、选择鉴定用培养基法、微量多项实验鉴定系统、分子生物学技术等.本文对上述各种检测微生物的方法的研究进展作一综述.

血浆凝固酶阴性葡萄球菌快速"两步一补"鉴定方法

目的研究血浆凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的生化反应特性,建立一种血浆凝固酶阴性葡萄球菌快速"两步一补"鉴定方法.方法对临床分离的CNS菌株,运用"两步一补"法进行鉴定,然后随机抽取一定量的菌株,经双盲法用法国梅里埃API Staph试条进行复核.结果该方法4h内能鉴定出54.8%的CNS,24h能鉴定出96.3%的CNS,48小时内能鉴定出全部CNS.随机抽取的80株CNS经过API Staph试条进行复核,符合率100%.结论"两步一补"法鉴定CNS具有快速简单、准确可靠及成本低廉等优点,更适合基层医院推广应用.

多重聚合酶链反应技术快速鉴定鲍曼不动杆菌

目的 建立快速鉴定鲍曼不动杆菌菌株的方法.方法 本研究建立多重PCR实验技术快速鉴定170株醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体以及对照组的其他菌属14株.结果 138株菌的PCR产物扩增出2条条带,为鲍曼不动杆菌,另外32株只扩增出1条条带,为醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体的其他基因型,对照组的菌株没有扩增出条带.结论 多重PCR技术的建立为快速鉴定鲍曼不动杆菌提供了一个快速而简便的方式.

快速鉴定人肺部感染中非结核分枝杆菌的一种简单方法

目的 建立一种快速鉴别结核分枝杆菌(tuberculous mycobaetefia,TIM)和非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria.NTM)的简单方法.方法 收集165例诊断为肺结核病人的痰标本,经除污染杂菌处理后各取0.1 ml的痰液沉淀物.分别加入到含不同浓度对硝基苯甲酸(para-nitro benzoic acid,PNB)的未成熟椰汁液体培养基和罗氏培养基中培养.对在含PNB的培养基中生长的阳性培养物进行烟酸检测.结果 所测样本菌株中有18株在含PNB的培养基中生长.其培养物中检测不含烟酸.形态学检查18例未成熟椰汁液体培养基中阳性培养物都不同于典型的结核分枝杆菌.结论 含PNB的未成熟椰汁液体培养基,可作为一种快速鉴定人肺部感染中非结核分枝杆菌的简单筛选方法.

近红外光谱技术在制川乌配方颗粒成品快速鉴定研究

目的：采用近红外光谱（NIR）法快速鉴定制川乌配方颗粒成品。方法：采用干法制粒考察制川乌配方颗粒的成型工艺并用NIR评价。结果：制川乌配方颗粒优选成型工艺为取喷干粉（物料水分控制3%~4%，制粒过程中适量喷洒95%药用乙醇），置干法制粒机制粒，压轮压力0.3~0.35Mpa，侧封压力0.05~0.06Mpa，装12目筛整粒，取1~4号筛之间的颗粒为合格颗粒；经相关性统计学分析，配方颗粒样品中单酯型生物碱的NIR预测值与HPLC参考值的相关系数r=0.957，P<0.001，水分的NIR预测值与烘干法参考值的相关系数r=0.961，P<0.001。结论：NIR预测值与HPLC参考值、烘干法参考值的相关性较好，可用于制川乌配方颗粒的相关成分快速检测。

止痛止痒类中成药中化学添加剂的快速鉴定方法

目的 研究止痛止痒类中成药物采用非化学法鉴定8种非添加化学药品方法.方法 利用薄层色谱法对于中成药制剂的添加成分进行快速筛选,并利用高效液相色谱法对疑似样品进行分析,同时对腰间盘突出止痛药、风湿骨痛贴以及清新百合紫苏胶囊中的添加成分进行分析.结果 腰间盘突出止痛药、风湿骨痛贴以及清新百合紫苏胶囊中分别添加双氯芬酸钠、醋酸泼尼松等成分.结论 采用HPLC与TLC方法进行结合检验,可以有效筛查出药制剂中的非法添加制剂,有利于药物市场质量控制.

一种快速鉴定核糖核酸质量的方法

血中22种常见毒/药物的液相色谱-串联质谱法快速鉴定

目的 为了快速鉴定血中22种常见毒/药物.方法 采用液相色谱-串联质谱作为分离测试手段,检测模式为多反应监测模式,血液1 mL中加入2 mL乙酸乙酯,涡旋震荡3min,5000 r/min离心5 min,取有机层,重复萃取过程三次,合并有机相,氮吹至干,残余物中加入100 L流动相,涡旋震荡1 min,取5 L进样鉴定.结果 10 min内完成22种常见毒药物的快速鉴定,检出限为0.03到6.00ng/mL范同内;在中国合格评定委员会组织的能力验证考核中,采用方法所测结果满意.结论 所开发方法开速、准确、灵敏.

MRSA-PBP2a单克隆抗体乳胶凝集检测法的建立

[目的]应用抗PBP2a单克隆抗体,以化学交联法致敏羧化聚苯乙烯乳胶,建立快速检测MRSA-PBP2a的乳胶凝集法.[方法]以辛酸-硫酸铵法纯化PBP2a单克隆抗体,将纯化后单克隆抗体和羧化乳胶经碳化二亚胺(EDC)共价偶联,并对偶联条件(偶联抗体浓度、乳胶浓度、偶联时间和偶联缓冲液)进行探索和优化,建立检测PBP2a的乳胶凝集法.[结果]140 ms/L的抗体浓度与15 g/L的羧化聚苯乙烯乳胶,在pH 5.8缓冲液中偶联8 h后有较好的凝集效果和偶联效率,所建立的乳胶凝集法敏感性和特异性良好.[结论]初步建立了检测PBP2a的胶乳凝集法,为研制MRSA快速鉴定试剂盒奠定了良好的基础.

应用科玛嘉酵母菌显色培养基快速鉴定酵母菌

近年来,由酵母菌引起的各种感染不断增加,其耐药株也有不断增加的趋势.科玛嘉酵母菌显色培养基(以下简称显色培养基)是通过菌落的不同颜色和形态对酵母菌进行快速鉴定的一种选择性培养基.为了全面评价这种培养基的实际应用价值,我们采用这种显色培养基对250份临床标本进行酵母菌分离鉴定,再用VTTEK-YBC卡进行酵母菌的鉴定,并将两者结果进行比较,现报告结果如下.

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪在侵袭性真菌感染病原真菌鉴定中的应用

目的：评价基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪（MALDI-TOF MS）对侵袭性真菌感染病原真菌鉴定的应用价值。方法：选取2013年1月至2014年3月南方医科大学珠江医院住院部35例静脉血或脑脊液培养真菌阳性标本，用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）技术进行鉴定，同时进行Vitek2全自动微生物鉴定系统鉴定，将两种方法的鉴定结果进行比对，两者鉴定结果不符合的采用核糖体RNA内转录间隔区2（ITS 2）序列分析后确证结果，从而评价质谱法的准确性、实用性。结果：MALDI-TOF MS正确鉴定出其中的30例（85．7％），错误5例（14．3％）；Vitek2全自动微生物鉴定系统正确鉴定出35例（100．0％）。结论：MALDI-TOF MS相对于传统的生化鉴定具有操作简便、快速、成本低、重复性好的优点，但本次研究的准确率不如传统生化鉴定，也比之前国内外报道的准确率低，可能跟标本的前处理难以统一规范以及蛋白提取程序不一致有关。相信随着MALDI-TOF MS技术的统一规范和图谱数据库不断的完善，基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪将成为日常临床微生物鉴定的理想工具。

简略快速法在大肠埃希菌鉴定中的应用价值研究

目的 比较简略快速法与自动生化鉴定法在大肠埃希菌鉴定中的能力差异.方法 使用快速简略鉴定法和自动生化鉴定法对临床标本分离的疑似大肠埃希菌进行鉴定,比较两种方法结果的一致性及检测时间.结果 492株疑似大肠埃希菌经快速鉴定法检出248株大肠埃希菌及244株非大肠埃希菌;该248株大肠埃希菌中,有231株被自动生化鉴定仪确认为大肠埃希菌,而244株非大肠埃希菌中,有7株被确认为大肠埃希菌.简略快速法阳性预测值及阴性预测值分别为93.1%(231/248)及97.1%(237/244).使用自动生化鉴定法耗时2.5~7.0h,平均(4.12±1.08)h;使用简略快速法耗时0.5~2.0h,平均(1.08±0.45)h,差异具有统计学意义(t=-40.252,P<0.001).结论 使用简略快速法鉴定疑似大肠埃希菌可以获得接近于自动生化鉴定法的结果,且更加节省时间.

白假丝酵母菌伪足现象的鉴定

目的 伪足法用于白假丝酵母菌与非白假丝酵母菌鉴别的临床评价.方法 将标本接种于巧克力平板,5%CO2、37 ℃培养48 h,观察菌落周围是否出现伪足,并以标准方法确认.结果 181株白假丝酵母菌中,169株出现伪足现象;55株热带假丝酵母菌中4株出现伪足现象;8株克柔假丝酵母菌中,2株出现伪足现象.以"伪足现象"鉴定白假丝酵母菌的灵敏度为93.4%(95%CI:88.8%～96.2%),特异度为95.2%(95%CI:89.9%～97.8%).结论 伪足法鉴定白假丝酵母菌具有简单、经济、快速的特点,有较高的灵敏度和特异度,适宜推广应用.

MALDI-TOF-MS鉴定丝状真菌研究进展

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