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结核分枝杆菌胶体金法快速鉴别试剂盒的临床应用观察
目前,传统的分枝杆菌菌种鉴定方法需在改良罗氏L-J培养基、硝基苯甲酸PNB和2-噻吩羧酸肼(TCH)鉴别培养基上初步鉴定结核分枝杆菌(MTb)和非结核分枝杆菌(MOTT)后,再观察细菌菌落形态、生长速度、生长温度和色素,并进行一系列生化试验,操作繁琐、费时,影响因素多;
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用鸡血代替羊血制作血平板
微生物学试验离不开培养基[1]的制备.根据培养的细菌种类和培养的目的不同,可配置不同种类的培养基:如基础培养基、营养培养基、鉴别培养基等.
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卵黄甘露醇高盐琼脂鉴别培养基的研究
我们根据金黄色葡萄球菌(金葡菌)的生理生化特点,研制了一种既经济又快速的卵黄甘露醇高盐琼脂(EMSA)鉴别培养基.
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聚合酶链反应-反向斑点杂交法直接从BACTEC-960阳性培养物鉴定分枝杆菌菌种
目前,常规的分枝杆菌菌种鉴定需采用分枝杆菌培养物进行生长特性试验(生长速度、生长温度、光产色试验、多种鉴别培养基上生长试验)及生化特性试验(耐热触酶试验、硝酸盐还原试验、烟酸试验、吐温-80水解试验、尿素酶水解试验、芳香硫酸酯酶试验、铁离子吸收试验、亚碲酸盐还原试验)等10余项试验,综合分析判定结果,方法复杂、费时、准确度较差,难以满足临床诊断和治疗的需要.
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多种肠道致病菌初筛鉴定培养基研制
肠道杆菌是寄居在人类和动物肠道中生物学性状近似的革兰阴性杆菌,是引起腹泻病的病原菌.大多数肠道杆菌是肠道的正常菌群,但当宿主免疫力降低或细菌侵入肠道外部等特定条件下也可成为条件致病菌而引起疾病或食物中毒.在肠道菌的鉴定方面,致病性的肠道菌所用的初筛培养基对变形杆菌族的细菌无特殊的鉴别意义.为简化细菌鉴定实验手段,提高工作效率,我们利用细菌的各种生长特性,研制出一种简单、快速、易于掌握、特异性和稳定性强的鉴别培养基.现将结果报告如下.
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涂片镜检结合胶体金法对结核杆菌复合群的鉴别价值
目的:探讨结核分枝杆菌在BACTEC960中湿片镜检形态特征及胶体金法对结核杆菌复合群的鉴别价值。方法收集陕西省结核病防治院经BACTEC 960培养阳性920例,进行直接涂片湿片镜检、涂片抗酸染色、胶体金法菌群鉴定,并以PNB(对硝基苯甲酸)和TCH(噻吩-2-羧酸肼)鉴别培养基菌群检测为标准。结果结核分枝杆菌(MTB)在液体培养管中呈镜检呈索状排列98.3%(832/846);非结核分枝杆菌( NTM)镜检呈团状排列32.43%(24/74)、块状排列35.13%(26/74)、散在排列为24.32%(20/74)。胶体金法检测结核分枝杆菌的敏感性98.34%(832/846),特异性98.64%,阳性预测值99.87%,阴性预测值86.90%。结论湿片观察结核分枝杆菌在BACTEC 960培养管中形成索状排列,较涂片抗酸染色更简便、快速,对鉴定分枝杆菌有初筛作用。
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利用WS琼脂特殊菌落挑选沙门氏菌
肠道沙门氏菌菌落在鉴别培养基上特性与一些非沙门氏菌非常相似,而作者经多年的摸索发现沙门氏菌在WS培养基上有其特殊的菌落特征.现介绍如下:
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双歧杆菌基因组DNA提取几种方法的比较
双歧杆菌的保健功能现已为人们广泛认可,随着双歧制品微生态制剂普及,人们对相关产品内在质量投诉也相应增多,因此快速鉴定产品中双歧杆菌是当务之急,由于双歧杆菌目前检测缺乏有效的选择培养基和鉴别培养基,依据其形态和生理特性进行鉴别程序复杂,结果不稳定,因此双歧杆菌的分子生物学检测一直是近年研究热点,目前报道较多的有PCR法,RAPD法,RFLP法,而在PCR和RAPD扩增中,都对DNA纯度有较高要求,特别是干扰PCR扩增的多糖和蛋白质要清除掉,由于双歧杆菌细胞壁有类似真菌的特性,因此其DNA提取不同于革兰氏阴性菌(溶菌酶-煮沸法),据文献报到目前双歧杆菌DNA提取有几种方法,溶菌酶-SDS-醋酸钾法[1],溶菌酶-SDS-酚/氯仿法[2],溶菌酶-煮沸法,改良氯化苄法[3].本实验对该四种方法做了比较,认为醋酸钾法和氯化苄法提取DNA效果较好.
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B群链球菌鉴别培养基的研究
目的 研究B群链球菌(group B streptococcus,GBS)鉴别培养基的佳配方和鉴别培养效果.方法 通过观察GBS在不同配方培养基上的生长状况及显色反应,筛选确定GBS鉴别培养基的佳配方;在佳配方条件下引入直肠和生殖道中常见的其他杂菌进行干扰试验,进一步检测GBS鉴别培养基的鉴别作用.结果 当可溶性淀粉浓度为1.0% ~2.5%,血清浓度≥7.0%,pH为7.2 ~7.7时,GBS鉴别培养基上的B群链球菌显色反应明显,且其鉴别作用不受其他杂菌影响.结论 GBS鉴别培养基适用于GBS的鉴别培养.